INTRODUCCION En este informe trata, lo que respecta a la experimentacin prctica realizada en el laboratorio, en el cual se trabaj con una solucin

estndar de creatinina, agua destilada y picrato alcalino, en diferentes concentraciones, para luego mediante en espectrofotmetro registrar la absorvancia de cada uno de los tubos de ensayo preparados. Este informe cuenta con 2 graficas una de curva de calibracin, y otra hecha con el ajuste de mnimos cuadrados para determinar la validez de la ley de Lambert-Beer. TRAMITANCIA Y ABSORBANCIA, LEY DE LAMBERT-BERR Disponemos de una fuente emisora de radiacin electromagntica (lmpara de wolframio), unos sistemas de rendijas para hacer que la radiacin incida perpendicularmente en la muestra, un dispositivo que permite seleccionar la longitud de onda que incide sobre la muestra (red de difraccin) y un sistema de medida electrnico de intensidad de luz. Se hacen dos medidas de la intensidad de luz: En la primera medida, la muestra ser un adisolucion con la misma matriz que el analito que deseemos determinar pero en ausencia de este ( disolucin blanco. La intensidad de radiacin que llega al lector ser (Io). En la segunda medida se har en presencia del analito que deseemos estudiar. En este caso la intensidad de luz que llega al lector ser (I). Como trabajamos con analitos que absorben radiacin a la longitud de onda que selecciona la red de difraccin, lgicamente I< Io. Existen dos maneras de expresar la relacin entre I e Io. la relacin directa se le denomina tramitancia (T), mientras que se denominda absorbancia al - logaritmo de la tramitancia. La ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia esta directamente relacionada con las propiedades intrnsecas del analito, con su concentracin y con la longitud de la trayectoria del haz de luz de radiacin al atravesar la muestra (A=C..L). A= Absorbancia de la muestra C= Concentracin del cromoforo L= Longitud del paso ptico que contiene la muestra

=en absorptividad molar. Depende del cromoforo en si mismo, de la longitud de onda, de las condiciones de medida (PH, T) puesto que la absorbancia es adimensional, sus concentraciones son : concentracin-1 Longitud-1. En este informe trata, lo que respecta a la experimentacin prctica realizada en el laboratorio, en el cual se trabaj con una solucin estndar de creatinina, agua destilada y picrato alcalino, en diferentes concentraciones, para luego mediante en espectrofotmetro registrar la absorvancia de cada uno de los tubos de ensayo preparados. Este informe cuenta con 2 graficas una de curva de calibracin, y otra hecha con el ajuste de mnimos cuadrados para determinar la validez de la ley de Lambert-Beer.

PORCEDIMIENTO En el laboratorio se utilizan concentraciones variables y conocidas de creatinina que se determinaran tomando 10 tubos de ensayo y que sean uniformes, se marcan con los nmeros de 1 a 10 y en cada uno de ellos se proceder a adicionarles cantidades variables de agua destilada, y creatinina como se indica en el siguiente cuadro :
Sust./Tubo Agua destilada Estndar: 20ug/ml Creatinina [] descono. Picrato alcalino de sodio

1 2.0 1.0

2 1.75 0.25 1.0

3 1.5 0.5 1.0

4 1.25 0.75 1.0

5 1.0 1.0 1.0

6 0.75 1.25 1.0

7 0.5 1.5 1.0

8 0.25 1.75 1.0

9 2.0 1.0

10 2.0 1.0

Se mezclan cada uno de los tubos, mediante inversin, luego se dejan reposar 15 minutos y se procede a realizar las lecturas de % de Tramitancia en cada uno de ellos con el espectrofotmetro a una longitud de onda de 50nm, para esto se debe realizar la calibracin del equipo. Se toma el 1 tubo de ensayo y se ingresa en es espectrofotmetro y se calibra la aguja a 100, luego se saca el tubo y debe quedar en 0, este paso se realiza unas 3 veces hasta estar seguro de su calibracin y posteriormente se procede con la lectura de cada uno de los tubos y se registra.