Curso de Tecnologia Ps-Colheita e Processamento Mnimo de Produtos Hortofrutcolas, 3-4 Dezembro 2007

Proteco das culturas: alternativas ao uso de pesticidas convencionais

Helena Oliveira

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Algumas das doenas mais comuns

mldio
COOPERATIVE EXTENSION NEW YORK STATE CORNELL UNIVERSITY

Sclerotinia Xanthomonas campestris

Pythium sp.
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Alternaria solani

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Fusarioses vasculares
Agentes causais: Fusarium oxysporum formae speciales

f. sp. lycopersici

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f. sp. melonis

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Necrose do colo e podrido radicular do tomateiro

Fusarium oxysporum radicis-lycopersici

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No esto descritas raas fisiolgicas

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Sintomas causados por Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici

Cultura em fibra de cco

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Cultura em l de rocha Algarve, 2004

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Regio do Oeste, 2003

Doenas radiculares

Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici Phytophthora sp.

Colletotrichum coccodes

Rhizoctonia Meloidogyne www.themegallery.com Globodera

Department of Plant Pathology North Dakota State University

Company Logo Pyrenochaeta lycopersici

Complexos parasitrios
Pythium Phytophthora Rhizoctonia Fusarium Sclerotinia Alternaria

Damping-off ou murchido e morte de plntulas

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A limitao do uso dos pesticidas

DGADR

Substncias activas includas na Lista Positiva Comunitria (LPC - Anexo 1 da Directiva 91/414/CEE) 2 pginas Substncias activas no includas na Lista Positiva Comunitria (LPC - Anexo 1 da Directiva 91/414/CEE) 6 pginas Cancelamento de AVs e APVs (Circular 16/2004) Rev. 26 de 19/11/2007
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17 pginas

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Iremos regredir ao Sc. XIX?

Enxofre Cpricos

Almeida d`Ea d`E (1888)

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No! mas, com as crescentes limitaes ao uso dos pesticidas, como combater as doenas das plantas?

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Modelo explicativo da doena

Tringulo da doena Patognio virulento

Doena Hospedeiro susceptvel Ambiente favorvel

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Estudo de caso: Patognios do rizoplano O passado recente

Durante dcadas esteve generalizada a aplicao de fumigantes ao solo Brometo de metilo, antes da instalao das culturas, era o mtodo mais usado em muito pases desenvolvidos Banido por razes toxicolgicas e ambientais

Este facto veio relanar o estudo de mtodos alternativos ao uso do brometo de metilo no combate aos patognios do solo
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As interaces entre microrganismos do solo so de natureza complexa

Foras complexas e divergentes, que se tendem a equilibrar Populao A Homeostasia do sistema Populao B Populao F
Tratamento c/ pesticida Stresse prolongado

Populao F
Populao C Populao E

Populao D

Destruio da comunidade, de populaes, ou proliferao incontrolada de determinada populao

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Interaces entre duas populaes

B em A

Populao A

A em B

Favorvel (+)

Nula (0)

Desfavorvel (-)

Favorvel (+)

++ 0+

+0 00

+0-

Populao B

Nula (0) Desfavorvel (-)

-+

-0

--

+ +, Protocooperao, mutualismo, simbiose + 0 ou 0 +, comensalismo

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Controlo biolgico
+ -, - +, diversas situaes - -, competio
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- 0 ou 0 -, amensalismo

Diversidade das relaes + Populao A desenvolve-se na dependncia da B.

Variao, consoante os autores, o que exprime a existncia de variantes

Tipo de aco distncia Por contacto

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Excluso (antagonismo) antibiose Interferncia p/hifas

Trfica (explorao) lise (act. enzimtica) Predao e parasitismo

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Diversidade das relaes + -

Antibiose( produo de
antibiticos solveis ou volteis)

Lise (resultante da aco de

enzimas extracelulares que actuam na parede do organismo alvo)

Predao

(absoro da presa,

ex: fungos vs nemtodes)

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Diversidade das relaes + -

Parasitismo

(fixao de um organismo por outro, com fornecimento total ou complementar de nutrientes)

Parasita esclerotos de Sclerotinia spp.

Coniothyrium minitans vs Sclerotinia

spp. Alfaces infectadas por Sclerotinia
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sclerotiorum

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Relaes - -

Competio
para os nutrientes

Siderforos e competio para o Ferro

Pseudomonas fluorescentes vs. Fusarium oxysporum pseudobactina vs fusarinina Complexam o Fe 3+, em ambiente deficiente neste nutriente, inviabilizam a sua aquisio, por parte de outros microrganismos

Importantes em luta biolgica para os locais de infeco

- n finito de locais de infeco
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Pseudomonas vs. fungos patognicos

Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPRs)
colonizam as razes das plantas e vivem de compostos orgnicos por elas excretados, ex. produzem siderforos que ajudam a planta a assimilar o ferro e a indisponibilizlo para outros patognios solubilizam fsforo insolvel existente no solo induzem a produo de citocininas, giberelinas e IAA
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Mecanismo global - rizobactrias

Pseudomonas fluorescentes produzem metabolitos
antifngicos que restringem o crescimento de fungos patognicos Metabolitos Cianeto Antibiticos Siderforos Protenas PR Lise Competio p/ locais de www.themegallery.com infeco

SA ex g

eno?

SAR ? Antibiose Competio p/ o ferro Resistncia Company induzida Logo

Resistncia Sistmica Adquirida

(demonstrado, entre outras, para inmeras cucurbitceas, crucferas)

Mecanismo SAR

Malamy et al., (1990) Metraux et al., (1990).

Transduo de sinal

Induzido por patognios ou por compostos de sntese (cido saliclico e isonicotnico) Proteco conferida em tecidos no expostos Proteco no-especfica SAR relacionada com a expresso de vrias famlias de genes, protenas PR (quitinases, -1,3 glucanases, outras) Transmissvel por enxertia
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Princpio da supressividade dos solos

Solos supressivos a fusarioses vasculares
Monocultura em anos sucessivos Presena de doena

Ausncia de doena

Solo condutivo

Natureza microbiolgica

Solo supressivo
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- F. oxysporum antagonistas
Company Logo - Pseudomonas fluorescentes

Meios de Luta alternativos a pesticidas convencionais

Culturais: rotao cultural; drenagem do solo,

sistemas de rega, alterao do pH do solo, adubaes; incorporao de resduos orgnicos no solo (biofumigao); solarizao do solo

Genticos: cultivares resistentes Fsicos: desinfeco por vapor de gua, gua quente

Biolgicos: antagonistas biopesticidas

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Biofumigao
Incorporao de Brssicas no solo
o a ig
Ricas em glucosinolatos
hidrlise

m fu io B

Produo de isotiocianatos
Brssicas

Apresenta potencialidades, mas os resduos podem ser fitotxicos.

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Solarizao do solo (tomateiro)

Efeito sobre infestantes

b
Incidncia de fusariose (%)
70 60 50 40 30 20 10 0
www.themegallery.com 1 ano

b
4

Meloidogyne (escala 0-4)

S NS

b b a

3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0

S NS

b a

a
2 ano 3 ano

a
1 ano

a
2 ano
Company Logo 3 ano

Luta Gentica
Primeira linha de defesa: cultivares resistentes (gentica clssica, ou plantas transgnicas) Vantagens
- Sem problemas ambientais - Compatveis com outros meios de luta

Desvantagens

- No disponveis para todas as doenas /culturas - Quebra de resistncia/tolerncia - Susceptibilidade a outras doenas

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Resistncia Sistmica Adquirida

Exs. de produtos comercializados nos EUA como activadores de resistncia
Nome Origem Patognioalvo largo espectro mldios Cultura Aplicao

Actigard

benzotiadiazol

tomate, alface, espinafre, etc saladas

Rega, pulverizao pulverizao

Blockade

derivado do benzotiadiazol harpina de Erwinia amylovora Bacillus subtilis, estirpe QST716

Messenger

largo espectro largo espectro

Frutos, vegetais, etc Frutos, vegetais, outros

Rega, pulverizao pulverizao

Serenade

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Quitosana

um bioestimulante obtido por desacetilao da quitina. As propriedades fisicas e biolgicas da quitosana possibilitam a sua aplicao em diversas reas. Tem actividade quitinase e quitosanase.

Em agricultura usado como: correctivo do solo na preservao antimicrobiana de alimentos revestimento protector em frutas e legumes biopesticida eliciador de mecanismos de defesa nas plantas
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Efeito da quitosana

Pa. chlamydospora Fomitiporia sp. Botryosphaeria sp.

Eutypa sp.

C. liriodendri

Phomopsis sp.

Crescimento micelial dos fungos em PDA (testemunha) e em PDA adicionado de quitosana (concentrao mais elevada, 50,0 mg L-1 ).
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Efeito da quitosana em Botrytis cinerea

Botrytis
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0

y = 2,2756x + 1,8691 R2 = 0,7831

Probit

Log10 conc. X 10E-07

EC50= 2,38 mg s.a. L-1

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Influncia da quitosana em plantas infectadas por Cylindrocarpon liriodendri

Tratamento

Altura do No. total de lanamento maior razes (mm) 105,90 a 106,40 ab 112,50 ab 141,00 ab 136,90 b 34,32 a 44,60 ab 51,30 bc 60,20 c 46,35 b

Reisolamento (%) 80,83 a 43,33 ab 40,83 ab 21,67 b 32,05 b

gua (Test.) tebuconazol carbendazime + flusilazol ciprodinil+fludioxonil quitosana

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Como se desenvolve um biopesticida? Desenvolvimento comercial de um produto biolgico

Antagonistas seleccionados

Ex: Fusaclean- Fusarium oxysporum 47 (FO47);

Produo em massa

Testes toxicolgicos e ecotoxicolgicos

Formulao Ensaios de campo Homem Animais Ambiente

Homologao
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Alguns biopesticidas
Agrobacterium radiobacter: Agrocin 84, Nogall Bacillus subtilis A13: Epic, Kodiak, Rhizo Plus, Serenade, System 3 Coniothyrium minitans: Contans , KONI Fusarium oxysporum: Biofox C, Fusaclean Gliocladium virens: SoilGard Gliocladium catenulatum: PreStop, Primastop Pythium oligandrum: Polygandron Trichoderma harzianum and other spp.: Bio_Fungus, Binab_T, RootShield, T-22G, T-22 Planter Box, Bio-Trek), Supresivit, Trichodex, Trichopel, Trichoject, Trichodowels, Trichoseal , Trichoderma 2000

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Baseados em Bactrias Antagonistas

Agrobacterium radiobacter: Agrocin 84, Nogall Bacillus subtilis A13: Epic, Kodiak, Rhizo Plus, Serenade, System 3

Mecanismos gerais de aco

Metabolitos antifngicos Siderforos Competio para os nutrientes Excluso dos nichos ecolgicos Resistncia induzida

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Agrobacterium radiobacter:
Diegall, Norbac 84C

Galltrol-A, Nogall,

Organismo alvo: Agrobacterium tumefaciens Culturas: fruteiras e ornamentais (viveiros) Formulao: suspenso aquosa contendo clulas bacterianas Aplicao: imerso de razes e estacas, ou pulverizao

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Infeco por A. tumefaciens

Acetosiringona Ferida Produo de fenis Atraco de AT

Activao
Genes vir Endonucleases Exciso do T-DNA

Integrao do T-DNA no DNA da planta, produo de opinas, agrocinopinas, citocininas, produo de IAA
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Estirpes no patognicas de Agrobacterium radiobacter produzem Agrocina 84

Agrocina 84 um falso nucletido de adenina que confundido com o verdadeiro, bloqueando a sntese de DNA em AT produtoras de nopalina.

A sntese e a resistncia agrocina 84 conferida pelo plasmdeo pAgK84 que pode ser transmitido a A. tumefaciens patognicas, no produtoras de nopalina, tornando-as resistentes ao antibitico. Por engenharia gentica foi produzida a estirpe K1026 (obtida por deleco da regio tra de pAgK84), anloga K84, mas incapaz de transferir o plasmdeo mutante pAgK1026.
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Bacillus subtilis - Kodiak

Organismos-alvo: Rhizoctonia solani, Fusarium spp., Alternaria spp., e Aspergillus spp. que atacam razes Culturas: algodo, amendoim e inmeras hortcolas Formulao: p, pode ser aplicado com fungicidas qumicos Aplicao: desinfeco de sementes
Efeito bioestimulante: primeira Plant Growth Promoting Rhizobacterium

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Baseados em Fungos Antagonistas Coniothyrium minitans:

Contans, KONI

Trichoderma harzianum e outras spp.: Trichodex, Trichopel, Trichoject,

Trichodowels, Trichoseal, Trichoderma 2000

Mecanismos gerais de aco

Micoparasitismo Metabolitos antifngicos Aco enzimtica Competio para os nutrientes Excluso dos nichos ecolgicos

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Coniothyrium minitans
Organismos alvo: Sclerotinia sclerotiorum and S. minor Culturas: girassol, amendoim, soja, e hortcolas (alface, feijo, tomate) Formulao: grnulos dispersveis em gua Mtodo de aplicao: pulverizao Nomes comerciais

CONTANS KONI

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Coniothyrium minitans Efeito sobre miclio de Sclerotinia

Penetrao por foras mecnicas Produo de -1,3 glucanases, quitinases Colonizao intracelular

Efeito sobre esclerotos

Penetrao por foras mecnicas e aco enzimtica Colonizao e colapso do escleroto Formao de picndios no escleroto, 14 dias aps infeco

Induo de supressividade nos solos

A adio de esclerotos ao solo no origina aumento de incidncia de doena
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Trichoderma spp.
BCA: Trichoderma harzianum estirpe KRL-AG2 (T-22) Organismos alvo: Pythium spp., Rhizoctonia solani, Fusarium spp. Culturas: rvores e arbustos, transplantes, ornamentais, crucferas, tomate, pepino Formulaes: grnulos ou p molhvel Aplicao: ao solo, ou gua de rega Nomes comerciais: vrios

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Trichoderma spp. Modo de aco Toxinas e antibiticos Compostos volteis (lcoois, terpenos ) Competio Micoparasitismo
quimiotaxia para o alvo enzimas extracelulares (celulases e quitinases) Diferenciam estruturas semelhantes a apressrios

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Ensaio comparativo fungicidas vs. Trichoderma contra Cylindrocarpon Eficcia de fungicidas e de Trichoderma harzianum
Reisolamento (%) fluaziname ciprodinil + fludioxonil Trichoderma harzianum carbendazime + flusilazol tebuconazol H2O 0 20 40 60 80 a a a ab ab b 100
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Company Ensaio em videiras envasadas + substrato infestado artificialmente

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