LA MICROBIOLOGAes la rama de la biologa encargada del estudio de los microorganismos, seres vivos pequeos

tambin conocidos como microbios. Son considerados microbios todos los seres vivos microscpicos, estos pueden estar constituidos por una sola clula(unicelulares), as como pequeos agregados celulares formados por clulas equivalentes (sin diferenciacin celular); estos pueden ser eucariotas (clulas con ncleo) tales como hongos y protistas, procariotas (clulas sin ncleo definido) como las bacterias. Sin embargo la microbiologa tradicional se ha ocupado especialmente de los microorganismos patgenos entre BACTERIAS, VIRUS Y HONGOS Y PARASITOS. BACTERIAS: Las bacterias poseen una estructura relativamente simple. Son microorganismos procariotas, es decir, unos microorganismos unicelulares sencillos, sin membrana nuclear mitocondrias, aparato de Golgi ni retculo endoplsmico que se reproducen por divisin asexual. La pared celular que rodea a las bacterias es compleja, y existen dos formas bsicas: una pared celular grampositiva con una gruesa capa de peptidoglucano y una pared celular gramnegativa con una delgada capa de peptidoglucano, as como una membrana externa. El organismo humano est habitado por miles de especies bacterianas distintas; mientras algunas mantienen una relacin parasitaria tem- poral, otras habitan en el ser humano de manera permanente.

La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos morfolgicos, lo que se conoce como pleomorfismo. De todas formas, podemos distinguir tres tipos fundamentales de bacterias:

Coco (del griego kkkos, grano): de forma esfrica. o Diplococo: cocos en grupos de dos. o Tetracoco: cocos en grupos de cuatro. o Estreptococo: cocos en cadenas. o Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en racimo.

Bacilo (del latn baculus, varilla): en forma de bastoncillo. Formas helicoidales: o Vibrio: ligeramente curvados y en forma de coma, juda o cacahuete. o Espirilo: en forma helicoidal rgida o en forma de tirabuzn. o Espiroqueta: en forma de tirabuzn (helicoidal flexible).

VIRUS: Los virus son las partculas infecciosas de menor tamao, con un dimetro que oscila entre los 18 hasta casi los 300 nm (el tamao de la mayor parte de los virus es inferior a 200 nm y no pueden visualizarse mediante el microscopio ptico). Los virus estn formados por cido desoxirribonucleico (ADN) o cido ribonucleico (ARN) (no por ambos a la vez) as como por las pro-tenas necesarias para su replicacin y patogenia.

HONGOS: A diferencia de las bacterias, la estructura celular de los hongos es ms compleja. Son microorganismos eucariotas que poseen unncleo bien definido, mitocondrias, aparato de Golgi y retculo endoplsmico. Los hongos pueden existir en una forma unicelular (levadura) capaz de replicarse de manera asexual, o en una forma filamentosa (moho), capaz de replicarse de forma tanto asexual como sexual.

PARASITOS: Los parsitos son los microorganismos con mayor grado de complejidad. Aunque todos los parsitos se clasifican como eucariotas, algunos son unicelulares y otros son pluricelulares. Su tamao oscila desde diminutos protozoos de 1-2 im de dimetro (es decir, el tamao de muchas bacterias) a los artrpodos y cestodos que llegan a medir hasta 10 m de largo

BACTERIAS
BACTERIAS GRAM NEGATIVAS: Son aquellas bacterias que NO se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram, y lo hacen de un color rosado tenue. Las bacterias Gram-negativas presentan dos membranas lipdicas entre las que se localiza una fina pared celular de peptidoglicano, mientras que las bacterias Gram-positivas presentan slo una membrana lipdica y la pared de peptiglicano es mucho ms gruesa. Al ser la pared fina, no retiene el colorante durante la tincin de Gram.

BACTERIAS GRAM POSITIVAS: Son aquellas bacterias que se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram, la envoltura celular de las bacterias Grampositivas comprende la membrana citoplasmtica y una pared celular compuesta por una gruesa capa de peptidoglucano, que rodea a la anterior. La pared celular se une a la membrana citoplasmtica mediante molculas de cido lipoteicoico A diferencia de las Gram-negativas, las Gram-positivas no presentan una segunda membrana lipdica externa a la pared celular y esta pared es mucho ms gruesa. Clasificacin de las bacterias por Gram:

 Cocos Grampositivos Aerobios

Cocos Catalasa-negativos Aerococcus Alloiococcus Enterococcus Lactococcus Leuconostoc Pediococcus Streptococcus Cocos y Cocobacilos Gram-negativos Aerobios

Cocos Catalasa-positivos Micrococcus Staphylococcus

Branhamella Moraxella Neisseria Bacilos Gram-negativos Aerobios Enterobacteriaceae Citrobacter Escherichia Klebsiella Morganella Plesiomonas Proteus Salmonella Serratia Shigella Yersinia Vibrionaceae Gram-negativos Aerobios Vibrio Aeromonadanceae Aeromonas Campylobacteriaceae Arcobacter Campylobacter Helicobacteriaceae Helicobacter Pseudomonadaceae Pseudomonas Pasteurellaceae Actinobacillus Haemophilus Pasteurella

Otros Gneros Gram-negativos Aerobios Acinetobacter Bartonella Bordetella Brucella Burkholderia Capnocytophaga Cardiobacterium Eikenella Francisella Kingella

Legionella Stenotrophomonas Streptobacillus Bacilos Gram-positivos Aerobios Corynebacterium Gordonia Nocardia Rhodococcus Tsukamurella Mycobacterium Actinomadura Dermatophus Nocardiopsis Oerskovia Rothia Streptomyces Saccharomonospora Saccharopolyspora Thermoactinomyces Tropheryma Arcanobacterium Bacillus Brevibacterium Erysipetothrix Gardnerella Listeria Turicelia Cocos Gram-positivas Anaerococcus Finegoldia Micromonas Peptostreptococcus Schleiferella

Actinomicetos con cidos miclicos en la pared celular

Actinomicetos sin cidos miclicos en la pared celular

Otros bacilos Grampositivos

Bacterias Grampositivas Anaerobias

Bacilos Gram-positivos Actinomices Bifidobacterium Clostridium Eubacterium Lactobacillus Mobiluncus Propionibacterium Bacilos Gram-negativos

Bacterias Gramnegativas Anaerobias

Cocos Gram-negativos Veillonella

BACTERIAS Brucellaspp BacillusAnthracis Vibrio Cholerae CorynebacterioumDiphtheriae StreptococcusPyogenes Streptococcusspp CoxiellaBurnetii Salmonella Typhi, S. Paratyphi LegionellaPneumophila StreptococcusPneumoniae, StaphylococcusAureus,

Bacte mides Fusobacterium Porphyromonas PATOLOGIA Brucelosis Carbunco Clera Difteria Escarlatina Erisipela Fiebre Q Fiebre Tifoidea Legionelosis Neumona

KlebsiellaPneumoniae, Mycoplasmaspp., Chlamydia spp. Mycobacterium Tuberculosis ClostridiumTetani BordetellaPertussis Chlamydia Trachomatis ClostridiumPerfringens ClostridiumBotulinum EscherichiaColi Listeria Monocytogenes MycobacteriumLeprae NeisseriaGonorrhoeae NeisseriaMeningitidis Salmonella sp StreptococcusPyogenes Treponema Pallidum YersiniaEnterocolitica YersiniaPestis

Tuberculosis Ttanos Tos Ferina Conjuntivitis Gangrena Gaseosa Botulismo Diarrea Encefalitis Lepra Gonorrea Meningitis Salmonelosis Escarlatina Sfilis Gastroenteritis Peste

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS

Microscopia El estudio microscpico mas sencillo es la preparacin en fresco, que se utiliza en el examen de ciertas muestras como el LCR para detectar CryptococcusNeoformans, con tinta china como fondo, donde destacan las levaduras con sus grandes cpsulas. Tambin se utilizan preparaciones en fresco con iluminacin en campo oscuro para descubrir espiroquetas en las lesiones genitales y para detectar Borrelia o Leptospira en la sangre. Tincion de Gram Permite distinguir entre los microorganismos con paredes gruesas de peptidoglucanos y los que tienen membranas exteriores que se disuelven con alcohol, se utilizan a menudo para clasificar a los microorganismos teidos en grupos como estreptococos, estafilococos y clostridios, esta tincion es especial para examinar esputos y buscar bacterias y leucocitos polimorfonucleares. Tincion Permite distinguir a los microorganismos que absorben al colorante carbolfucsina despus Acidorresistente de tratarlo con un disolvente cido/orgnico, esta se emplea en esputos, otros lquidos y muestras de tejidos cuando se sospecha la presencia de bacilos acidorresistentes. Tinciones Como el naranja de acridina se utiliza para identificar leucocitos, levaduras y bacterias en los Fluorocrmicas lquidos corporales Tinciones Directa: utiliza anticuerpos unidos a un compuesto fluorescente que se dirigen contra un Inmunofluoresce objetivo antignico con el fin de observar microorganismos o estructuras subcelulares. nte Indirecta: un anticuerpo sin marcar se une a un antgeno especifico. Deteccin Los anlisis de aglutinacin con ltex y los enzimoinmunoanlisis son mtodos que permiten Macroscpica de identificar microorganismos, toxinas extracelulares y virus utilizando protenas o los antgenos polisacridos antignicos. Por medio de Algunas veces conviene sembrar la muestra en la placa al momento de la obtencin, cuanto Cultivos antes se siembre en el cultivo correspondiente mayores sern las probabilidades de aislar a las bacterias patgenas, es mas probable obtener un resultado til del cultivo cuando la muestra proviene de un tejido profundo o de un lquido (pus) que cuando se obtiene de exudados superficiales. In vitro Constan de agar, que no es metabolizado por las bacterias, de nutrientes que favorecen la proliferacin de las especies microbianas que interesan y de sustancias que inhiben la

proliferacin de otros microorganismos.

TCNICA DE TINCIN DE GRAM

La tincin de Gram es un tipo de tincin diferencial empleado en microbiologa para la visualizacin de bacterias. Debe su nombre al bacterilogo Chistian Gram, que desarroll la tcnica en1884. Permite diferenciar entre dos grupos de bacterias: - Bacterias Gram positivas - Bacterias Gram negativas El distinto comportamiento de estos dos grupos de bacterias es debido a las diferencias que muestran en la estructura de sus membranas. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfologa celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximacin a la diferenciacin bacteriana, considerndose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella. Metodologa Recoger muestras. Hacer el extendido en espiral. Dejar secar a temperatura ambiente. Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.) Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 min. Todas las clulas gram positivas y gram negativas se tien de color azul-purpura. Enjuagar con agua. Agregar lugol y esperar entre 1 minuto. Enjuagar con agua. Agregar acetona y/o alcohol y esperar 4 segundos (parte critica de la coloracion) Enjuagar con agua. Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y esperar 1-2 min Este tinte dejar de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas. Para observar al microscopio ptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de inmersin COLORACIN GRAM: 1. Fijar un frotis Con la ayuda de un mechero, flamear un asa bacteriolgica y esperar que enfre un poco. Tomar el asa (previamente flameada) y con sta tomar un poco de muestra. Una vez obtenida una pequea cantidad de la muestra (con el asa), hacer que sta tenga contacto con una lmina portaobjetos, la cual servir para depositar la muestra contenida en el asa. Con el asa (conteniendo la muestra) sobre la lmina portaobjetos, proceder a realizar la extensin de la muestra en el portaobjetos mediante movimientos giratorios (dar vueltas con el asa) sobre la lmina, de tal forma que al terminar la extensin, tengamos como producto una espiral en la parte media de la lmina. Esperar que seque al aire libre o ayudarse con la llama de un mechero para fijar la muestra, teniendo en cuenta que el calor no debe ser directo (slo se pasa por la llama), puesto que el calor excesivo puede cambiar la morfologa celular de las bacterias a observar. El calor deseable es aqul en el que el portaobjetos sea apenas demasiado caliente para ser colocado sobre el dorso de la mano.

2. Tincin Con violeta cristal, violeta de genciana, azul de metileno o en todo caso tinta china utilizando una cantidad suficiente de dicho colorante sobre la muestra, como para lograr cubrirla por completo. Se deja actuar al colorante por 1 minuto. Esta tincin de 1 minuto est dada para trabajar a una temperatura ambiente de 25 C. 3. Enjuague Al transcurrir el minuto, se debe enjuagar la lmina conteniendo la muestra con agua corriente. Para realizar el lavado, se debe tener en cuenta que el chorro de agua NO debe caer directamente sobre la muestra, sta debe caer sobre la parte superior de la lmina que no contiene muestra. El chorro debe ser un chorro delgado, aproximadamente de medio a un milmetro de espesor. Tambin el enjuague se debe realizar poniendo la lmina portaobjetos en posicin inclinada hacia abajo... La solucin de cristal violeta, se recomienda sea al 1%. 4. Mordiente Una vez enjuagado el portaobjetos, se aplica como mordiente yodo o lugol durante 3 minuto ms. El mordiente es cualquier sustancia que forme compuestos insolubles con colorantes y determine su fijacin a las bacterias. 5. Decoloracin Pasado el minuto de haber actuado el mordiente, el frotis se decolora con etanol al 75 %, etanol al 95 %, acetona o alcohol-acetona, hasta que ya no escurra ms lquido azul. Para esto se utiliza el gotero del frasco del decolorante. Se van aadiendo cantidades suficientes del decolorante, hasta lograr que ste salga totalmente transparente, es decir, hasta que ya no escurra ms lquido azul. 6. Lavado y secado Lavar con agua para quitar los residuos de decolorante y esperar que seque la lmina al aire libre o con la ayuda de la llama de un mechero de la forma anteriormente descrita. 7. Tincin de contraste Una vez que la lmina ya sec, procedemos a teir nuevamente, pero esta vez se va a utilizar un colorante de contraste como por ejemplo la safranina, dejar actuar durante 1 minuto. 8. Nuevo enjuague Pasado el minuto correspondiente, se procede a enjuagar la lmina con agua, se escurre el agua sobrante y se seca en la forma anteriormente descrita. De esta manera, ya tendremos listo el frotis para su respectiva observacin microscpica.

CULTIVO:es un mtodo para la multiplicacin de microorganismos, tales como

bacterias , hongos y parsitos, en el que se prepara un medio ptimo para favorecer el proceso deseado. Un microorganismo se puede sembrar en un medio lquido o en la superficie de un medio slido de agar. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes que van, desde azcares simples hasta sustancias complejas como la sangre o el extracto de caldo de carne. La principal diferencia entre un medio de cultivo slido y uno lquido es que el medio de cultivo slido contiene un 1,5-2% de agar-agar, mientras que el medio lquido no contiene agar-agar. En el estudio de cultivos bacterianos algunos de los criterios que se emplean para caracterizarlas incluyen :tamao, morfologa celular, forma de agrupacin, reaccin a la tincin de Gram, formacin de esporas, movilidad,presencia de inclusiones de reserva y caractersticas culturales en medios lquidos y slidos en los que presentanpatrones de desarrollo en cuanto a la forma, tamao, elevacin y color de las colonias.

Tcnicas de siembra: El mtodo de siembra por estra en placa: Es el mtodo ms fcil y el ms usado para obtener cultivos axnicos. Para ello, con un asa de siembra se tomauna muestra de la poblacin mixta y a continuacin se hacen estras sobre la superficie de un medio slidopreparado en una placa petri. Conforme se vanh a c i e n d o e s t r a s e n z i g z a g c o n e l a s a , c a d a v e z s e van depositando en la superficie del medio m e n o s microorganismos. Los mtodos de vertido en placa y extensin en placa: En estos mtodos, las suspensiones de clulas microbianas se diluyenantesde su siembra en placa. Se siguenestas tcnicas cuando la muestra contiene tantos microorganismos, que la dilucin no se puede realizar en unasola etapa. Por ejemplo, una suspensin con mil millones de clulas por mililitro debe ser diluida 107veces paraobtener una suspensin con un centenar de clulas por mililitro, Por tanto, se realizan diluciones seriadas(envarias etapas), normalmente de diez en diez, pero a veces de cien en cien. Para realizar diluciones de diez endiez, se aade 1 ml de la suspensin bacteriana a 9 ml (le medio estril o solucin salina, igualmente estril. Seagita vigorosamente para diluir las clulas y el proceso se repite cuantas veces sea necesario

1.

Bacterias Gram. positivas: o Estreptococos: pueden ser responsables de infeccin en la sangre, faringitis, infeccin de las vlvulas del corazn, fiebre reumtica, escarlatina, neumona, etc. o Corinebacterias: difteria, infeccin de orina, etc. o Clostridios: ttanos, botulismo, gangrena gaseosa, infeccin de la sangre, etc. o Bacillus: antrax. o Estafilococos: pueden causar Neumona, infecciones supuradas (con pus) en la piel y abscesos en otros lugares, sndrome del shock txico, meningitis, artritis, osteomielitis, enteritis, etc. Bacterias Gram negativas: o Salmonella, Shigella y Campylobacter: pueden provocar infeccin en el intestino. o Escherichiacoli y otras enterobacterias: pueden provocar neumona, infeccin de orina, infeccin en la sangre, etc. o Legionella: puede provocar una neumona grave y atpica (la enfermedad del legionario) o Meningococos: puede causar meningitis cerebroespinal. o Haemophyllus: infeccin respiratoria, meningitis, etc. o Gonococo: causa la gonorrea o Brucella: brucelosis (fiebre de malta). o Pseudomonas: infecciones de odo e infecciones en mltiples lugares en personas debilitadas (neumonas en pacientes de UVI, infeccin en los pies en diabticos, infeccin respiratoria en pacientes con fibrosis qustica, etc.). o Bordetella: tosferina o Otras bacterias importantes no se tien bien con este mtodo y para ellas se usan otros; por ejemplo, para las bacterias (micobacterias) que causan la tuberculosis o la sfilis (treponemas).

2.

EL HEMOCULTIVO:

es un medio diagnstico que se realiza para la deteccin e identificacin de microorganismos en la sangre utilizando el examen directo y cultivo, y definir los patrones de susceptibilidad de las bacterias por medio del antibiograma.( Toma de muestra Colocarse los guantes estriles manteniendo la tcnica asptica. Insertar la aguja sin tocar o palpar el sitio de la venopuncin. Utilizar sistema al vaco que consta de una camisa que se adapta al cuello del frasco del hemocultivo teniendo la precaucin de mantener siempre el frasco en posicin vertical con relacin a las venas del paciente, para evitar que el lquido refluya a la vena. De lo contrario utilice jeringa con un pericraneal para darle extensin y posibilidad de inocular la sangre en dos botellas. Extraer la cantidad de sangre que se menciona a continuacin y distribuirla en los frascos (previa asepsia del tapn con alcohol), as:(1,2,18) Para hemocultivos de rutina: extraer 15 mL de sangre en el paciente adulto, introduzca 10 mL en el frasco #1 (tapa amarilla) y los 5 mL restantes en el frasco #2 (uno de los frascos tapa azul) Para pacientes que estn recibiendo terapia antimicrobiana: extraer 10 mL de sangre en el paciente adulto, inocule 5 mL en el frasco #1 (tapa amarilla) y los 5 mL restantes en el frasco #2 (frasco tapa azul) Para cultivos de hongos: extraer 10 mL de sangre en el paciente adulto, inoclelo en el frasco #1 tapa verde. Para cultivo de micobacterias: extraer 10 mL de sangre en el paciente adulto, inocule 5 mL en el frasco #1 (frasco tapa blanca) y los 5 mL restantes en el frasco #2 (frasco tapa blanca). Mezclar suavemente los frascos utilizando la tcnica de inversin. La hematologa comprende el estudio del paquete celular, el perfil o el estado sanguneo, los cuales son: Recuento de eritrocitos (y valor hematocrito) Recuento de leucocitos Determinacin de hemoglobina Velocidad de sedimentacin globular (VSG) Frmula leucocitaria (recuento diferencial de leucocitos)

Funciones del Hemograma: Analisis de anemias Estados infecciosos inflamatorios Leucemias y discrasias sanguneas Parametros de salud, hierro, nutricin Control de enfermedad Analisis de parasitoshematicos

UROCULTIVO: El examen bacteriolgico permite, en caso de infeccin de las

vas urinarias, identificar el agente patgeno responsable. Se deben utilizar envases estriles para evitar la contaminacin de la muestra.

El urocultivo se realiza mediante la siembra de una pequea cantidad de orina homogeneizada, lo que permite la cuantificacin de las eventuales bacterias presentes. Las bacterias se contabilizan utilizando el criterio de UFC/ml, 5 porque de acuerdo a esta tcnica se considera que cada bacteria en la muestra diluida dar origen a una colonia. El conteo de las mismas se efecta luego de un perodo de incubacin de 24 horas a 37 C , para permitir la multiplicacin bacteriana. La muestra de orina se siembra en uno o ms medios de cultivo especficos, generalmente MacConkey y CLED, que permiten el crecimiento de bacterias Gram negativas y Gram positivas , as como de hongos, en el 99% de las veces del gnero Cndida Funciones del Urocultivo:concluyente de la infeccin de vas urinarias desde que Kass defini como urocultivo positivo el 5 hallazgo de por lo menos 10 UFC/ml de un mismo patgeno aislado de un individuo, sintomtico o no. Sin embargo, para el caso de IVU nosocomial, consideramos positivo un recuento mayor de 102 UFC/ ml de orina, por las razones antes mencionadas. Despus de la inoculacin en medios de cultivo debe permitirse una incubacin de por lo menos 24 horas, para obtener un recuento preciso de las colonias y se requieren otras 12-24 horas para la tipificacin del organismo y para conocer su sensibilidad antibitica; cuando la infeccin de vas urinarias es nosocomial, la variedad microbiolgica de los grmenes exige incubaciones ms prolongadas Valores normales Menos 10,000 U.F.C/ml se considera contaminacin Entre 10,000 y 100,000 U.F.C/ml se considera sospecha de infeccin Mayor a 100,000 U.F.C/ml se considera infeccin *U.F.C. Unidades Formadoras de Colonias.

OROCULTIVO: Es una prueba de laboratorio que se hace para aislar e identificar microorganismos que puedan
causar una infeccin en la garganta. Tomas de Muestra: A usted se le solicitar que incline la cabeza hacia atrs con la boca bien abierta. El mdico frota con un hisopo o aplicador de algodn estril a lo largo de la parte posterior de la garganta cerca de las amgdalas. Usted debe contener las nuseas y cerrar la boca mientras el aplicador toca esta rea. Funciones del orocultivo: El examen se realiza cuando se sospecha de una infeccin en la garganta, en particular, una infeccin de garganta por estreptococos. Este examen se usa principalmente para identificar estreptococos en la garganta, sin embargo, se pueden detectar otros organismos, dependiendo del tipo de medio de cultivo utilizado.

ASPIRADO TRAQUEAL
Colecte el espcimen a travs de una traqueotoma o tubo endotraqueal. Con cuidado pase el catter de polyetileno a travs del sitio dentro de la trquea. Aspire el material de la trquea utilizando una jeringuilla o un succionador intermitente. Remueva el catter y descarte la jeringuilla. Enve al laboratorio. No refrigere la muestra.

Funciones del aspirado traqueal: Trastornos neuromusculares Secreciones abundantes y espesas Perdida de reflejo tusgeno Obstruccin de la va area Fijacin de maxilares post-quirrgico Despus de drenaje postural Despus de nebulizaciones

PRUEBA DEL ESPUTO:La muestra de esputo se obtiene tosiendo profundamente y expulsando el material que
viene de los pulmones dentro de un envase estril. Se lleva la muestra a un laboratorio y se coloca en un medio que tenga las condiciones que permita que los microorganismos se reproduzcan.

Funciones de la prueba de esputo: Determinar si el microorganismo es Gram + o Gram -: mediante tincin de Gram, cuyos resultados estn disponibles en pocas horas, siendo til para seleccionar la antibioterapia hasta que estn otros resultados. Determinar presencia de bacilos de tuberculosis: mediante tincin acidoalcoholresistente (BAAR). Resultado en pocas horas. Determinar mediante cultivo especfico la evidencia o no de mycobacterium tuberculoso: mediante cultivo de Lowestein. Resultado en 3-6 semanas; se requieren muestras de 3 das consecutivos. Determinar la presencia de clulas malignas: muestra de esputo aislada con solucin fijadora. Bronquitis, un absceso pulmonar, una neumona o cncer de pulmn.

Procedimiento: El esputo se recoge a primera hora de la maana (ms concentrado y ms abundante por el acumulo que se produce con el sueo) La muestra se recoge en un contenedor estril y se transporta de forma rpida al laboratorio. La recoleccin del esputo se puede realizar por: 1. Obtencin directa: o El paciente tose de forma voluntaria, o Si no se consigue producir una muestra (esputo inducido): Enjuagar la boca con agua destilada estril o solucin salina. Obtener el esputo tras una expectoracin profunda, preferentemente matinal. De no producirse expectoracin espontnea, puede inducirse el esputo con nebulizaciones de suero fisiolgico estril (15 ml durante 10 minutos), siendo til adems realizar un drenaje postural o fisioterapia respiratoria.

COPROCULTIVO

o examen coproparasitoscpico consiste en el cultivo de materia fecal. Es un mtodo de diagnsticomicrobiolgico que permite identificar diferentes organismos causantes de enfermedades gastrointestinales. Toma de muestras: La materia fecal para coprocultivo debe estar libre de contaminantes como orina o papel higinico. Se puede obtener la muestra recogiendo las heces en una bolsa plstica adosada a la taza del inodoro o utilizando equipos de recoleccin comerciales. En caso de bebs se puede adosar la bolsa al paal. Una vez obtenida la muestra se debe colocarla en un recipiente estril y derivarla al laboratorio lo ms rpido posible. Es indicado para el diagnstico de ciertas afecciones del aparato gastrointestinal, especialmente aquellas infecciones provocadas por bacterias. Se lo utiliza para estudiar casos de diarrea severa, persistente o recurrente sin causas conocidas, y en caso de diarreas asociadas al consumo de antibiticos. Funciones del Coprocultivo: Se usa de preferencia en la bsqueda de patgenos intestinales productores de enterocolitis aguda. La muestra se obtiene directamente de la deposicin recientemente emitida o bien de un hisopado rectal. Debe usarse un medio de transporte adecuado (Cary-Blair) si sta no va a ser procesada de inmediato. La seleccin de los medios de cultivo, as como el procedimiento de aislamiento a seguir, dependen del agente etiolgico que se est investigando. Si no se explicita otra situacin, rutinariamente, la bsqueda se concentra en los patgenos habituales como Salmonella y Schigella. En los casos especiales, debe indicarse si se sospecha de EscherichiaColienteropatgena, enteroinvasora, enterotoxignica, enterohemorrgica , o entero agregante; Campylobacter, SPP.,Vibriocholera, Yersiniaenteroclitica, etc.

EL ANTIBIOGRAMA
Por qu se hace un antibiograma? Y Qu es? Cuando hacemos un cultivo de orina, sangre, heces, piel o de cualquier otra parte de nuestroorganismo, lo que intentamos conocer es que microorganismo es el causante de la infeccin o enfermedadque estemos pasando. Una vez hemos logrado aislarlo, diagnosticarlo y cultivarlo, procederemos a averiguar cul es el tratamiento adecuado. Un "ANTIBIOGRAMA" consiste en poner en contacto al germen que hemos cultivado con distintos antibiticos para ver cul de ellos es el que mejor va como tratamiento. Se cultivan en "discos", los cuales son unos receptculos circulares con sustancias que favorecenel crecimiento de los microorganismos. Al mismo tiempo, contienen cada uno de ellos, un antibitico que, por supuesto, sabemos cul es. Luego de unas horas, y en algunos casos, das, observaremos que ha sucedido. En los cubetasque apreciemos que los grmenes han seguido creciendo "como si nada" ... nos indicar que esos antibiticos no son activos contra ese microorganismo. Sin embargo, en aquellos en que las bacterias no han crecido, nos indicar que los antibiticosque contienen son eficaces contra ellos. Casi nunca es "blanco" o "negro" y la situacin viene dada porque que crecen poco, lentamente,o por el contrario lo hacen ms rpidamente. Hemos de escoger por tanto aquel que permita un menor crecimiento y con l y las propias defensas del organismo se intentar erradicarlo, es decir, curar la enfermedad.

Sensibilidad bacteriana a los antibiticos La determinacin de la Concentracin Inhibidora Mnima (CIM) es la base de la medida de la sensibilidad de una bacteria a un determinado antibitico. La CIM se define como la menor concentracin de una gama de diluciones de antibitico que provoca una inhibicin de cualquier crecimiento bacteriano visible. Es el valor fundamental de referencia que permite establecer una escala de actividad del antibitico frente a diferentes especies bacterianas. Hay diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de rutina, y de manera semicuantitativa, las CIM (mtodos manuales y mtodos automatizados o semiautomatizados). Estos diferentes mtodos de rutina permiten categorizar una cierta cepa bacteriana en funcin de su sensibilidad frente al antibitico probado. Esta cepa se denomina Sensible (S), Intermedia (I) o Resistente (R) al antibitico. Lectura del antibiograma Una vez sembrada una placa de un medio de cultivo adecuado y colocados los distintos discos impregnados de antibitico y una vez colocada a incubacin en la estufa durante unas horas, se procede a la lectura de los resultados, que puede hacerse a intervalos peridicos, basada en la medicin del halo de inhibicin. Segn la amplitud de este halo los grmenes se clasifican en: RESISTENTES: Si la probabilidad de xito teraputico es nula o muy reducida. No es de esperar ningn efecto teraputico sea cual fuere el tipo de tratamiento. SENSIBLES: Si existe una buena probabilidad de xito teraputico en el caso de un tratamiento a la dosis habitual. INTERMEDIA: Cuando el xito teraputico es imprevisible. Se puede conseguir efecto teraputico en ciertas condiciones (fuertes concentraciones locales o aumento de la posologa). Debe tenerse presente que el dimetro del halo de inhibicin depende tambin de la difusibilidad del antibitico y, por tanto, no es una medida absoluta de la eficacia. Los datos que proporciona el antibiograma son muy valiosos pero su aplicacin no es tan sencilla. Para la prescripcin correcta de los antibiticos hay que tener en cuenta siempre la naturaleza del proceso infeccioso, la historia clnica del paciente, el mecanismo de accin del antibitico, la toxicidad, las posibles sensibilizaciones del paciente, la va de administracin, etc.