VALTEK S.A.

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Amikacina (AK) 30 mcg.

SENSIDISCOS DE AMIKACINA PARA PRUEBA DEL ANTIBIOGRAMA
Para uso en el diagnstico in vitro, Vial conteniendo 200 discos. Cd. 400-100 Vial conteniendo 50 discos. Cd. 400-100b Dispensador conteniendo 50 discos. Cd. 400-100c INTRODUCCION Se pueden usar una serie de tcnicas para determinar la susceptibilidad in vitro de las bacterias a los agentes antimicrobianos. En la mayora de los laboratorios clnicos, se utiliza de rutina el mtodo de la difusin en agar, para las bacterias comunes de desarrollo rpido. El mtodo estndar recomendado comnmente por el CLSI (1) est basado en la tcnica descrita por Bauer et al. (2). De todos los medios disponibles el agar elegido para realizar este mtodo. REACTIVOS Frasco vial con 50 discos de celulosa impregnados con Amikacina (AK) 30 mcg. Frasco vial con 200 sensidiscos, Dispensador con 50 sensidiscos. Reactivos listos para su uso. CONSERVACION Los sensidiscos se deben mantener en refrigeracin (2 a 8C o congelados bajo -14C, hasta su uso), y stos son estables hasta la fecha de vencimiento indicada en el rtulo del envase. MUESTRAS Todo espcimen biolgico que presente una infeccin bacteriana TECNICA 1. Seleccionar al menos cuatro a cinco colonias aisladas del mismo tipo morfolgico desde el agar de la placa de cultivo. Traspasar las colonias a un tubo que contenga cuatro a cinco mililitros (ml) de caldo de cultivo apropiado, tal como el caldo de soya casena. Incubar el cultivo a 35C hasta que alcance o exceda la turbidez del estndar McFarland N 0.5 (DO a 625 nm debera ser 0.08 a 0.10). Sembrar la superficie seca de la placa de agar MuellerHinton con una trula estril con el cultivo recin preparado en el paso anterior a travs de toda la superficie en tres direcciones, previo haber eliminado el exceso de caldo presionando y rotando la trula en las paredes del tubo, sobre el nivel del caldo. Volver a tapar la placa y esperar unos 3 a 5 minutos (no ms de 15 minutos).para que se absorba cualquier exceso de humedad antes de aplicar los sensidiscos. Colocar los sensidiscos con pinzas estriles, en la superficie del agar inoculado, presionar levemente cada disco para asegurar un completo contacto con la superficie del agar. Como algunos de los antimicrobianos difunden casi instantneamente, no se debe mover un disco una vez que ste ha hecho contacto con el agar. Mueller-Hinton fue 9. 7. 8. Invertir la placa e incubar a 35 C despus de 15 minutos de haber aplicado los discos. Examinar las placas transcurridas de 16 a 18 hrs. de incubacin y medir los dimetros de los halos de las zonas de inhibicin (20 a 24 hrs. para N.gonorrhoeae o para Sthaphylococos Meticilina -resistentes). Comparar el tamao de las zonas medidas con: Resistente 14 mm, Susceptible 17 mm

CRITERIO DE DESEMPEO Halos de inhibicin de acuerdo a las especificaciones CLSI. MATERIALES ADICIONALES NO SUMINISTRADOS Se requiere de estufa de cultivo, pinzas, placa de Petri con agar Muller Hinton, mechero de Bunsen y trula estril. LIMITACIONES DEL METODO Microorganismos de lento desarrollo, anaerobios estrictos y capnphilos no se les aplica este mtodo. S. Aureus Meticilina-resistente presentan problemas, estas cepas parecen tener una resistencia clnica aumentada a las penicilinas y cefalosporinas, aunque parezcan ser susceptibles in vitro. PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS Discos conteniendo compuestos B-lactmicos, deben mantenerse siempre congelados para asegurar la mantencin de su potencia, se puede mantener una cantidad en uso entre 2 a 8 C durante una semana. No afecta su desempeo si son mantenidos a menos de 0C. Sacar el frasco vial del refrigerador 1 a 2 hrs. antes de ser usado y permitir que alcance la temperatura ambiente antes de ser abierto. Utilizar placas con agar Mueller Hinton excento de azufre, de un espesor de 4 mm en la placa, preparadas en una superficie nivelada. Se recomienda realizar controles de calidad peridicos. CONTROL DE CALIDAD Cada Lote de sensidiscos se controla con Cepas Estndares ATCC segn su espectro con la tcnica de Bauer et al. y se comparan los halos obtenidos con los descritos por CLSI. E.coli ATCC 25922 : 19-26 mm, S.aureus ATCC 25923 : 20-26 mm, Ps. Aeruginosa ATCC 27853 : 18-26 mm. REFERENCIAS 1. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1993 December, NCCLS Document Vol. 13 N 24, Villanova, PA. 2. Bauer, A.W., W.M.M. Kirby, J.C. Sherris, and Turck. 1966. Antibiotic Susceptibility Testing by a Standardized Single Disk Method. Am.J.Clin.Pathol. 45:493-496.

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