INTRODUCCIN

se sabe que la espectrofotometra tiene un importante uso en la vida del hombre pues
ha facilitado las cosas para llevar a cabo ciertas actividades sin embargo la espectrofotometra tiene algunas limitantes y entre ellas sabemos que no nos serviran para trabajar con ciertas sustancias, importantes; pero afortunadamente se ha inventado la cromatografa de gases que es ms avanzada y nos ayuda a entender ciertos parmetros que en la espectrofotometra no se pueden estudiar, en este ensayo veremos las ventajas y desventajas, cuando se aplica una y cuando la otra etc.

CROMATOGRAFA Y ESPECTROFOTOMETRA
Brianda Villanueva Escobar

La cromatografa es un mtodo de separacin de mezclas moleculares; es una tcnica

de separacin basada en el intercambio de los solutos entre dos fases las cuales son: mvil y estacionaria Las distintas combinaciones de estas fases nos proporcionan las diferentes clases de cromatografa; por ejemplo si la fase mvil es un gas tenemos la cromatografa de gases, la cual puede ser gas - slido y gas - lquido segn la naturaleza de la fase estacionaria. La muestra que va a ser analizada es introducida en el puesto de inyeccin por medio de un dispositivo automtico o en forma manual as se pueden analizar slidos, lquidos y gases. En el puesto de inyeccin la muestra es vaporizada en forma instantnea y por tanto, las muestras deben ser voltiles y trmicamente estables. . El registro grfico obtenido se conoce como cromatograma donde cada componente va a estar representado por una banda o pico ; esta serie de picos sirven como base para los anlisis cualitativo y cuantitativo. En el tiempo de retencin ; el anlisis cualitativo se hace con base a estos, en teora este dato debe ser til para la identificacin, pero en la prctica el nmero de variables que deben ser controladas son muchas para obtener valores reproducibles de tiempos de retencin, limitando la aplicacin de la tcnica; adems siempre se debe disponer de una muestra autntica de la sustancia y es posible que compuestos diferentes posean tiempos de retencin similares muy cercanos; en este caso es necesario recurrir a tcnicas no cromatogrficas como la espectrometra de masas para lograr una identificacin certera. En las determinaciones cuantitativas se pueden obtener muy buenos resultados, si se emplean las tcnicas adecuadas. Este anlisis se basa en que el rea bajo los picos es proporcional a la cantidad de compuesto en la muestra; sin embargo, se debe tener en cuenta que el detector no da igual respuesta a la misma cantidad de diferentes compuestos y es necesario hacer correcciones y/o curvas de calibracin con estndares (donde los estndares son de alta pureza con un 99.9%), para lograr una cuantificacin confiable. Las ventajas de la CG, sobre otras tcnicas son:

1. Velocidad: un anlisis completo puede realizarse en tiempos relativamente cortos, proporcionando informacin para los anlisis cualitativo y cuantitativo. 2. 3. Resolucin: es la capacidad de separar componentes; usando las condiciones analticas adecuadas se pueden hacer separaciones imposibles de realizar por otros mtodos. Sensibilidad: esta es la mejor razn para utilizar esta tcnica. La tcnica tambin tiene sus limitaciones en lo que se refiere a caractersticas de la muestra para anlisis y la incertidumbre en la identificacin de los componentes. Para superar las dificultades en los anlisis de muestras poco voltiles, en la actualidad se est utilizando la cromatografa lquida de alta eficiencia. La cromatografa se puede utilizar en los anlisis cuantitativos y cualitativos, tambin identifica lo que nosotros deseemos siempre y cuando tengamos una idea de lo que contiene nuestra muestra o bien sospechemos que existe ciertas partculas, para ello tambin se debe identificar el estndar que se aplicara ya que existen estndares diferentes para cada muestra.

La espectofotometra es un mtodo que se utiliza para determinar la concentracin de

sustancias en solucin a travs de la intensidad de color que poseen naturalmente o que producen por una reaccin cromtica. La intensidad de color se determina mediante la absorcin de luz de longitud de onda determinada en el espectro visible. El aparato utilizado es el espectrofotmetro. La concentracin es directamente proporcional absorbancia concentracin, transmitancia concentracin. La espectrofotometra nos sirve para conocer la concentracin de sustancias en solucin en la cual se utiliza el espectrofotmetro que es un instrumento que permite comparar la luz absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia, La Ley de Beer declara que: la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la concentracin en la solucin esto nos quiere decir que a mayor concentracin mayor absorbancia, y a menor concentracin menor transmitancia; la ley de lambert menciona que la cantidad de luz absorbida por un objeto depende de la distancia recorrida por la luz por ejemplo si nosotros pusiramos dos vasos de azcar con la misma concentracin y la misma cantidad de solucin pero el segundo con un dimetro mayor si hiciramos que en un rayo de luz atravesara por el primero con seguridad se podra decir que la cantidad transmitida seria mayor que la de el segundo ya que en el segundo las ondas chocan con una mayor cantidad de molculas que absorben luz y dejan pasar menos luz por el otro lado entonces se dice que la ley de beer y lambert coinciden, es por ello que fue creada la ley de lambert beer. Como sabemos la espectrofotometra nos ayuda para conocer concentraciones sin embargo existen

sustancias que transmiten luz y hay otras que la dejan pasar toda, esto quiere decir que la espectofotometra no se puede llevar acabo porque debe existir una relacin de absorbancia concentracin , transmitancia concentracin, deben ser sustancias que absorban energa pero no toda la energa o bien sustancias que no dejen pasar toda la luz, sabemos que cuando se hace una curva de calibracin la linea recta tiene que tocar por lo menos uno de los puntos; entonces cuando se preparan soluciones ms concentradas en la grfica se puede apreciar que la linea recta empieza a curvearse esto se debe a que se rompe el punto de absorbancia concentracin, transmitancia concentracin y damos paso a comprobar la ley de lambert-beer. La espectofotometra se puede llevar a cabo en todas aquellas sustancias biolgicas es ms se puede aplicar en todas aquellas sustancias siempre y cuando absorban energa y no haya las limitantes antes vistas. Algunas de las aplicaciones de la espectofotometra son: la determinacin de estructuras moleculares. La identificacin de unidades estructurales especificas . para determinar concentraciones en las sustancias se puede aplicar en los suelos. Para saber cuantas partes por milln de cualquier sustancia entran en nuestro cuerpo. En el tratamiento de agua. Etc. Como se ha visto la cromatografa nos sirve para hacer un anlisis cuantitativo y cualitativo o bien para hacer que una muestra se separe en cada uno de sus componentes en cambio la espectrofotometra nos sirve para saber la concentracin de una muestra conociendo las sustancias que se meten en el espectrofotmetro, es muy importante que se sepa si la muestra es capas de absorber y/o transmitir luz la espectrofotometra se puede aplicar siempre y cuando la muestra absorba luz y la cromatografa se aplica siempre y cuando tengamos un estndar y conozcamos o sepamos que en realidad existe la partcula a identificar, la ventaja de usar la cromatografa es que es un mtodo rpido eficiente y sensible ya que en la cromatografa los picos te muestran donde esta lo que deseas analizar, si se desea se elimina el ruido(es muy importante para que no perturbe el cromatgrafo) en cambio en la espectrofotometra se debe hacer una curva de calibracin y sobre todo hacer varias repeticiones para saber si en realidad se esta llevando con certeza el anlisis, adems es difcil trabajar cuando hay mucho

ruido y cuando existen cantidades muy pequeas de la muestra no se pueden analizar, sin embrago se sigue teniendo la mustra en cambio en la cromatografa la mustra se destruye por completo aunque para estudiar la particula debe haber un estandar el cual tiene un 99.9% de pureza en cambio en espectrofotometra slo se necesita que la mustra absorba luz.

CONCLUSIN La espectrofotometra es un mtodo analtico indirecto porque se basa en la medicin

de la absorbancia o transmitancia de lasr adiciones; es de gran utilidad en la actualidad para la identificacin de un analito en una muestra problema, puede utilizarse casi en todas las sustancias que sean lquidas siempre y cuando estas absorban luz y/o dejen transmitir luz para determinar su concentracin y no tengan una limitante. La cromatografa es un mtodo de separacin de mezclas el cual tiene la particularidad de mandar una seal si el estandar es correcto. Tanto la espectrofotometra como la cromatografa son importantes ya que sirven para analizar muestras y cualquiera de estas tcnicas se puede usar slo hay que saber cual es la correcta ya que existen algunas limitantes tanto para cromatografa como para espectrofotometra es necesario que sepamos distinguir cuando y como usar cada tcnica.