DETERMINACIN DE GRASA Mtodo Bligh & Dyer

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Laboratorio Nutrientes Aditivos y Contaminantes

PRT-711.02-156

1. OBJETIVO Obtener la grasa de un alimento homogenizado mediante extraccin directa con disolventes en fro. 2. CAMPO DE APLICACIN Y ALCANCE Esta tcnica ser aplicada a muestras de alimentos especialmente para extraer lpidos en fro para identificacin por cromatografa de gases y pruebas de rancidez. 3. FUNDAMENTO El mtodo se basa en la homogeneizacin de alimentos hmedos con metanol y cloroformo en proporciones tales que forman una fase sencilla miscible con el agua en los alimentos, que al adicionar posteriormente cloroformo y agua se separan dos fases con los materiales lpidos en la capa de cloroformo. 4. REFERENCIAS Anlisis Qumico de Alimentos de Pearson. Egan, H; Kirk R y Sawyer R. Compaa Editorial Continental, Mxico. 1988. 5. TERMINOLOGA No Aplica 6. MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

6.1 MATERIALES Y EQUIPOS 6.1.1 Balanza analtica rango 0,01g 6.1.2 Homogenizador 6.1.3 Centrfuga 6.1.4 Rotavapor 6.1.5 Estufa 6.1.6 Micropipeta 6.1.7 Vortex 6.1.8 Material de laboratorio: filtros, vasos, tubos tapa rosca, etc 6.2 REACTIVOS 6.2.1 Metanol p.a. 6.2.2 Cloroformo p.a. 6.2.3 Hidrxido de potasio p.a. 6.2.4 ter de petrleo

7.

DESARROLLO

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7.1 Preparacin de las muestras 7.1.1 Homogeneizar la muestra previamente analizada o conocida su humedad. 7.1.2 Pesar aproximadamente 10 g de muestra y colocar en recipiente adecuado para homogenizacin. 7.1.3 Agregar agua desionizada en tal cantidad que el total de agua presente sea 16 mL. 7.1.4 Agregar 40 mL de metanol. 7.1.5 Agregar 20 mL de cloroformo con pipeta volumtrica, extraer por 2 minutos con homogenizador. 7.1.6 Agregar nuevamente 20 mL de cloroformo y extraer por 30 segundos con homogenizador. 7.1.7 Agregar 20 mL de agua y extraer por 30 segundos con homogeneizador ultraturrax. 7.1.8 Distribuir el contenido en tubos de centrfuga de 50 mL y centrifugar por 10 minutos entre 2000 2500 rpm. 7.1.9 Extraer la capa inferior de cloroformo con jeringa de cada tubo sin perturbar las capas flotantes, filtrar por papel plegado y recibir el filtrado en Erlenmeyer de 50 mL. 7.1.10 Tomar una alcuota de 25,0 mL del filtrado con pipeta volumtrica y trasvasijar a un matraz redondo de fondo plano de 100 mL previamente secado, pesado y mantenido en desecador. 7.1.11 Evaporar el cloroformo en rotavapor a 60 C. 7.1.12 Completar el secado en estufa de vaco a 60 C por 2 horas. Enfriar en desecador. 7.1.13 Pesar el matraz con la grasa. 7.2 Expresin de resultados A (g/100g) = _ VT * P2 *100 Va * P1

A : Concentracin en g/100g (%) de grasa P1 : Peso de la muestra P2 : Peso de la grasa seca obtenida VT : Volumen total de cloroformo (40 mL) Va : Volumen de la alcuota de cloroformo tomada (25 mL)