FACULDADE DE TECNOLOGIA DE

SOROCABA FATEC-SO
PROJETOS, MANUTENO E OPERAO DE APERELHOS
MDICO-HOSPITALARES

APOSTILA DE BIOQUMICA E
FISIOLOGIA
Profa Dra Elaine Conceio de Oliveira

I-INSTRUES GERAIS PARA O TRABALHO NO LABORATRIO

REGRAS DE SEGURANA DE LABORATRIO
O laboratrio um local onde h um grande nmero de equipamentos e reagentes que
possuem os mais variados nveis de toxidez. Este um local bastante vulnervel a acidentes, desde
que no se trabalhe com as devidas precaues. Abaixo, apresentamos alguns cuidados que devem
ser observados, para a realizao das prticas, de modo a minimizar os riscos de acidentes.
ANTES DA AULA PRTICA
1. Estude os conceitos tericos envolvidos, leia com ateno o roteiro da prtica e tire todas as
dvidas.
2. Obtenha as propriedades qumicas, fsicas e toxicolgicas dos reagentes a serem utilizados, e a
forma de prevenir e contornar os possveis acidentes causados por eles. Em muitos casos essas
instrues so encontradas no prprio rtulo do reagente.
DURANTE A AULA PRTICA
1.

O laboratrio um local de trabalho srio; portanto, evite brincadeiras que dispersem sua
ateno e de seus colegas. Trabalhe com calma, ateno e responsabilidade, e seja metdico.
Esteja sempre ciente e respeite as principais regras de segurana.

2.

O cuidado e aplicao de medidas de segurana responsabilidade de cada indivduo; cada

um deve precaver-se contra perigos devido a seu prprio trabalho e ao dos outros.

3.

Consulte o professor sempre que tiver dvidas ou ocorrer algo inesperado ou anormal.

4.

Para sua segurana, use avental de algodo , de comprimento na altura dos joelhos e, de
mangas longas. No permitido entrar na aula usando bermuda ou calados abertos (chinelo,
sandlia, etc...).

5.

No fume, coma ou beba no laboratrio.

6.

Faa apenas a experincia prevista; qualquer atividade extra no deve ser realizada sem a
prvia consulta ao professor.

7.

No cheire, toque ou prove qualquer reagente. Lembre-se que a contaminao ocorre por
inalao e/ou ingesto e/ou absoro pela pele.

8.

Nunca deixe o bico de Bunsen aceso quando no estiver usando.

9.

No use substncias inflamveis prximo a chama.

10.

Trabalhe com cuidado com substncias txicas e corrosivas, como cidos, lcalis e solventes.

11.

Todo material txico e/ou que exale vapor deve ser usado na capela.

12.

Leia com ateno o rtulo do frasco de reagente antes de us-lo para certificar-se que o
frasco certo.

13.

Todos os frascos contendo reagentes, amostras e solues devem ser devidamente etiquetados
(identificao do material, nome do responsvel e data).

14.

No contamine os reagentes, voltando o reagente no utilizado ao frasco original ou usando

esptulas e pipetas sujas ou molhadas.

15.

Sempre que realizar a diluio de um cido concentrado, adicione-o lentamente, com agitao
sobre a gua, e nunca o contrrio.

16. NUNCA pipetar com a boca.

17.

No utilize material de vidro quebrado, rachado ou com defeito, principalmente para

aquecimento ou em sistemas com vcuo.

18.

No deixe vidraria ou qualquer equipamento quente sobre a bancada sem o devido aviso.

19.

Enxugue e lave qualquer local onde cair reagente.

20.

O laboratrio deve estar sempre limpo e arrumado, corredores e sadas desobstrudos, cho e
bancadas secas.

21.

Nunca jogue papis, fsforo ou qualquer slido na pia.

22.

Reagentes no tratados ou insolveis no devem ser jogados na pia. Solventes clorados e no

clorados devem ser armazenados em frascos separados.

23.

Ao aquecer um tubo de ensaio contendo qualquer substncia, no volte a extremidade aberta

do mesmo para si ou para uma pessoa prxima.

24.

Quando for testar algum produto qumico pelo odor, no coloque o frasco sob o nariz.
Desloque com a mo, para sua direo, os vapores que se desprendem do frasco.

RELATRIO
No se entra num laboratrio sem um objetivo especfico, portanto necessria uma
preparao prvia ao laboratrio: O que vou fazer? Com que objetivo? Quais os princpios qumicos
envolvidos nesta atividade?
Durante a realizao dos experimentos necessrio anotaes dos fenmenos observados,
das massas e volumes utilizados, tempo decorrido, condies iniciais e finais do sistema. Estas
anotaes possibilitaro uma descrio precisa das atividades de laboratrio. No confie em sua
memria, tudo deve ser anotado.
Aps o experimento vem o trabalho de compilao das etapas anteriores atravs de um
relatrio. O relatrio um modo de comunicao escrita de cunho cientfico sobre o trabalho
laboratorial realizado.

MATERIAIS MAIS USADOS EM LABORATRIO

1. Balo de Fundo Chato: Utilizado

como recipiente para conter lquidos
ou solues, ou mesmo, fazer reaes
com desprendimento de gases. Pode
ser aquecido sobre o trip com tela de
amianto
2. Balo de Fundo Redondo:
Utilizado para aquecimento de
lquidos e reaes de desprendimento
de gases

1.

6
2

3. Balo Volumtrico: Possui volume

definido e utilizado para o preparo
de solues com preciso em
laboratrio
4. Becker: Serve para fazer reaes
entre solues, dissolver substncias
slidas,
efetuar
reaes
de
precipitao e aquecer lquidos. Pode
ser aquecido sobre a tela de amianto.
5. Bureta: Aparelho utilizado em
anlises volumtricas precisas.
6. Cadinho: Utilizado para aquecer
substncias a seco e com grande
intensidade de calor (acima de
500C), por isto pode ser levado
diretamente ao bico de bunsen.
7. Cpsula de Porcelana: Pea de
porcelana usada para evaporar
lquidos das solues e na secagem de
substncias. Podem ser utilizadas em
estufas desde que se respeite o limite
de no mx. 500C.
8. Condensador: Utilizado na
destilao, tem como finalidade
condensar vapores gerados pelo
aquecimento de lquidos. Os mais
comuns so os de Liebig, como o da
figura ao lado, mas h tambm o de
bolas e serpentina.
9. Dessecador: Usado para guardar
substncias em atmosfera com baixo
ndice de umidade.
10. Funil de Buchner: Utilizado em
filtraes a vcuo. Pode ser usado
com a funo de filtro em conjunto
com o Kitassato.
11. Funil de Separao: Utilizado na
separao de lquidos no miscveis e
na extrao lquido/lquido.

3
7

4
8

10

11

12. Kitassato: Utilizado em

conjunto com o funil de Bchner
em filtraes a vcuo.
13. Funil: Usado na filtrao e
para reteno de partculas
slidas. No deve ser aquecido.
14. Pipeta Graduada: Utilizada
para medir pequenos volumes.
Mede volumes variveis. No
pode ser aquecida e no
apresenta preciso na medida.
15. Pipeta Volumtrica: Usada
para medir e transferir volume de
lquidos, no podendo ser
aquecida, pois possui grande
preciso de medida. Medem um
nico volume, o que caracteriza
sua preciso.
16. Proveta ou Cilindro
Graduado: Serve para medir e
transferir volumes variveis de
lquidos em grandes quantidades
se
necessrio.
Pode
ser
encontrada em volumes de 25 at
1000mL. No pode ser aquecida.
17. Tubo de Ensaio: Empregado
para fazer reaes em pequena
escala, principalmente em testes
de reao em geral.
18. Vidro de Relgio: Pea de
Vidro de forma cncava, usada
em anlises e evaporaes em
pequena escala, alm de auxiliar
na pesagem de substncias no
volteis e no higroscpicas. No
pode ser aquecida diretamente.
19. Anel ou Argola: Usado
como suporte do funil na
filtrao.
20. Balana Digital: Usada para
a medida de massa de slidos e
lquidos no volteis com
preciso de at quatro casas
decimais.
21. Bico de Bunsen: a fonte de
aquecimento mais utilizada em
laboratrio. Deve-se evitar seu
uso
quando
utilizamos
substncias inflamveis dentro
do recipiente que se quer
aquecer.
22. Estante para Tubo de
Ensaio: usada para suporte dos
tubos de ensaio.

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17

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23. Garra de Condensador: Usada

para prender o condensador haste
do suporte ou outras peas como
bales, erlenmeyers etc
24. Pina de Madeira: Usada para
prender o tubo de ensaio durante o
aquecimento.
25. Pina Metlica (Tenaz): Usada
para manipular objetos aquecidos.
26. Pisseta ou Frasco Lavador:
Usada para lavagens de materiais
ou recipientes atravs de jatos de
gua, lcool ou outros solventes.
27. Suporte Universal: Utilizado
em operaes como: Filtrao,
Suporte para Condensador, Bureta,
Sistemas de Destilao etc. Serve
tambm para sustentar peas em
geral.
28. Tela de Amianto: Suporte para
as peas a serem aquecidas. A
funo do amianto distribuir
uniformemente o calor recebido
pelo bico de bunsen.
29. Trip: Sustentculo para
efetuar aquecimentos de solues
em
vidrarias
diversas
de
laboratrio. utilizado em
conjunto com a tela de amianto.
30. Esptulas
e Colheres:
Utilizadas para transferncia de
slidos, so encontradas em ao
inox, porcelana, nquel, osso e pp.
31. Furadores de Rolhas:
Dispositivos
de
dimetros
diferentes, utilizados para obter um
orifcio de dimetro desejado em
rolhas de cortia ou borracha.
32. Centrfuga: Serve para
acelerar o processo de decantao.
33. Pesa Filtro: Indicado para
pesagem de slidos higroscpicos
e volteis.
34.
Estufa: Com controle de
temperatura atravs de termostato
utilizada para secagem de material;
costuma alcanar at 300C.
35.
Mufla:
Produz
altas
temperaturas. utilizada, em geral,
para calcinao, alcanando at
1200C.
36. Balo de Destilao: Utilizado
para destilao. Possui sada lateral
para condensao de vapores.

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37. Garras Diversas: Fixar

tubos, bales, erlenmeyers,....
38. Basto de Vidro:
Utilizado para agitar solues,
transporte de lquidos nas
filtraes.
41. Termmetros: Utilizado
para mediadas de
temperatura.
42. Almofariz com Pistilo:
Usado
na triturao
e
pulverizao de slidos.

41

37

42
38

AULA 1
1.1. UTILIZAO DO BICO DE BUNSEN

utilizado no laboratrio como fonte de calor para diversas finalidades, como: Aquecimento de
solues, estiramento e preparo de peas de vidro entre outros. Possui como combustvel
normalmente gs de rua ou o G.L.P (Gs Liquefeito de Petrleo) e como comburente oxignio do
ar atmosfrico que em proporo otimizada permite obter uma chama de alto poder energtico.

Como se v na figura, com o anel de ar primrio

parcialmente fechado, distinguimos trs zonas de chama:

a) Zona Externa: Gases expostos ao ar sofrem

combusto completa, resultando CO2 e H2O.
Esta zona chamada de zona oxidante.
b) Zona Intermediria: caracterizada
por
combusto incompleta, por deficincia do
suprimento de O2. O carbono forma CO
(monxido de carbono) o qual decompe-se pelo
calor, resultando diminutas partculas de
carbono que do luminosidade a chama. Esta
zona chamada de zona redutora.
c) Zona Interna: Limitada por uma casca
azulada, contendo os gases que ainda no
sofreram combusto mistura carburante.
Dependendo do ponto da chama, a temperatura
varia, podendo atingir 1560 C.

Um bico de Bunsen pode ser usado para:

Aquecer solues aquosas no inflamveis.

Polir a fogo vidros quebrados.
Secar sais hidratados.
Fundir amostra.
Aquecer sais para observar espectros emitidos.

I. Prtica para utilizao do bico de bunsen

Mtodos:
a) Aquecer CUIDADOSAMENTE em um tubo refratrio 2ml de soluo salina diretamente na
chama do bico de bunsen at a total evaporao.
Anotaes_______________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
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b) Utilizando o trip e tela de amianto, aquecer gua at a ebulio. Prestando bastante ateno aos
materiais utilizados para sua prpria segurana.
Anotaes_______________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
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________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________

1.2. MEDIDAS DE VOLUMES APROXIMADAS E PRECISAS

A medida precisa de volume to importante em muitos mtodos analticos como a medida de

massa.
Unidades de volume. A unidade de volume o litro (L), definido como um decmetro cbico. O
mililitro (mL) 1/1000 L e usado onde o litro representa uma unidade de volume
inconvenientemente grande.
Equipamentos para medidas precisas de volume. Medidas confiveis de volume so realizadas
com uma pipeta, uma bureta ou um balo volumtrico.
Pipetas. As pipetas permitem a transferncia, de um recipiente a outro,
de volumes conhecidos, com preciso.
Uma pipeta volumtrica ou de transferncia dispensa um volume
nico, fixo, entre 0,5 e 50 mL. Muitas destas pipetas tm cdigos
coloridos para fcil identificao de seu volume.
A pipeta graduada transfere volumes variveis entre 0,1 ml e 20 ml.
So encontradas nas seguintes medidas: 1, 2, 5, 10 e 20 ml.

Buretas. Assim como as pipetas, as buretas so capazes de dispensar

qualquer volume, at sua capacidade mxima. A preciso alcanvel com
uma bureta muito maior do que com uma pipeta. (a)
Bales volumtricos. So fabricados com capacidades mximas de 5 mL
a 5 L e so geralmente calibrados para conter um volume especfico de
lquido quando preenchido at sua marca de calibrao (no pescoo do
balo). Eles so usados para a preparao de solues-padro e para
diluio de amostras a um volume fixo, antes de se tomarem alquotas
com uma pipeta. (b)

Evitando a paralaxe. A superfcie de um lquido confinado num tubo

estreito exibe uma curvatura marcante, ou menisco. comum utilizar a
parte inferior do menisco como ponto de referncia na calibrao e no
uso de equipamento volumtrico. Este ponto mnimo pode ser melhor
visualizado segurando-se um carto de papel opaco atrs da coluna
graduada.

Ao se ler volumes, seu olho deve estar no nvel da superfcie do lquido para assim evitar um erro
devido paralaxe. Paralaxe um fenmeno que provoca a sensao: do volume ser menor que seu
valor real se o menisco for "olhado" por cima da superfcie e do volume ser maior se o menisco for
"olhado" abaixo da superfcie do lquido.

Equipamentos que nos fornecem medidas de volumes aproximadas: provetas, beckers,

erlenmeyer.
ATENO!!!!!
SUA BOCA NUNCA deve ser usada para suco j que h possibilidade de ingerir acidentalmente
o lquido sendo pipetado. Ao invs da boca, deve-se usar uma pra de borracha ou um tubo de
borracha conectado trompa de vcuo.
Objetivos: Conhecer equipamentos e tcnicas de medidas de volume em laboratrio
Procedimento experimental:
1. Medir 50 ml de gua em um Becker e transferir para o Erlenmeyer . Verificar o erro de
escala.
Transferir para a proveta graduada e fazer a leitura do volume. Verificar a preciso
Anotar os resultados
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
2. Medir 50 ml de gua na proveta graduada e transferir para Becker. Verificar o erro na
escala.
Transferir para Erlenmeyer. Verificar a preciso.
Colocar estes trs aparelhos em ordem crescente de preciso.
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
3. Pipetar 50 ml de gua usando pipeta volumtrica.
Transferir para a proveta.

__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Comparar a preciso das escalas.
4. Pipetagem: Utilizando pipetas graduadas de volumes diversos (1 ml, 2 ml, 5 ml, 10 ml e 20
ml), pipetar gua com a finalidade de treinar o aluno para controlar volumes variveis numa
pipeta graduada.

AULA 02
2.1. DILUIO E SOLUES

O que uma soluo?

Solues so misturas homogneas de duas ou mais substncias
Exemplo: No caso de uma soluo contendo gua e sal, temos o soluto e o solvente.
Soluto: trata-se da substncia que se encontra em menor quantidade na dissoluo, portanto esta
dissolvida em outra. No caso da mistura acima o sal o soluto.
Solvente: esta a outra substncia, ou seja, a que dissolve o soluto. o agente dissolvente. No caso
da mistura citada anteriormente, a gua o dissolvente.
De acordo com a proporo entre soluto e solvente temos:
Solues diludas: so aquelas contm pouco soluto em relao ao solvente (ex. 10g de sal comum
por litro de gua).
Solues concentradas: so aquelas que contm muito soluto (ex. 300g de sal comum por litro de
gua)
O que uma soluo saturada?
Quando colocamos uma quantidade excessiva de sal na gua, sob agitao, uma parte do soluto
dissolve. A quantidade adicional que ir se depositar ou precipitar no fundo do recipiente,
dizemos ento que a soluo est saturada ou que atingiu o ponto de saturao.
Coeficiente ou grau de solubilidade a quantidade de uma substncia (em geral, em gramas)
necessria para saturar uma quantidade padro (em geral, 100g, 1000g ou 1 litro) de solvente, em
determinadas condies fsicas de temperatura e presso.
Concentrao o quociente entre a massa do soluto (em gramas) e o volume da soluo em
litros.
Matematicamente C= m1 Unidade: gramas por litro (g/l)
V
A concentrao indica quantos gramas de soluto existem em cada litro de soluo.

Diluio de uma soluo consiste em adicionar a ela uma poro do solvente puro.
A massa do soluto ser a mesma na soluo inicial e na final, mas a concentrao ir diminuir, pois
o volume aumentou.

Experimento:
Materiais
Vidrarias
5 Tubos de ensaio
Pipetas graduadas

Reagentes
Azul de metileno
H2O destilada

Outros
Pra de borracha
Estante para tubos
Becker de plstico
Papel higinico
Caneta p/ marcar tubo
Descarte p/ pipetas

O que fazer:
Tubos de
ensaio
1
2
3
4
5

Diluio
1/10
1/50
1/100
1/200
1/600

H2O dest.
(ml)

Azul

de
metileno

AULA 03
ALANA ANALTICA e MOLARIDADE
1. Cuidados bsicos
a) Verificar sempre o nivelamento da balana.

b) Deixar sempre a balana conectada tomada e ligada para manter o equilbrio trmico dos
circuitos eletrnicos.

c) Deixar sempre a balana no modo stand by, evitando a necessidade de novo tempo de
aquecimento (warm up).
2. O frasco de pesagem

d) Usar sempre o menor frasco de pesagem possvel (pode-se utilizar papel manteiga ou
alumnio).
e) A temperatura do frasco de pesagem e seu contedo devem estar mesma temperatura que
a do ambiente da cmara de pesagem.

f) Nunca tocar os frascos diretamente com os dedos ao coloc-los ou retir-los da cmara de

pesagem.
3. O prato de pesagem

a) Colocar o frasco de pesagem sempre no centro do prato de pesagem.

b) Remover o frasco de pesagem do prato to logo termine a operao de pesagem.
4. A leitura

c) Verificar se o mostrador indica exatamente zero ao iniciar a operao. Tare a balana, se for
preciso.

d) Ler o resultado da operao to logo o detetor automtico de estabilidade desaparea do

mostrador.
5. Calibrao

e) Calibrar a balana regularmente, principalmente se ela estiver sendo operada pela primeira
vez, se tiver sido mudada de local, aps qualquer nivelamento e aps grandes variaes de
temperatura ou de presso atmosfrica.
6. Manuteno

f) Manter sempre a cmara de pesagem e o prato de pesagem limpos.

g) Usar somente frascos e papeis para pesagem limpos e secos.

AULA 04
MOLARIDADE
Molaridade ou concentrao molar a relao entre o nmero de moles do soluto e o volume da
soluo, em litros.
Um mol de qualquer substncia contm 6.02 x 10 23 (nmero de Avogadro) unidades qumicas
elementares (por exemplo, molculas). muito conveniente medir concentraes em moles j que
as reaes se ajustam lei de propores definidas.
Concentrao em Mol/l ou Molaridade M o quociente do nmero de mols do soluto pelo volume
da soluo (em

).

Como calcular a massa de uma substncia: exemplo o NaOH

Com a tabela peridica em mos calculamos a massa, em gramas, de um mol de hidrxido de sdio:
(23+16+1=40).
Como 1 mol tem massa igual a 40 gramas, se diluirmos em 1 litro de gua teremos uma soluo de1
Mol ou 1 Molar de NaOH.
Resumindo, MOLARIDADE ou concentrao molar, a quantidade de matria (SOLUTO), em
moles, por volume de SOLUO, em litros.

Experimento: Preparo de Soluo

1. Aprender a efetuar clculos de molaridade, utilizar a Balana Analtica e vidraria adequada para
o preparo de uma soluo.

Preparar 100 ml das solues:

Na2HPO4 0,2M
KH2PO4 0,2M
Procedimento:
1. Efetuar os clculos necessrios. Pesar o sal em balana e transferir para o Becker de vidro.
2. Diluir o material com a metade do volume total de gua destilada (lavar o papel para retirar todo
sal) em Becker de vidro.
3. Homogeneizar com o basto de vidro at o sal ficar totalmente diludo.
4. Com auxlio de um funil e basto, verter a soluo para o balo volumtrico.
5. Adicionar um pouco mais de solvente ao Becker de vidro para lavar o funil e basto, transferir ao
balo volumtrico.
6. Completar at ao trao, primeiro com a pisseta e depois com conta-gotas.
8. Tapar e homogeneizar a soluo invertendo vrias vezes o balo de diluio.
9. Transferir para o frasco de soluo estoque com o auxlio do funil e do basto de vidro.
10. Identificar o frasco com o nome da soluo, a molaridade e a data que foi realizado.

AULA 05
CIDOS E BASES
1- A teoria de Brnsted-Lowry
Os conceitos clssicos de cido e base foram dados por Arrhenius, em 1884. Segundo ele,
cidos so substncias capazes de liberar ons H + quando em soluo aquosa, e bases so
substncias capazes de liberar ons OH-, tambm em soluo aquosa. Quando foram observadas
determinadas reaes em solues no aquosas, os qumicos sentiram uma necessidade de ampliar
os conceitos clssicos. Surgiram ento novos conceitos, baseados nas estruturas moleculares e
eletrnicas das substncias.
Observando que todos os cidos de Arrhenius continham hidrognios ionizveis, J. N.
Brnsted e T. M. Lowry propuseram, independentemente que:

cido - toda espcie qumica capaz de ceder prtons.

Base - toda espcie qumica capaz de receber prtons.

Exemplos:
HCl + H2O
H3O+ + ClNH3 + H2O
NH4+ + OHComo os cidos se ionizam em ons hidrognio (H+) e as bases em ons hidrxido (OH-),

conclui-se que quanto mais ons hidrognio em uma soluo, mais cidos ela . Alternativamente,
quanto mais ons hidrxido em uma soluo, mais bsicos (alcalina) ela . O termo pH usado para
descrever o grau de acidez ou alcalinidade (basicidade) de uma soluo. A acidez ou a alcalinidade
de uma soluo expressa em uma escala de pH que vai de 0 a 14.

ESCALA DE pH
Em pH 7 (neutralidade), as concentraes de H+ e OH- so iguais. Um valor de pH acima de 7
indica uma soluo alcalina (bsica). Uma mudana de uma unidade na escala de pH representa
uma mudana de 10 vezes da concentrao anterior.
A escala de pH baseada no nmero de H+ em uma soluo (expressam em cenas unidades
qumicas chamadas de moles por litro). Uma soluo com valor O na escala de pH tem muitos H+ e
poucos OH-. Uma soluo com pH 14, em contraste, tem muitos OH- e poucos H+. O ponto central
7, onde as concentraes de H+ e OH- so iguais. Uma soluo com pH 7, por exemplo, a gua
pura, neutra. Uma soluo com mais H+ que OH-, cida e tem pH abaixo de 7. Uma soluo
com mais OH- que H+, bsica (alcalina) e tem um pH acima de 7. Uma mudana de uma unidade
inteira na escala de pH representa uma mudana de 10 vezes em relao concentrao anterior.
Isto significa que, um pH 2, 10 vezes mais cido que um pH 3, e que um pH 1 100 vezes mais
cido que um pH 3.
Indicadores de pH
So substncias que possuem a propriedade de mudar de cor em funo da concentrao de ons
H+. Portanto a tabela mostra o comportamento dos cidos e bases em presena de alguns
indicadores.
INDICADOR
Fenofitalena
Metilorange
Tornassol

COR EM MEIO CIDO

Incolor
Vermelho
Vermelho

COR EM MEIO BSICO

Vermelho
Amarelo
Azul

Experimento:
Medir o pH de diversas solues
Soluo
A
B
C
D
E

pH

cido ou Base

MUITO IMPORTANTE ATENO!!!!!!

Material

NUNCA SE DEVE ADICIONAR GUA A UM CIDO CONCENTRADO, poder ocorrer

uma exploso com a conseqente projeo de cido concentrado.
Adicionar antes o cido gua, lentamente deslizando pela parede do recipiente e com agitao
constante.

A dissoluo de cidos concentrados um processo bastante exotrmico.

AULA 06
SOLUO TAMPO
Uma soluo tampo mantm o pH aproximadamente constante quando a ela so adicionados ons
H+ ou ons OH.
O metabolismo celular produz cidos que so lanados, continuamente, nos lquidos intracelular e
extracelular e tendem a modificar a concentrao dos ons hidrognio. A manuteno da
concentrao dos ons hidrognio dentro da faixa tima para o metabolismo celular depende da
eliminao do cido carbnico nos pulmes, da eliminao de ons hidrognio pelos rins e da ao
dos sistemas tampo intra e extracelulares.
O modo como o organismo regula a concentrao dos ons hidrognio (H+) de fundamental
importncia para a compreenso e a avaliao das alteraes do equilbrio entre os cidos e as bases
no interior das clulas, no meio lquido que as cerca (lquido intersticial) e no sangue (lquido
intravascular).
As solues tampo tm grande importncia biolgica. Exemplos: HCO3/H2CO3 e HPO42-/H2PO4,
responsveis pela manuteno do pH do sangue.
Seus fluidos corporais devem manter um equilbrio constante de cidos e bases pelo fato de as
reaes bioqumicas que ocorrem em sistemas vivos serem extremamente sensveis mesmo a
pequenas alteraes de acidez ou alcalinidade do meio. Qualquer modificao nas concentraes
normais de H+ e OH- pode afetar seriamente uma funo de uma clula.
Experimento:
Preparo de soluo Tampo pH 7,4. Utilizao do pHmetro
Colocar 80 ml da soluo de Na2HPO4 0,2 M em um becker e medir o pH.
Acrescentar cuidadosamente KHPO4 0,2 M at atingir o pH 7.4
Anotar o volume necessrio para obter o pH timo

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_______________________________________________________________________________
Acrescentar estas perguntas ao relatrio:
1. Qual a diferena na utilizao das fitas indicadoras de pH e o pHmetro?

2. Faa um esquema de uma escala de pH com seus valores correspondentes

AULA 07
TITULAO

Titulometria- A titulao consiste na determinao do volume necessrio de uma soluo padro,

para reagir com um volume de uma soluo problema.
Acidimetria a determinao da dosagem de um cido, empregando uma soluo padronizada de
uma base.
Alcalimetria a determinao da dosagem de uma soluo padronizada de um cido.
Quando se adicionam nmeros iguais de equivalentes-grama de base e de cido, a soluo mudar
de cor em funo da presena de um indicador cido-base. Essa mudana de cor indica o ponto final
da titulao e chamado de ponto de viragem ou ponto de equivalncia. (V1 . N2 = V2 . N2)
Conhecendo a proporo em que reagem as substncias e tendo determinado a quantidade de uma
substncia (o reativo titulado) necessria para reagir nesta proporo, pode-se calcular facilmente a
quantidade desconhecida de substncia presente no frasco da reao.

MATERIAL:
- Bureta de 50 mL.
- Garra de bureta.
- Suporte universal.
- Funil.
- Pisseta.
- Erlenmeyer de 250 mL.
- Indicador de pH- Fenoftalena
- Soluo de hidrxido de sdio de sdio 0,5 M (NaOH).
- Suporte universal.
- Soluo de cido clordrico (HCl). Concentrao desconhecida

AULA 08
CARACTERIZAO DAS PROTENAS
AMINOCIDOS
Os aminocidos apresentam em sua molcula o grupo carboxila (que lhes d caracterstica
cida) e o grupo amino (que lhes d caracterstica bsica). Desse modo, quando em soluo, ocorre
interao intramolecular, originando um "sal interno":

A nomenclatura dos aminocidos deve obedecer s regras da IUPAC. Assim a numerao

dos carbonos da cadeia principal deve iniciar pelo grupo carboxila; ou ento, devemos nomear tais
carbonos com letras gregas a partir do carbono vizinho carboxila.

Os amino-cidos so molculas orgnicas que sempre contm tomos de carbono,

hidrognio, oxignio e nitrognio em sua composio, podendo tambm possuir tomos de enxofre
na sua estrutura, como o caso dos amino-cidos cistena e metionina. So conhecidos mais de 30
amino-cidos diferentes, sendo que 20 so mais comuns, entre eles: cido asprtico, cido
glutmico, arginina, asparagina, cistena, cistina, fenilalanina, glutamina, histidina, leucina, lisina,
metionina, prolina, serina, treonina, triptofano e valina.
As protenas so compostos orgnicos de estrutura complexa e massa molecular elevada
(entre 15.000 e 20.000.000) e so sintetizadas pelos organismos vivos atravs da condensao de
um nmero grande de molculas de a -aminocidos, atravs de ligaes denominadas ligaes
peptdicas. Essa estrutura foi esclarecida pelo cientista Emil Fischer.

As protenas so substncias slidas, incolores, insolveis em solventes orgnicos, algumas

so solveis em gua, enquanto outras so solveis ou em solues aquosas diludas de sais, ou em
solues aquosas de cidos, ou em solues aquosas de bases, produzindo sempre colides. Elas so
essenciais para o funcionamento das clulas vivas e, juntamente com os glicdios e lipdios,
constituem a alimentao bsica dos animais. No organismo humano, durante a digesto, elas se
hidrolisam catalticamente no estmago sob a ao da pepsina (suco gstrico) e da tripsina (suco
pancretico) e no intestino (duodeno) sob a ao da erepsina.
I. REAES DE CARACTERIZAO DE PROTENAS

1. Reao de Biureto A reao do biureto devida s ligaes peptdicas dando positivo para
protenas e peptdeos com trs ou mais resduos de aminocidos. As protenas ou peptdeos, quando
tratados por uma soluo diluda de sulfato de cobre, em meio alcalino, do uma colorao prpura
caracterstica. O responsvel pela cor o complexo, que pode ser representado assim:

Reativos
Hidrxido de sdio 2,5N
Soluo de sulfato de cobre a 1%
Soluo de protena de ovo a 10%
Tcnica
Pipetar em 1 tudo de ensaio 1 ml da soluo de protenas
Colocar 5 gotas de NaOH 2,5N
Colocar 3 gotas de sulfato de cobre a 1%

Preparar junto um segundo tubo

substituindo a protena por H2O
destilada. Comparar os resultados.

2. Reao de Ninhidrina esta reao devido aos grupos amina, dando positiva para protenas,
peptdeos, aminocidos, aminas primrias e amnias. Esta reao particularmente importante na
revelao e dosagem de aminocidos.
Quando uma soluo de ninhidrina aquecida com uma soluo de aminocido, peptdeo ou
protena desenvolve-se uma colorao azul violeta caracterstica.
Aminocido + ninhidrina -> aquecimento-> prpura de Ruhemann (azul violceo)
Reage com grupos amino-terminais, alfa-amino, eta-aminos de lisina, amnia e sulfato de amnio.
Localiza aminocidos em lquidos biolgicos desproteinizados.

Reativos
Soluo de Ninhidrina a 0,1% em tampo fosfato pH 7,0
Soluo de protena de ovo

Tcnica
Pipetar em 1 tudo de ensaio 2 ml da soluo de ninhidrina
Colocar 5 gotas de protena
Ferver durante 2 minutos (banho fervente)

Preparar junto um segundo tubo

substituindo a protena por H2O
destilada. Comparar os resultados.

II. REAES DE PRECIPITAO DE PROTENAS

A exposio de molculas proticas a agentes como calor, extremos de pH, metais pesados,
alcalides, detergentes, solues concentradas de uria, solventes orgnicos, radiaes ultra-violeta,
etc..., faz com que a maioria delas apresente modificaes fsicas conhecidas como
DESNATURAO.
A desnaturao pode envolver alteraes nas estruturas quaternria, terciria e secundria da
protena, mas no na estrutura primria. Durante o processo da desnaturao a protena
desenrolada e expe grupos hidrofbicos que repelem gua. A protena desnaturada torna-se,
portanto menos solvel e precipita. Ocorrem ainda outras alteraes como diminuio da
solubilidade, perda da atividade biolgica, aumento da reatividade de radicais de cadeia
polipeptdica, alteraes na viscosidade e coeficiente de sedimentao.
As protenas perdem a sua conformao e, consequentemente, a sua funcionalidade. A desnaturao
pode ser: reversvel ou irreversvel. Dependendo da forma pela qual a protena foi desnaturada, sua
conformao nativa pode ser recuperada (renaturao) retirando-se lentamente o agente
desnaturante, como por exemplo fazer uma dilise contra gua para retirar o agente desnaturante
uria.
Reativos
Clara de ovo diluda 10 vezes
cido tricloroactico a 10%
Acetato de chumbo a 5%
lcool etlico absoluto
A. Desnaturao por ao do calor
O calor pode desnaturar muitas protenas.
Tcnica
Colocar 2 ml de clara de ovo em um tubo de ensaio
Aquecer diretamente na chama

Anotaes_______________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
B. Precipitao por reao com agentes alcalides
Os agentes alcalides so cidos que podem combinar-se com as protenas que possuem carga
positiva (quando o pH da soluo est no lado cido do ponto isoeltrico da protena) formando
complexos insolveis.
Entre estes reagentes encontram-se: cido pcrico, cido tnico, cido fosfotungstico, cido
sulfosaliclico, cido tricloroactico, etc.
Tcnica
Colocar em tubo de ensaio 1 ml de clara de ovo e 1 ml de cido tricloroactico a 10%. Observar a
formao de precipitado branco de protena desnaturada.
Anotaes_______________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
C. Precipitao por reao com sais de metais pesados
Em pH situado no lado alcalino do seu ponto isoleltrico, algumas protenas combinam-se com
ctions de metais pesados, formando protenas insolveis.
Tcnica
Colocar em tubo de ensaio 1 ml de clara de ovo e 1 ml de acetato de chumbo a 5%. Observar a
formao de precipitado de protena desnaturada.
Anotaes_______________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
D. Precipitao por ao de solventes orgnicos
Solventes orgnicos como lcool, ter e acetonas que abaixam a constante dieltrica das solues
aquosas de protenas diminuem tambm sua capacidade de solvatao, causando a perda de
solubilidade das protenas.
Tcnica
Colocar em tubo de ensaio 1 ml de clara de ovo e gotejar o etanol at a formao de precipitado..
Anotaes_______________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________

AULA 8b
III. REAES DE PRECIPITAO SEM DESNATURAO
A solubilidade de uma protena depende do nmero e do arranjo de cargas na molcula, que por sua
vez depende da composio em aminocidos. Partes no proticas da molcula, como lipdeos,
carboidratos, fosfatos, etc., tambm afetam a solubilidade.
Fora inica

Em baixas concentraes de sais (baixa fora inica), a solubilidade em geral aumenta, pois
os ons salinos tendem a se associar s protenas contribuindo para uma hidratao e/ou
repulso entre as molculas, aumentando a solubilidade salting in. Salting-in leva
solubilizao por diminuir a interao protena-protena.

Em elevadas concentraes salinas, os ons competem com a protena pela gua,

ocasionando perda de gua de hidratao, atrao mtua entre as molculas e formao de
precipitado salting out. Salting-out quando voc continua colocando mais sal de forma
que leva precipitao novamente por remover partculas de gua e aumentar as chances de
ter interao protena-protena.

Reativos
Clara de ovo
Cloreto de sdio 1N
Soluo saturada de sulfato de amnio
Salting-in
Tcnica
Pipetar 3 ml de clara de ovo em um tubo de ensaio. Acrescentar a soluo de cloreto de sdio 1N
at a total dissoluo do precipitado.
Salting-out
Tcnica
Passar 5 ml da soluo obtida no experimento do sating-in para um tubo de ensaio. Juntar a seguir
colocar devagar a soluo de sulfato de amnio at observar a formao de precipitado.

Anotaes_______________________________________________________________________
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AULA 09
O QUE SO ENZIMAS?
Chamamos de enzimas as protenas complexas (heteroprotenas ou protenas derivadas) que
atuam como catalisadores nos processos biolgicos. Assim, as reaes que ocorrem nos organismos
vivos so catalisadas pelas enzimas. Em muitos casos, as enzimas intracelulares ou endoenzimas.
Em outros casos, atuam fora da clula em que so produzidas, da serem chamadas de enzimas
extracelulares ou exoenzimas.
Elas so compostos facilmente destrudos pelo calor (temperatura acima de 70C), por
agitao intensa, por ondas ultravioleta e ultra-sonoras, por substncias como o cianeto de sdio, o
fluoreto de sdio, traos de metais pesados, cidos ou bases, etc.

ENZIMOLOGIA
O objetivo desta aula propor um roteiro prtico de enzimologia para medir a atividade
proteoltica usando como matriz enzimtica detergente em p de uso comum. Este roteiro permite a
discusso sobre noes bsicas de enzimologia como atividade enzimtica, substrato especfico e

temperatura e pH adequados para a atividade tima. Cabe ainda discutir as vantagens de se utilizar
enzimas em produtos industrializados de uso comum e tambm os cuidados necessrios para se
prevenirem seus efeitos indesejveis.
Os sabes em p em sua maioria so adicionados de enzimas que vo degradar a matria
orgnica, de acordo com sua afinidade pelo substrato, presente nas manchas das roupas. Os
principais tipos de enzimas utilizadas na indstria de detergentes incluem: a) amilases que
degradam amido e outros carboidratos; b) proteases que degradam ligaes peptdicas; c) lpases
que degradam lipdeos; d) celulases que degradam celulose. A principal vantagem da formulao de
detergentes que contenha enzimas a substituio de produtos custicos, cidos e solventes txicos,
que agridem o meio ambiente e que provocam o desgaste de materiais e de instrumentos. O uso
diversificado das enzimas deve-se sua caracterstica de atuar como biocatalisadores
especializados.
Os detergentes modernos apresentam um espectro de ao e de utilizao bastante amplo, havendo,
conseqentemente, necessidade de especializao das formulaes. As enzimas adicionadas s
formulaes de detergentes de uso hospitalar, domstico e industrial agem digerindo e dissolvendo
resduos orgnicos (sangue, fezes, urina, vmitos, manchas diversas), higienizando as partes
externas e internas de instrumentos cirrgicos, desobstruindo canais com resduos e coagulados,
eliminando resduos fecais dos canais e superfcies dos fibroscpios e removendo contaminantes da
rouparia hospitalar.
Aula demonstrativa

Materiais
a) Reagentes
Casena 2% (m/v)
Tampo tris-HCL, pH 8,0
0,8 mL de cido tricloroactico 20%
Soluo de detergente a 2%
b) Vidrarias
Pipetas de 1, 2 e 10mL graduadas
Tubos de ensaios de 10mL
Banho-maria a 50.C

Centrfuga
Espectrofotmetro a 400nm
Banho de gelo para resfriamento
Mtodos:
a) Preparar os tubos de ensaios conforme o esquema descrito na Tabela 1.
b) Resfriar em banho de gelo at precipitar toda casena.
c) Centrifugar a 2500rpm, 5min
d) Fazer a leitura em espectrofotmetro a 400nm, utilizando-se do tubo 1 como branco
Tabela 1: Esquema do experimento para determinar atividade proteoltica do sabo em p
Reagentes
Sol. detergente
Tampo Tris
Sol. casena
Incubao (50C)
Sol. TCA

Tubo 1
1ml
1ml
1ml
0 min.
8ml

Tubo 2
1ml
2ml
1ml
5 min.
8ml

Tubo 3
1ml
2ml
1ml
15 min.
8ml

Tubo 4
1ml
2ml
1ml
30 min.
8ml

Tubo 5
1ml
2ml
1ml
45 min.
8ml

RELATRIO
Apresentao de resultados e discusso
a) Elaborar uma tabela com os resultados obtidos, e fazer um grfico.
Nome da tabela e grfico: Avaliao da atividade da protease em funo da absorbncia e do
tempo de contato com o substrato protico.
Tempo (minutos) (eixo X)

Absorbncia (400nm) (eixo Y)

Grfico e tabela.

Roteiro de Aula Prtica

Assunto: cidos nuclicos
Experimento 7 - extrao

Materiais:
Providenciado pelos alunos
Cebola descascada
Papel de filtro ou gaze

Do laboratrio
Cloreto de sdio, (10g - aprox. 2 colheres peq.);
basto de vidro;
Detergente (aprox. 120ml)
faca;
lcool etlico (gelado aprox.
funil;
gua destilada (aprox. 120ml)
ralador ou picador ou mixer;
Banho-maria (a aprox. 60C);
proveta graduada;
Cuba com gelo;
bquers de 250ml;
Procedimentos:
(os passos de 1 a 6 sero executados pelo professor, em conjunto para todas as equipes)
1.Pique a cebola em pedaos pequenos.
2.Coloque em um bquer o detergente, a gua e o cloreto de sdio, mexendo a mistura at que os
seus elementos se dissolvam completamente.
3.Adicione a esta soluo a cebola picada;
4.Coloque o bquer no banho-maria a 60C por 15 minutos, mexendo de vez em quando.
5.Findado esse tempo d um choque trmico na soluo colocando o bquer no gelo por 5
minutos.
6.Triture a cebola com a soluo por 45 seg. e coloque no gelo por 15 minutos
Filtre a mistura em gaze, sem deixar passar a espuma e recolhendo o filtrado em um bquer
limpo.
Adicione ao filtrado lcool etlico gelado, deixando-o escorrer pela parede do bquer;
Verifique a formao de duas fases e o surgimento de fios viscosos de DNA.
Mergulhe o basto de vidro e, com movimento circular em um nico sentido, entre as duas fases e
enrole os filamentos obtidos.
Registre o ocorrido.

Objetivos:
Entender como pode ser feita a separao de cidos nuclicos com base nas suas caractersticas
Verificar o comportamento de diferentes grupos de biomolculas em diferentes solues

Sugestes para o relatrio:

Explicar a importncia de cada etapa do procedimento e o comportamento dos diversos tipos de
biomolculas encontradas.
Explicar por que o DNA pode ser visualizado.

AULA 10
EXTRAO DE DNA E LMINA DE CEBOLA COM AZUL DE METILENO
Toda a informao necessria para criar um organismo encontra-se no DNA. Esta molcula usada
durante o perodo de vida de um organismo para fornecer instrues para milhes de processos
celulares que ocorrem constantemente. Para estudar o modo como essas informaes so
comunicadas clula os cientistas isolaram o DNA e estudaram o modo de interao do DNA com
as protenas e RNAs.
Este trabalho laboratorial usa um processo semelhante ao utilizado pelos cientistas quando
comearam as primeiras investigaes sobre DNA. Para isolar o DNA os cientistas separaram-no
dos outros componentes celulares. As clulas foram fragmentadas e o DNA separado do contedo
lipdico das membranas da clula e das organelas. Em seguida o DNA foi separado das protenas.
A extrao do DNA de clulas eucariontes consta fundamentalmente de trs etapas:
h) Ruptura das clulas para liberao dos ncleos;
i)

Desmembramento dos cromossomos em seus componentes bsicos, DNA e protenas;

j)

Separao do DNA dos demais componentes celulares;

O bulbo de cebola foi usado por apresentar clulas grandes, que se rompem quando a cebola
picada.
O detergente desintegra os ncleos e os cromossomos das clulas da cebola, liberando o DNA. Um
dos componentes do detergente, o dodecil (ou lauril) sulfato de sdio, desnatura as protenas,
separando-as do DNA cromossmico.
O lcool gelado, em ambiente salino, faz com que as molculas de DNA se aglutinem, formando
uma massa filamentosa e esbranquiada.
O objetivo destas prticas, especialmente a extrao do DNA, de que experimentos cientficos
podem ser feitos de maneira relativamente simples, sem ser preciso equipamentos sofisticados para
sua realizao.

Extrao do DNA.
1) Pegue uma cebola cortada em cubinhos pequenos e coloque num Becker de 250ml.
2) Num outro Becker coloque 10ml de detergente, 3g de NaCl e complete com gua at
100ml.
3) Misture a soluo de detergente com a cebola picada e leve ao banho Maria a 60 C por 30
minutos.
4) Resfrie rapidamente a mistura colocando o Becker em uma bacia com gelo.
5) Mexa bem e, depois de resfriada, filtre a mistura, utilizando papel filtro.
6) Descarte o bagao e coloque o lquido num tubo de ensaio.
7) Despeje delicadamente lcool resfriado no tubo de ensaio.
8) Faa movimentos lentos com o tubo, de forma que o DNA passe para a fase alcolica.
9) Tente com cuidado, remover o DNA com um basto de vidro, ele parece, na fase alcolica,
como um chumao de algodo.

Perguntas para responder:

1. Onde se encontra o DNA na clula?
2. Qual a funo dos reagentes usados na experincia?
3. Quais as semelhanas e as diferenas entre o DNA de origem animal e o de origem
vegetal?
4. Porque motivo no se pode ver a dupla hlice que constitui a molcula de DNA?
Se a mistura de cebola cortada foi obtida de uma nica cebola, o DNA recolhido ser composto por
vrias rplicas dos mesmos cromossomas.

AULA 11
IDENTIFICAO DE LIPDEOS

So substncias caracterizadas pela baixa solubilidade em gua e outros solvente

polares e alta solubilidade em solventes apolares. So vulgarmente conhecidos como
gorduras e suas propriedades fsicas esto relacionadas com a natureza hidrfoba das suas
estruturas. Justamente por serem insolveis, os lipdios so fundamentais para estabelecer
uma interface entre o meio intracelular e o extracelular, francamente hidrfilos.
As gorduras mais importantes (glicerdeos) so steres de cidos graxos (cidos com mais
de 12 carbonos na cadeia) com glicerina. Se a gordura for lquida temperatura ambiente
convencionalmente denominada leo. Os cidos que ocorrem mais frequentemente so o cido
palmtico, CH3(CH2)14COOH, o cido esterico, CH3(CH2)16COOH, e o cido olico,
CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH.
Sofrendo hidrlise, as gorduras produzem glicerina e sais alcalinos destes cidos graxos - so
os sabes. A ao do sabo est ligada s propriedades coloidais, em soluo aquosa, dos nions de
elevado peso molecular. Tais solues coloidais possuem a propriedade de provocar a formao de
emulses de outras substncias (graxa, gorduras, leo etc.).
1 - Teste da Solubilidade dos Lipdeos

Neste teste vamos identificar a presena de lipdios nas amostras. Para isso utilizamos algumas
substncias como ter, clorofrmio, gua, cido clordrico e hidrxido de sdio.
Sabendo que os lipdios so molculas apolares e conhecendo a lei de dissoluo "semelhante
dissolve semelhante", certamente as amostras que contm lipdios formaro solues de apenas uma
fase com as substncias apolares; e com as substncias polares solues onde observaremos mais de
uma fase.

Testando a Solubilidade da amostra que contm lipdio, temos:

ter / Clorofrmio
gua / cido clordrico / Hidrxido de sdio
Mtodo
Colocar 5 gotas da amostra em cada um de 3 tubos de ensaio. Acrescentar 2 ml dos seguintes
solventes: no primeiro, gua (H2O), no segundo, ter etlico (H3C-CH2-O-CH2-CH3) e no terceiro,
hidrxido de sdio (NaOH) 0,1N. Agitar e observar a solubilidade da amostra nos respectivos
solventes.

2 - ndice de Saponificao
O ndice de saponificao de um leo ou gordura definido como o nmero de
miligramas de hidrxido de potssio necessrio para neutralizar os cidos graxos resultantes
da hidrlise completa de 1g de amostra. Durante a saponificao, formado sabo de acordo
com a reao:
O ndice de saponificao uma indicao da quantidade relativa de cidos graxos de alto e
baixo peso molecular. Os steres de cidos graxos de baixo peso molecular requerem mais lcali
para a saponificao, portanto o ndice de saponificao inversamente proporcional ao peso
molecular dos cidos graxo presentes nos trialcilgliceris. Isto acontece porque, num mesmo peso
de amostra, a quantidade de grupos carboxlicos ser maior em trialcilgliceris com cidos graxos
de baixo peso molecular, e, conseqentemente, o consumo de KOH ser maior (maior I.S.) e viceversa.
O teste da saponificao identifica a presena de cido graxo. Para isso colocamos a
amostra na presena de uma base como KOH (Hidrxido de Potssio) ou NaOH (Hidrxido de
Sdio).

Reao de Saponificao

O composto 4 uma molcula anfiptica, com uma "cabea" polar (COO- K+) e uma cauda apolar
formada pelo radical "R". Quando em meio aquoso, molculas anfipticas tendem a se agrupar
formando estruturas esferides, as micelas. Este o princpio da limpeza de gorduras produzida
pelo sabo.
Mtodo:
Colocar num erlenmeyer cerca de 4ml de leo de cozinha e adicionar 10ml de soluo alcolica de
hidrxido de potssio (KOH) a 10%. Aquecer CAUTELOSAMENTE sobre tela de amianto e
manter em ebulio at evaporar o lquido.
Utilizaremos dois tubos de ensaio para os experimentos:
a) Tubo 1 Pegar um pouco do sabo de potssio obtido inicialmente e em seguida
acrescentar 3ml de gua e agitar e observar.
b) Tubo 2 - Pegar um pouco do sabo de potssio obtido inicialmente e em seguida
acrescentar 3ml de gua, agitar e observar.
Observar os resultados.

Anotaes__________________________________________________________________
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3 - Teste do Iodo
Este teste identifica a presena de cido graxo insaturado. Ocorre uma reao de halogenao, em
que o iodo reage com as duplas ligaes do cido graxo insaturado.

Se houver dupla ligao, o iodo ser consumido e a colorao caracterstica da soluo de iodo
diminuir de intensidade.
Mtodo:
Colocar num tubo de ensaio 1 ml da amostra, adicionar 3 gotas de lugol e aquecer direto na chama
CAUTELOSAMENTE.
Observar a mudana de colorao do sistema.

Anotaes__________________________________________________________________
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___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
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_____________________________________________________________

AULA 8
CARBOIDRATOS
Carboidratos, carbohidratos, hidratos de carbono, glicdios, glcidos, glucdeos, glcidos, glcides
ou acares so substncias, sintetizadas pelos organismos vivos, de funo mista polilcoolaldedo ou polilcool-cetona.
Amido
O amido, tambm conhecido como amilo, um polissacardeo com cerca de 1.400 resduos de
glicose. Funciona como substncia de reserva para muitas plantas, entre as quais a mais conhecida
a batata
O gro de amido uma mistura de dois polissacardeos: amilose e amilopectina.
Amilose: Macromolcula constituida de 250 a 300 resduos de D-glicopiranose, ligadas por pontes
glicosdicas -1,4, que conferem a molcula uma estrutura helicoidal.
Amilopectina:

Macromolcula,

menos

hidrossolvel

que

amilose,

constituda

de

aproximadamente 1400 resduos de -glicose ligadas por pontes glicosidicas -1,4, ocorrendo
tambem ligaes -1,6. A amilopectina constitui, aproximadamente, 80% dos polissacardeos
existentes no gro de amido.
Hidrlise
Na digesto o amido decomposto por reaes de hidrlise em carboidratos menores. Essa
hidrlise efetuada pelas enzimas amilases existentes na saliva e suco pancretico.

A enzima -amilase ( -1,4-glicano hidrolase ) rompe as ligaes glicosdicas -1,4 da

amilose originando uma mistura de maltose, arnilopectina e glicose. Rompe tambm as
ligaes -1,4 da amilopectina originando uma mistura de polissacardeos denominadas
destrinas.

A enzima -amilase ( -1,4-glicano maltohidralase ) rompe as ligaes -1,4 dos

polissacardeos resultantes da hidrlise da amilopectina, originando maltose pura.

Funes dos Carboidratos

Energtica: so os principais produtores de energia sob a forma de ATP, cujas ligaes ricas em
energia (10 Kcal) so quebradas sempre que as clulas precisam de energia para as reaes
bioqumicas. a principal funo dos carboidratos, com todos os seres vivos (com exceo dos
vrus) possuindo metabolismo adaptado ao consumo de glicose como substrato energtico. Algumas
bactrias consumem dissacardeos (p.ex.: a lactose) na ausncia de glicose, porm a maioria dos
seres vivos a utiliza como principal fonte energtica.
Estrutural: a parede celular dos vegetais constituda por um carboidrato polimerizado - a
celulose; a carapaa dos insetos contm quitina, um polmero que d resistncia extrema ao exoesqueleto; as clulas animais possuem uma srie de carboidratos circundando a membrana
plasmtica que do especificidade celular, estimulando a permanncia agregada das clulas de um
tecido - o glicoclix.
Reserva Energtica: nos vegetais, h o amido, polmero de glicose; nos animais, h o glicognio,
tambm polmero de glicose, porm com uma estrutura mais compacta e ramificada.
Reaes de caracterizao dos carboidratos
Reativos
Soluo de cido Sulfrico concentrado
Reativo de Molisch
- naftol..........................................5g.
lcool etlico............................100 ml.
Soluo de Lugol
Iodo................................................5g

Iodeto de potssio.........................10g.
gua destilada.........................100 ml.
Soluo saturada de sulfato de amnio.
lcool etlico absoluto
Reativo de Benedict
Sulfato de cobre puro crist.......................................17,3g
Citrato sdico, puro crist..........................................173g
Carbonato de sdio anidro.......................................100g
gua destilada qsp..............................................1000 ml
Caracterizao do Carboidrato
Tcnica
1. Reao de Molisch
Colocar 1,0 mL da amostra a ser analisada em tubo de ensaio e acrescentar 5 gotas de soluo
alcolica de alfa-naftol a 5%. Homogeneizar. Adicionar, lentamente, pelas paredes do tubo 1,0 mL
de cido sulfrico concentrado.
Anotaes_______________________________________________________________________
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2. Identificao do amido- Lugol
Colocar em tubo de ensaio 2,0 mL da amostra a ser analisada. Acrescentar 3 gotas de lugol.
Aquecer o tubo no bico de bunsen. Observar. Resfriar em gua corrente. Observar.
Anotaes_______________________________________________________________________
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3. Reao de Benedict
Colocar em tubo de ensaio 2,0 mL do reagente de Benedict e 8 gotas da amostra a ser analisada.
Ferver durante 2 minutos.
Anotaes_______________________________________________________________________
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RELATRIO- AULA 8- Nome____________________________________________________

Ttulo:__________________________________________________________________________
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Objetivos:________________________________________________________________________
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Introduo:_______________________________________________________________________
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Materiais:________________________________________________________________________
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Procedimento:____________________________________________________________________
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Concluso:____________________________________________________________________
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Referncias:______________________________________________________________________
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AULA 9
CARBOIDRATOS: HIDRLISE ENZIMTICA DO AMIDO
Chamamos de enzimas as protenas complexas (heteroprotenas ou protenas derivadas) que atuam
como catalisadores nos processos biolgicos.
Catlise pela alfa-amilase (saliva)- o amido quebrado na ligao alfa(1->4). A amilopectina, que
tem ligao alfa(1->6), quebrada em oligossacardeos resistentes ao da enzima.
A atividade da enzima observada pela diminuio da intensidade da colorao pelo iodo e pelo
aumento do poder redutor das substncias formadas (glicose).
Elas so compostos facilmente destrudos pelo calor (temperatura acima de 70C), por agitao
intensa, por ondas ultravioleta e ultra-sonoras, por substncias como o cianeto de sdio, o fluoreto
de sdio, traos de metais pesados, cidos ou bases, etc.
Reagentes
Soluo de amido
Soluo de Lugol
Reativo de Benedict
Saliva 10% (coletada pelos alunos)
Tcnica
1. Colocar 5 ml de soluo de amido em um tubo de ensaio e leva-lo a um banho-maria. Deixar 10
minutos para homogeneizar a temperatura.
2.

Adicionar 0,2 ml de saliva a 10%, misturar e, imediatamente, transferir 1 ml da mistura

para dois tubos de ensaio (0,5 ml em cada um) afim de executar o teste de iodo para o
amido e de Benedict para aucares redutores. Esse o tempo 0.

Teste de iodo: 0,5 ml da amostra + 3 gotas de lugol

Colocar em tubo de ensaio 2,0 mL do reagente de Benedict e 0,5 ml da amostra.

Ferver durante 2 minutos, notando a mudana de cor e a formao de precipitado vermelho de

xido cuproso.
3. Imediatamente aps a retirada da alquota do tempo 0, voltar o frasco para o banho-maria e
retirar alquotas de 1 ml para os testes de iodo e de Benedict nos tempos de 5, 10 e 15
minutos.
Temp.

Reaes

Tempo 0

5 minutos

15minutos

Iodo
Hidrlise
Enzimtica

37 C
Benedict

RELATRIO- AULA 9- Nome____________________________________________________

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Objetivos:________________________________________________________________________
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Introduo:_______________________________________________________________________
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Materiais:________________________________________________________________________
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Procedimento:____________________________________________________________________
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Referncias:______________________________________________________________________
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RELATRIO- AULA 10 Nome___________________________________________________

Ttulo:__________________________________________________________________________
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Objetivos:________________________________________________________________________
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Introduo:_______________________________________________________________________
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Materiais:________________________________________________________________________
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Procedimento:____________________________________________________________________
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Referncias:______________________________________________________________________
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AULA 11
BALANA ANALTICA e MOLARIDADE
1. Cuidados bsicos
g) Verificar sempre o nivelamento da balana.

h) Deixar sempre a balana conectada tomada e ligada para manter o equilbrio trmico dos
circuitos eletrnicos.

i) Deixar sempre a balana no modo stand by, evitando a necessidade de novo tempo de
aquecimento (warm up).
2. O frasco de pesagem

j) Usar sempre o menor frasco de pesagem possvel (pode-se utilizar papel manteiga ou
alumnio).
k) No usar frascos plsticos, quando a umidade estiver abaixo de 30-40%.
l)

A temperatura do frasco de pesagem e seu contedo devem estar mesma temperatura que
a do ambiente da cmara de pesagem.

m) Nunca tocar os frascos diretamente com os dedos ao coloc-los ou retir-los da cmara de

pesagem.
3. O prato de pesagem

k) Colocar o frasco de pesagem sempre no centro do prato de pesagem.

l) Remover o frasco de pesagem do prato de pesagem to logo termine a operao de

pesagem.
4. A leitura

m) Verificar se o mostrador indica exatamente zero ao iniciar a operao. Tare a balana, se for
preciso.

n) Ler o resultado da operao to logo o detetor automtico de estabilidade desaparea do

mostrador.
5. Calibrao

o) Calibrar a balana regularmente, principalmente se ela estiver sendo operada pela primeira
vez, se tiver sido mudada de local, aps qualquer nivelamento e aps grandes variaes de
temperatura ou de presso atmosfrica.
6. Manuteno

p) Manter sempre a cmara de pesagem e o prato de pesagem limpos.

q) Usar somente frascos e papeis para pesagem limpos e secos.

MOLARIDADE
Molaridade ou concentrao molar a relao entre o nmero de moles do soluto e o volume da
soluo, em litros.
Um mol de qualquer substncia contm 6.02 x 10 23 (nmero de Avogadro) unidades qumicas
elementares (por exemplo, molculas). muito conveniente medir concentraes em moles j que
as reaes se ajustam lei de propores definidas.
Concentrao em Mol/l ou Molaridade M o quociente do nmero de mols do soluto pelo volume
da soluo (em

).

Como calcular a massa de uma substncia: exemplo o NaOH

Com a tabela peridica em mos calculamos a massa, em gramas, de um mol de hidrxido de sdio:
(23+16+1=40).
Como 1 mol tem massa igual a 40 gramas, se diluirmos em 1 litro de gua teremos uma soluo de1
Mol ou 1 Molar de NaOH.

Resumindo, MOLARIDADE ou concentrao molar, a quantidade de matria (SOLUTO), em

moles, por volume de SOLUO, em litros.

Experimento: Preparo de Soluo

1. Aprender a efetuar clculos de molaridade, utilizar a Balana Analtica e vidraria adequada para
o preparo de uma soluo.
Preparar 100 ml das solues:
Na2HPO4 0,2M
KH2PO4 0,2M
Procedimento:
1. Efetuar os clculos necessrios. Pesar o sal em balana e transferir para o Becker de vidro.
2. Diluir o material com a metade do volume total de gua destilada (lavar o papel para retirar todo
sal) em Becker de vidro.
3. Homogeneizar com o basto de vidro at o sal ficar totalmente diludo.
4. Com auxlio de um funil e basto, verter a soluo para o balo volumtrico.
5. Adicionar um pouco mais de solvente ao Becker de vidro para lavar o funil e basto, transferir ao
balo volumtrico.
6. Completar at ao trao, primeiro com a pisseta e depois com conta-gotas.
8. Tapar e homogeneizar a soluo invertendo vrias vezes o balo de diluio.
9. Transferir para o frasco de soluo estoque com o auxlio do funil e do basto de vidro.
10. Identificar o frasco com o nome da soluo, a molaridade e a data que foi realizado.
Anotar aqui o material necessrio para se preparar uma soluo:

Vidrarias

Reagentes

Outros

Clculos:________________________________________________________________________
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RELATRIO- AULA 11 Nome___________________________________________________

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Objetivos:________________________________________________________________________
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Introduo:_______________________________________________________________________
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Materiais:________________________________________________________________________
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Procedimento:____________________________________________________________________
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Concluso:____________________________________________________________________
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Referncias:______________________________________________________________________
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AULA 12
CIDOS E BASES
1- A teoria de Brnsted-Lowry
Os conceitos clssicos de cido e base foram dados por Arrhenius, em 1884. Segundo ele,
cidos so substncias capazes de liberar ons H + quando em soluo aquosa, e bases so
substncias capazes de liberar ons OH-, tambm em soluo aquosa. Quando foram observadas
determinadas reaes em solues no aquosas, os qumicos sentiram uma necessidade de ampliar
os conceitos clssicos. Surgiram ento novos conceitos, baseados nas estruturas moleculares e
eletrnicas das substncias.
Observando que todos os cidos de Arrhenius continham hidrognios ionizveis, J. N.
Brnsted e T. M. Lowry propuseram, independentemente que:

cido - toda espcie qumica capaz de ceder prtons.

Base - toda espcie qumica capaz de receber prtons.

Exemplos:

HCl + H2O
NH3 + H2O

H3O+ + ClNH4+ + OH-

Como os cidos se ionizam em ons hidrognio (H+) e as bases em ons hidrxido (OH-),
conclui-se que quanto mais ons hidrognio em uma soluo, mais cidos ela . Alternativamente,
quanto mais ons hidrxido em uma soluo, mais bsicos (alcalina) ela . O termo pH usado para
descrever o grau de acidez ou alcalinidade (basicidade) de uma soluo. A acidez ou a alcalinidade
de uma soluo expressa em uma escala de pH que vai de 0 a 14.
ESCALA DE pH
Em pH 7 (neutralidade), as concentraes de H+ e OH- so iguais. Um valor de pH acima de 7
indica uma soluo alcalina (bsica). Uma mudana de uma unidade na escala de pH representa
uma mudana de 10 vezes da concentrao anterior.
A escala de pH baseada no nmero de H+ em uma soluo (expressam em cenas unidades
qumicas chamadas de moles por litro). Uma soluo com valor O na escala de pH tem muitos H+ e
poucos OH-. Uma soluo com pH 14, em contraste, tem muitos OH- e poucos H+. O ponto central
7, onde as concentraes de H+ e OH- so iguais. Uma soluo com pH 7, por exemplo, a gua
pura, neutra. Uma soluo com mais H+ que OH-, cida e tem pH abaixo de 7. Uma soluo
com mais OH- que H+, bsica (alcalina) e tem um pH acima de 7. Uma mudana de uma unidade
inteira na escala de pH representa uma mudana de 10 vezes em relao concentrao anterior.
Isto significa que, um pH 2, 10 vezes mais cido que um pH 3, e que um pH 1 100 vezes mais
cido que um pH 3.

Indicadores de pH
So substncias que possuem a propriedade de mudar de cor em funo da concentrao de ons
H+. Portanto a tabela mostra o comportamento dos cidos e bases em presena de alguns
indicadores.
INDICADOR
Fenofitalena
Metilorange
Tornassol
Experimento:
Medir o pH de diversas solues

COR EM MEIO CIDO

Incolor
Vermelho
Vermelho

COR EM MEIO BSICO

Vermelho
Amarelo
Azul

Soluo
A
B
C
D
E

pH

cido ou Base

Material

MUITO IMPORTANTE ATENO!!!!!!

NUNCA SE DEVE ADICIONAR GUA A UM CIDO CONCENTRADO, poder ocorrer
uma exploso com a conseqente projeo de cido concentrado.
Adicionar antes o cido gua, lentamente deslizando pela parede do recipiente e com agitao
constante.
A dissoluo de cidos concentrados um processo bastante exotrmico.
RELATRIO- AULA 12 Nome___________________________________________________
Ttulo:__________________________________________________________________________
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Objetivos:________________________________________________________________________
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Introduo:_______________________________________________________________________
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Materiais:________________________________________________________________________
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Procedimento:____________________________________________________________________
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Concluso:____________________________________________________________________
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Referncias:______________________________________________________________________
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AULA 13
SOLUO TAMPO
Uma soluo tampo mantm o pH aproximadamente constante quando a ela so adicionados ons
H+ ou ons OH.
O metabolismo celular produz cidos que so lanados, continuamente, nos lquidos intracelular e
extracelular e tendem a modificar a concentrao dos ons hidrognio. A manuteno da
concentrao dos ons hidrognio dentro da faixa tima para o metabolismo celular depende da
eliminao do cido carbnico nos pulmes, da eliminao de ons hidrognio pelos rins e da ao
dos sistemas tampo intra e extracelulares.
O modo como o organismo regula a concentrao dos ons hidrognio (H+) de fundamental
importncia para a compreenso e a avaliao das alteraes do equilbrio entre os cidos e as bases
no interior das clulas, no meio lquido que as cerca (lquido intersticial) e no sangue (lquido
intravascular).
As solues tampo tm grande importncia biolgica. Exemplos: HCO3/H2CO3 e HPO42-/H2PO4,
responsveis pela manuteno do pH do sangue.
Seus fluidos corporais devem manter um equilbrio constante de cidos e bases pelo fato de as
reaes bioqumicas que ocorrem em sistemas vivos serem extremamente sensveis mesmo a

pequenas alteraes de acidez ou alcalinidade do meio. Qualquer modificao nas concentraes

normais de H+ e OH- pode afetar seriamente uma funo de uma clula.
Experimento:
Preparo de soluo Tampo pH 7,4. Utilizao do pHmetro
Colocar 80 ml da soluo de Na2HPO4 0,2 M em um becker e medir o pH.
Acrescentar cuidadosamente KHPO4 0,2 M at atingir o pH 7.4
Anotar o volume necessrio para obter o pH timo
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Acrescentar estas perguntas ao relatrio:
3. Qual a diferena na utilizao das fitas indicadoras de pH e o pHmetro?

4. Faa um esquema de uma escala de pH com seus valores correspondentes

RELATRIO- AULA 13 Nome____________________________________________________
Ttulo:__________________________________________________________________________
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Objetivos:________________________________________________________________________
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Introduo:_______________________________________________________________________
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Materiais:________________________________________________________________________
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Procedimento:____________________________________________________________________
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Concluso:_______________________________________________________________
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Referncias:______________________________________________________________________
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AULA 14
TITULAO

Titulometria- A titulao consiste na determinao do volume necessrio de uma soluo padro,

para reagir com um volume de uma soluo problema.
Acidimetria a determinao da dosagem de um cido, empregando uma soluo padronizada de
uma base.
Alcalimetria a determinao da dosagem de uma soluo padronizada de um cido.
Quando se adicionam nmeros iguais de equivalentes-grama de base e de cido, a soluo mudar
de cor em funo da presena de um indicador cido-base. Essa mudana de cor indica o ponto final
da titulao e chamado de ponto de viragem ou ponto de equivalncia. (V1 . N2 = V2 . N2)
Conhecendo a proporo em que reagem as substncias e tendo determinado a quantidade de uma
substncia (o reativo titulado) necessria para reagir nesta proporo, pode-se calcular facilmente a
quantidade desconhecida de substncia presente no frasco da reao.

MATERIAL:
- Bureta de 50 mL.
- Garra de bureta.
- Suporte universal.
- Funil.
- Pisseta.
- Erlenmeyer de 250 mL.
- Indicador de pH- Fenoftalena
- Soluo de hidrxido de sdio de sdio 0,5 M (NaOH).
- Suporte universal.
- Soluo de cido clordrico (HCl). Concentrao desconhecida

Anotaes__________________________________________________________________
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RELATRIO- AULA 14 Nome___________________________________________________
Ttulo:__________________________________________________________________________
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Objetivos:________________________________________________________________________
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Introduo:_______________________________________________________________________
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Materiais:________________________________________________________________________
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Procedimento:____________________________________________________________________
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Concluso:_______________________________________________________________
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Referncias:______________________________________________________________________
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AULAS COMPLEMENTARES
I. FOTOMETRIA (FOTOCOLORIMETRIA E ESPECTROFOTOMETRIA)
Os mtodos espectroscpicos baseiam-se na absoro e/ou emisso de radiao electromagntica
por muitas molculas, quando os seus electres se movimentam entre nveis energticos. A
espectrofotometria baseia-se na absoro da radiao nos comprimentos de onda entre o
ultravioleta e o infravermelho.
A chamada radiao luminosa corresponde a uma gama de comprimentos de onda que vai desde o
ultravioleta ao infravermelho no espectro da radiao electromagntica.

O espectro do visvel est contido essencialmente na zona entre 400 e 800 nm.
Tabela: Comprimentos de onda da luz visvel.
Cor
violeta

Comprimento de onda
(nm)
390 - 455

azul

455 - 492

verde

492 - 577

amarelo

577 - 597

laranja

597 - 622

vermelho

622 - 780

Um espectrofotmetro um aparelho que faz passar um feixe de luz monocromtica atravs

de uma soluo, e mede a quantidade de luz que foi absorvida por essa soluo. Usando um
prisma o aparelho separa a luz em feixes com diferentes comprimentos de onda (tal como
acontece no arco-ris com a separao das cores da luz branca). Pode-se assim fazer passar
atravs da amostra um feixe de luz monocromtica (de um nico comprimento de onda, ou
quase). O espectrofotmetro permite-nos saber que quantidade de luz absorvida a cada
comprimento de onda.

Fig. Espectrofotmetro. A luz dividida em feixes de diferentes comprimentos de onda por meio
de um prisma ptico e passa atravs da amostra, contida numa cuvette ou clula de
espectrofotmetro.

II. PROCEDIMENTO PARA O PREPARO DE UMA SOLUO

A. Tomar conhecimento dos perigos potenciais das substncias

utilizadas de modo a reduzir a possibilidade de contaminaes ou
acidentes.
B. Decidir qual o volume de soluo a preparar.
C. Efetuar os clculos necessrios.
Mtodo
1. Todo o material deve estar seco.
2. Separar uma esptula e o recipiente em que ser pesado o material.
3. Medir a massa de soluto necessria.
4. Transferir o soluto para um becker de vidro lavando o recipiente de
pesagem com solvente de modo a arrastar todo o soluto.
5. Dissolver todo o soluto utilizando apenas uma parte do solvente
agitando com um basto de vidro.
6. Verter a soluo para o balo volumtrico, com auxlio de um funil,
lavando o copo, o basto de vidro e o funil com solvente para arrastar
todo o soluto.
7. Completar at ao trao, primeiro com a pisceta e depois com contagotas.
8. Tapar e homogeneizar a soluo invertendo vrias vezes o balo de
diluio.