UNIVERSIDADE ESTADUAL DO MARANHO CENTRO DE CIENCIAS AGRRIAS CURSO DE AGRONOMIA DISCIPLINA: MELHORAMENTO GENTICO VEGETAL

RESUMO MELHORAMENTO DE PLANTAS AUTGAMAS

Ana Leticia Rocha Monteiro - 0831240

So Luis 2012

A seleo a escolha de plantas de uma populao heterognea visando constituir a gerao seguinte. No processo de seleo so utilizadas todas as plantas que apresentam caractersticas desejveis para estudar a capacidade produtiva e ser adotada como cultivar aquela de desempenho reconhecidamente superior as demais existentes. Considerando a definio de seleo, a mesma no cria variabilidade gentica, ao contrrio, a restringe. A seleo apenas isola gentipos possuidores de caractersticas vantajosas, plantas estas j existentes na populao heterognea. Previamente ao estudo da metodologia, devemos discutir dois aspectos intimamente relacionados a seleo de plantas, que so o princpio da linha pura, que consiste uma linha pura na prognie de um indivduo homozigoto autofecundado. Cada linhagem, sendo uma linha pura teve, tanto para a descendncia de uma semente leve como para a de uma semente pesada, mdias semelhantes, demonstrando ser a variao dentro de uma linha pura apenas fenotpica, ou seja, devido a diferenas ambientais, e o outro principio Bases genticas das linhas puras, que ficou demonstrado que o componente gentico da varincia era devido a homozigose, como resultado de sucessivas geraes de autofecundao, que caracteriza as linhagens. O surgimento da homozigose o resultado da autofecundao continuada que reduz em 50% a heterozigose a cada gerao e que somente algumas geraes de autofecundao so necessrias para se chegar a uma populao com igual nmero de indivduos homozigticos (AA e aa), com uma proporo desprezvel de indivduos heterozigticos (Aa). A reduo da heterozigose manifesta-se em qualquer par de genes em heterozigose, independente do nmero total de genes da planta. Isso ocorre pelo fato de que os pares de genes heterozigotos (Aa) segregam produzindo metade de seus descendentes heterozigotos e metade homozigotos. Os Mtodos de seleo de plantas individuais, uma vez certificada a presena de variabilidade gentica em uma populao de plantas autgamas, a seleo pode ser praticada por dois mtodos, pela Seleo de plantas individuais sem teste de prognie ou seleo massal --- mtodo de seleo de plantas individuais sem teste de prognie (sem a avaliao da descendncia das plantas selecionadas), de procedimento simples, consiste basicamente na escolha de plantas que sero trilhadas e misturadas suas sementes sem a individualizao das prognies. Guarda este mtodo o inconveniente de no permitir a eliminao dos descendentes das plantas selecionadas pelo fentipo superior. Deve, portanto, ser empregado apenas nos casos em que a seleo dirigida a caractersticas pouco influenciadas pelo ambiente, ou seja, com alta herdabilidade, como a presena ou ausncia de aristas e a cor de flor, por exemplo.

Quanto ao tamanho da populao alvo de seleo, convm ser constituda de milhares de plantas a fim de ter-se boa representatividade. Relativo ao nmero de indivduos a serem selecionados, deve ser considerado que a seleo de poucas plantas pode comprometer a adaptao da nova cultivar, pelo risco de que venha a se muito diferente da cultivar original. Por outro lado, a seleo de um nmero exageradamente grande de plantas da populao original reduz em muito a possibilidade de melhoramento, fazendo com que, neste caso, a populao selecionada se torne muito similar populao original. Uma nova cultivar obtida por seleo de um nmero suficientemente grande de plantas de um cultivar heterogneo dever apresentar adaptao e produtividade semelhantes as da populao original, beneficiando-se da eliminao dos tipos menos adaptados e defeituosos, podendo inclusive dispensar a necessidade de ensaios comparativos de adaptao, imprescindveis para cultivares obtidos por outros mtodos. Numa etapa seguinte, o material selecionado pode sofrer selees, at que a variabilidade gentica seja esgotada, selecionando um nmero tal de indivduos para formar uma nova populao e igual tamanho. Outra utilidade do mtodo de seleo sem teste de prognie e possivelmente a mais importante, consiste na possibilidade de manuteno de cultivares que se tornaram impuras pelo cultivo continuado. Importante atentar para que a manuteno de um nmero relativamente pequeno de plantas dever alterar o comportamento da cultivar, comprometendo sua identidade e adaptao.E pelo mtodo Seleo de plantas individuais com teste de prognie --- por este mtodo, so selecionadas plantas na populao original sendo, na gerao seguinte, cada planta selecionada mantida numa parcela individual. Este procedimento permite a eliminao dos descendentes de indivduos que, equivocamente se tenham mostrado, na populao original, como vantajosos. Em princpio, apenas indivduos geneticamente superiores produzem prognies superiores. Eventualmente podero ser procedidas novas selees nas prognies que mostrarem variabilidade. Estas selees, entretanto tendem a ser pouco eficientes visto que as parcelas com a prognie de cada planta constitui uma linhagem onde a variabilidade evidenciada apenas fenotpica. A principal seleo ser feita entre prognies, com eliminao daquelas que se mostrarem inferiores. Cada prognie selecionada constituir uma linhagem e estas devero ser comparadas entre si e em relao s testemunhas. Quando conveniente, linhagens de tipo agronmico semelhantes podero ser reunidas, proporcionando cultivares com maior variabilidade gentica e maior capacidade adaptativa como conseqncia. Hibridao em plantas autgamas ocorre a medida que a variabilidade vai sendo esgotada pelo contnuo

processo de seleo, torna-se necessria a produo de novas populaes com variabilidade gentica compatvel com os objetivos do programa de melhoramento. A hibridao, por permitir a recombinao de caractersticas encontradas em dois ou mais indivduos e a posterior segregao, constitui-se na forma mais freqentemente utilizada para a formao de populaes de alta variabilidade gentica em cultivos autgamos. O grau de variabilidade da nova populao est diretamente relacionado com a amplitude da base gentica envolvida no cruzamento. O desenvolvimento de novos cultivares por hibridao envolve quatro etapas: a) formao da populao segregante; b) sucessivas geraes de autofecundao at a populao atingir um adequado nvel de homozigose (conduo do material segregante at a obteno de linhagens); c)avaliao e seleo das linhagens superiores; d) multiplicao das sementes e distribuio aos agricultores. A primeira etapa de um programa de desenvolvimento de cultivares por hibridao a formao de populaes com alta variabilidade gentica para os caracteres e interesse. Para a formao destas populaes, necessrio discutir alguns aspectos que melhoram o entendimento. Sendo a autofecundao a forma natural de reproduo de plantas autgamas, para a execuo de cruzamento necessrio recorrer-se a procedimentos artificiais. A tcnica mais freqente utilizada consiste em inicialmente proceder-se a castrao ou emasculao, visando impedir a autofecundao, seguido de polinizao, na poca oportuna, usando plen da planta ou cultivar escolhida como genitor. Para cada espcie so utilizados procedimentos especficos de castrao, tais como a retirada das anteras com pinas, por suco a vcuo ou por esterilizao do plen com gua quente, em temperatura capaz de inviabiliz-lo sem danificar a parte feminina da flor. Na prtica, normalmente a emasculao realizada manualmente com o auxlio de pinas. Este trabalho tedioso, delicado e laborioso em razo das flores serem de tamanho, na maioria dos casos, reduzido, serem hermafroditas, perfeitas e de autopolinizao e apresentam ainda grande desuniformidade em relao a antese, fazendo com que outros procedimentos se tornem pouco eficazes. Outras possibilidades existem, como uso de gameticidas qumicos (Ethrel, por exemplo) ou a incorporao da condio de machoesterilidade gentica ou citoplasmtica, porm so mais comumente utilizados para facilitar a reduo de sementes hbridas. O conhecimento de fatos fundamentais relacionados com a morfologia da flor, fisiologia da iniciao floral, tempo de antese, longevidade do plen e o perodo de tempo em que o estigma se mantm receptivo, essencial para se obter hbridos artificiais em nmero adequado. O conhecimento do nmero de anteras, por exemplo, embora simples importante. Uma

nica antera inadvertidamente deixada na flor, aparentemente bem emasculada, pode poliniz-la impedindo a formao do hbrido. A emasculao deve ser processada em flores ainda no suficientemente maduras a ponto de liberarem naturalmente os gros de plen. No entanto, quanto mais jovem estiver a flor, mais sujeita ela estar a sofrer danos e ferimento durante o processo de emasculao. Muitas vezes, estes danos impedem que a fecundao se complete. Por outro lado, se o melhorista esperar at que as flores estejam quase maduras, ele pode acidentalmente causar a ruptura de uma antera e fazer com que ocorra a autopolinizao. Portanto, existe um estdio relativamente curto na maturao das flores que o mais favorvel para a emasculao. O perodo do dia durante o qual se processa a emasculao tambm um fator importante, capaz de influenciar a percentagem de sucesso da hibridao artificial. Isto est associado principalmente s condies de umidade e temperatura, pois as flores so muito sensveis a altas temperaturas e baixa umidade relativa do ar e, se e, emasculadas sob estas condies, iro secar e deixa de produzir semente, mesmo que a polinizao tenha se realizado com sucesso. Tipos de populaes formadas por cruzamentos --- as populaes heterogneas usadas para o desenvolvimento de novos cultivares compreende desde o cruzamento entre duas ou at vrios cultivares ou linhagens paternais. A populao formada pode ser utilizada diretamente de retrocruzamentos. Vrios sistemas de anotao de ascendncia de cruzamentos e linhagens tm sido desenvolvidos para o acompanhamento dos registros utilizados nos diferentes programas de melhoramento gentico. No momento, o que interessa discutir so os diferentes tipos e maneiras de cruzamentos possveis e indicados para cada situao, j que a simbologia de anotao varia muito com os programas de melhoramento gentico. O cruzamento simples o processo em que a cultivar ou linhagem cruzado com outro. Em alguns casos, linhagens segregantes podem ser usadas como genitores, participando de um cruzamento atravs de combinaes entre elas, ou como genitor masculino ou feminino. Cada cruzamento deve visar a obteno de linhagens que sejam melhores do que os cultivares existentes. Para alcanar esse objetivo, os genitores de cada cruzamento precisam ser analisados, atravs do conjunto completo de caractersticas agronmicas desejveis. Assim, na programao de cruzamentos simples, um genitor deve complementar o outro, ou seja, o genitor masculino deve possuir as boas caractersticas que esto faltando ao feminino e vice-versa. Cruzamentos duplos envolvem quatro genitores diferentes, geralmente trs desejveis e um menos desejvel, enquanto que o cruzamento triplo envolve trs genitores, dois dos quais desejveis.

Desta forma, a escolha entre cruzamento duplo e triplo pode depender do nmero de caractersticas eficientes a linhagem extica a ser complementada. Cruzamentos complexos ou sucessivos so cruzamentos que envolvem hbridos (descendncia de cruzamento) simples, triplos ou duplos, entre si, ou com outros materiais em qualquer etapa do processo de melhoramento. Quanto mais aparentadas forem os cultivares ou linhagens, diferindo em menor nmero de caractersticas, mais fcil a transferncia dos caracteres desejados de um genitor para outro. Assim, dispondo-se de um cultivar adaptado ao qual se pretenda melhorar, deve-se procurar as caractersticas desejadas em outro to semelhante quanto possvel. Neste caso, a presena de genes marcadores de extrema utilidade, pois servir para identificar com preciso, quais as plantas de descendncia que resultaram de cruzamento. As sementes obtidas dos cruzamentos artificiais originam uma populao F1constituda por plantas altamente heterozigotas e geneticamente idnticas sendo, portanto, bastante homognea e vigorosa. Pelo fato da homogeneidade da populao, qualquer seleo realizada nesta gerao ser ineficiente, exceto se um dos pais do cruzamento no for homozigoto ou se tiver ocorrido mutao espontnea. A variabilidade gentica associada a varincia no aditiva (dominante e/ou sobredominante) e a poro no aditiva da varincia episttica no podem ser utilizadas na seleo das linhagens, pois estas varincias vo se perdendo a cada gerao de autofecundao, a medida que a heterozigose vai sendo reduzida. A poro aditiva da varincia episttica, que no seria perdida, muito pequena comparada com a poro da varincia aditiva podendo,portanto, ser desprezada. A interao allica dominante prejudica a seleo das linhas homozigotas dominantes (homogneas) para um determinado carter, por no permitir sua distino dos heterozigotos. O vigor hbrido expressado nos indivduos heterozigotos tambm dificultam a seleo, pois estes indivduos ao serem autofecundados, segregaro originando linhagem homozigotas de desempenho inferior, como resultado da endogamia. Mtodo da populao --- por este mtodo as populaes nas geraes segregantes (F2, F3, F4 e F5) no sofrem seleo. As plantas so todas colhidas e uma amostra significativa de cada populao originar uma parcela na prxima gerao, visando exclusivamente avano de gerao e a conseqente conduo condio homozigota. Na gerao F6 semeada uma parcela com as sementes de cada cruzamento, espaadas o suficiente para permitir a seleo de plantas individuais. Cada planta selecionada originar uma parcela uniforme, sendo colhidas as melhores parcelas para constiturem novas linhagens. Retrocruzamento --constitui-se o mtodo numa forma de hibridao recorrente, pela qual caractersticas

superiores so incorporadas a uma cultivar bem adaptada. A tcnica relativamente simples consiste em cruzar uma cultivar ou linhagem com outro e retrocruzar os descendentes que evidenciam possuir o carter em transferncia com a cultivar carente, o qual chamada de genitor recorrente, sendo o outro, com o carter a ser transferido, denominada de genitor doador. O genitor recorrente deve ser uma cultivar bem adaptada a regio, altamente produtiva, que ocupe uma grande rea cultivada, porm deficiente para uma ou poucas caractersticas. O nmero de retrocruzamentos deve ser suficiente para recuperar a cultivar recorrente, podendo variar de dois ou trs, at cinco, dependendo do grau de semelhana existente entre as cultivares envolvidas. Este nmero de retrocruzamentos pode ser reduzido atravs da manuteno de populaes com maior nmero de plantas, sendo escolhidas para retrocruzar aquelas que, evidenciando possurem o carter em transferncia, mostrem-se mais semelhantes ao pai recorrente. Este procedimento pode reduzir 1 a 2 geraes de retrocruzamentos. Nas geraes segregantes de autofecundao, a heterozigose reduzida em 50% a cada gerao e a populao hbrida converge para duas linhagens homozigotas. No retrocruzamento, a homozigose obtida na mesma proporo da autofecundao, sendo, por isso, calculada pela mesma expresso. Portanto, no retrocruzamento a populao converge para uma nica linhagem homozigota, ao invs de duas como resultado da autofecundao. Desta forma, fica evidente que o retrocruzamento, mesmo na ausncia de seleo, constitui-se num poderoso mecanismo para atingir a homozigose e que qualquer populao obtida por retrocruzamento deve convergir rapidamente para o genitor recorrente. A maioria das cultivares de espcies autgamas so linhagens homozigotas, resultantes do contnuo processo de autofecundao. O cruzamento entre linhagens homozigotas promove, na maioria dos casos, a manifestao do vigor hbrido, que se expressa com o aumento da produtividade (ver item 3 da unidade III). O vigor hbrido expresso em cruzamentos envolvendo linhagens de espcies autgamas pode variar de 0 a mais de 100% em relao aos pais, situando-se na maioria dos casos entre 20 a 30%. A primeira dificuldade para a formao de hbridos de espcies autgamas decorre justamente de predominar nestas a autofecundao, exigindo a adoo de tcnicas capazes de promoverem a fecundao cruzada em alta escala. Cruzamentos manuais --- possveis de serem efetuados em quase todos os cultivos, so em geral antieconmicos para execuo em escala comercial, exceto em plantas olercolas como a berinjela, tomate e pimento, de sementes altamente valorizadas, nas quais uma nica polinizao origina um fruto com grande nmero de sementes (uma berinjela chega a

produzir cerca de 3.000 sementes).Machoesterilidade gentico citoplasmtica --- na maioria dos cultivos pesquisados tem-se encontrado uma condio citoplasmtica capaz de induzir a esterilidade masculina. Sabe-se que o citoplasma do zigoto deriva do gameta feminino, com insignificante contribuio do gameta masculino. Possuindo a planta me citoplasma para machoesterilidade, todos os descendentes herdam esta condio. Plantas com machoesterilidade citoplasmtica s produzem sementes quando polinizadas por plantas normais, conforme ilustrado a seguir. Gameticidas qumicos -- gameticidas qumicos so substncias capazes de promoverem a esterilizao masculina, sem afetar significativamente a fertilidade feminina. Os produtos mais utilizados para tal so: ethrel (cido 2-cloroetil fosfrico); hidrazida maleica; os RH 531, 532, 2956 e 4667, supressores qumicos de plen da Rohm and Haas; e metil arsenato de zinco (CH3As2Na), usados em arroz na China. As vantagens do uso de gameticidas qumicos sobre a machoesterilidade so as seguintes: a) simplificar os processos de melhoramento gentico por dispensar a introduo nos genitores do hbrido, dos fatores de machoesterilidade e de restaurao da fertilidade, permitindo qualquer linhagem ser esterilizada e usada como genitor feminino, sem a necessidade de identificar linhagens restauradoras; b) dispensar a manuteno da linhagem macho estril; c) reduzir o tempo necessrio para a formao de novos hbridos; e d) permitir ao agricultor cultivar a populao F2 colhida do hbrido, a qual no ir segregar para machoesterilidade. As pesquisas sobre a ao dos gameticidas qumicos ora disponveis apontam os seguintes inconvenientes: a) no asseguram machoesterilidade em 100% das plantas tratadas, variando o nvel de eficincia em funo das condies ambientais; b) os nveis de aplicao capazes de assegurar machoesterilidade com freqncia

induzem esterilidade feminina paralela, reduzindo a produo de sementes hbridas; e c) excessos de chuva ou vento podem impedir a aplicao do gameticida na poca apropriada. A taxa de cruzamento entre linhagens autgamas visando a produo de sementes hbridas de baixo custo varia segundo alguns fatores. O Hbito de florescimento --- o necessrio sincronismo no florescimento dos genitores do hbrido depende do perodo do dia em que ocorre o pique de florescimento, da durao deste perodo e do tempo que os estigmas permanecem receptivos. Estrutura floral --- entre as linhagens formadas dos hbridos existem diferenas de tamanho dos estigmas, comprimento do estilete, receptividade dos estigmas, tamanho das anteras e filamentos e o nmero de gros de plen por antera, sendo todos fatores influentes na taxa de cruzamento. Distncia de propagao --- o conhecimento da distncia de propagao do

plen assume grande importncia para determinar a relao mnima entre o nmero de fileiras do genitor masculino e do feminino, necessrias para a produo de grande quantidade de sementes hbridas. Tambm determinar o isolamento mnimo necessrio entre os campos de produo de sementes de diferentes cultivares, para que no ocorra a contaminao gentica. Produo de sementes hbridas atravs de cruzamentos manuais bastante simples, sendo necessrio, na poca apropriada, que seja executada a emasculao das flores do genitor feminino e a posterior colocao de plen oriundo do genitor masculino (cruzamento).