MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

Disciplina que utiliza los microorganismos, generalmente cultivados a gran escala, para obtener productos comerciales de valor o para realizar importantes transformaciones qumicas. Se origin con procesos de fermentacin alcohlica: fabricacin de vino y cerveza. Despus para producir farmacuticos, aditivos alimentarios, enzimas y compuestos qumicos como butanol y cido ctrico. Todos estos procesos industriales se basaban en la potenciacin de reacciones metablicas, con el fin, de aumentar la produccin.

1. Microorganismos y productos industriales

Los microorganismos industriales son seleccionados cuidadosamente para que produzcan uno o ms productos especficos Con el fin de lograr esta elevada especializacin, las cepas industriales, suelen estar alteradas genticamente, por mutacin o por recombinacin. Habitualmente se reprimen o se eliminan las vas metablicas menores y frecuentemente existe en ellas un desequilibrio metablico.

2. Origen de las cepas industriales

La fuente ltima de todas las cepas es el ambiente natural. Cuando se patenta un nuevo proceso industrial, al solicitante de la patente se le requiere para que deposite una cepa capaz de llevar a cabo el proceso, en una coleccin de cultivos reconocida. Hay varias colecciones de cultivos que actan de depositaras y suministradoras de cultivos microbianos

Bancos de cepas
Abreviatura ATCC CBS CCM CDDA Nombre American Type Culture Collection Centraalbureau voor Schimmekul turen Czechoslovak Collection of Mkroorganisms Canadian Department of Agricultura Localizacin Rockville, MD, Estados Unidos Baarn, Holanda J. E. Purkyne University, Brno, Repblica Checa

CMI
DSM FAT IAM NCIB NCTC NRRL PCC

Commonwealth Mycological Institute

Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH Faculty of Agriculture, Tokyo University Institute of Applied Microbiology Nationa l Collection of Industrial Bacteria National Collection of Type Cultures Northern Regional Research Laboratory Pasteur Culture Collection

Ottawa, Canad
Kew, Reino Unido Braunsweig, Alemania Tokyo, Japn Universidad de Tokyo, Japn Aberdeen, Escocia Londres, Reino Unido Peora, IL, Estados Unidos Pars, Francia

3. Mejora de cepas
El aislamiento del m.o. original la modifica en gran medida en el laboratorio. Ejm. en la produccin de penicilina, producida por el hongo Penicillium chrysogenum. Cuando se produjo por primera vez la penicilina a gran escala, se obtuvieron rendimientos de 1-10 g/ml. Como resultado de la mejora de las cepas, y cambios en el medio y en las condiciones de cultivo, el rendimiento de penicilina aument hasta 50.000 mg/ml.

4. Propiedades de un microorganismo industrial

Debe producir la sustancia de inters. Es preciso disponer del organismo en cultivo axnico (puro), debe ser genticamente estable. Debe ser posible mantener cultivos del organismo durante un perodo de tiempo largo en el laboratorio y en la planta. Debe crecer rpidamente y producir el compuesto deseado en un perodo de tiempo corto. Debe ser capaz de crecer en un medio de cultivo lquido y relativamente barato. Medios de cultivo a escala industrial, son por ejemplo, el licor de maz, el suero y otros materiales de desecho industriales.

5. Productos industriales
Clulas. Como la levadura para panadera. Sustancias producidas por clulas. Como: Enzimas: glucosa isomerasa Frmacos: antibiticos, esteroides y alcaloides Aditivos alimentarios: yogurt. Productos qumicos: etanol, acido ctrico, acido actico

6. Crecimiento y sntesis del producto en procesos industriales

Etapas: fase de latencia, fase logartmica y fase estacionaria. Dos tipos fundamentales de productos metablicos: primarios y secundarios. Un metabolito primario es el que se forma durante la fase primaria del crecimiento del microorganismo Un metabolito secundario es el que se forma cerca del final de la fase de crecimiento, frecuentemente cerca de, o en la fase estacionaria del crecimiento

Metabolitos primarios microbianos

Un metabolito primario tpico, es el etanol. El crecimiento slo puede tener lugar si puede producirse energa, la formacin de etanol tiene lugar en paralelo con el crecimiento. Los metabolitos secundarios. Los ms conocidos, antibiticos. El metabolito secundario se produce, generalmente, a partir de varios productos intermedios que se acumulan, en el medio o en las clulas, durante el metabolismo primario. En algunos casos se han identificado inductores especficos de la produccin de metabolitos secundarios. Por ejemplo, un inductor especfico de la produccin de estreptomicina, un compuesto denominado Factor A.

7. Materias primas utilizadas en fermentacin

Los medios utilizados en las fermentaciones industriales deben contener todos los elementos necesarios para la sntesis del material celular y para la formacin de producto; y ser baratos.

Requisitos:

a)Composicin del medio

La composicin de la mayora de microorganismos es similar, y en consecuencia puede utilizarse como punto de partida para disear un medio. Los valores tpicos para el C, H, O, N y S, en % en peso de clulas secas, son 45, 7, 33, 10 y 2,5. Elementos traza como Cu, Mn, Co, Mo, B y otros metales. Algunos microorganismos necesitan nutrientes especficos: aminocidos, vitaminas o nucletidos.

b)

Formacin de producto

Cuando la formacin de producto depende de inductores, debe incorporarse al medio el inductor especfico. Si la formacin de producto est sujeta a la represin del catabolito por substratos como glucosa y otros carbohidratos, es necesario utilizar un mutante sin esta regulacin o suministrar el carbohidrato en forma continua o discontinua, de modo que sus niveles permanezcan por debajo de la concentracin crtica. Una fuente de N utilizable rpidamente inhibe la produccin de antibiticos. En hongos, el ion amonio impide la absorcin de aminocidos.

c)

Oxigeno

La mayora de procesos son aerobios, por lo que requieren el suministro de oxgeno como materia prima. La oxidacin completa de la glucosa, representada por la ecuacin C6H12O6 + 6O2 = 6H2O + 6CO2 necesita 192 g de oxgeno para oxidar 180 g de glucosa. Suponiendo que los nicos productos extracelulares que se forman son el CO2 y el H2O, se necesitan 0,4 g de oxgeno para producir 1 g de peso seco de biomasa a partir de glucosa.

d)

Efectos combinados

La observacin de que el rendimiento de biomasa de levadura a partir de azcar es superior y el de alcohol es inferior en presencia de oxgeno, comparados con los obtenidos en condiciones anaerobias, se conoce como efecto Pasteur. Pero, a concentraciones de glucosa superiores a los 250-300 mg/l, incluso en condiciones aerobias, los enzimas oxidantes del ciclo de los cidos tricarboxlicos y de los sistemas citocromo son reprimidos por los catabolitos y el rendimiento de biomasa baja, y se convierte mas azcar en alcohol. En este caso, el menor rendimiento de biomasa se debe a la represin por el catabolito.

e)

Fisiologa y morfologa

A partir de Rhizopus arrhizus se obtiene mayor rendimiento de cido fumrico si el crecimiento tiene lugar en forma filamentosa; tambin en la produccin de penicilina con Penicillium chrysogenum se prefiere que el crecimiento sea en esta forma. Las condiciones del medio que han demostrado tener influencia en la morfologa, son la viscosidad, el pH, los cationes divalentes, los agentes quelantes, los polmeros amnicos, los agentes tensioactivos y la presencia de slidos. Por ejemplo las hifas del P. chrysogenum se vuelven ms cortas y gruesas a medida que el pH es ms alcalino, y en consecuencia forman grnulos; las substancias polimricas aadidas al medio tienden a causar un crecimiento filamentoso disperso.

Espuma
Se produce debido a la desnaturalizacin de las protenas en la interfase gas-lquido. Los antiespumantes actan reduciendo la tensin superficial de las espumas hasta dispersarlas. Estos compuestos varan en su eficacia con las condiciones de fermentacin y la seleccin del tipo de antiespumante se basa frecuentemente en procedimientos de ensayo y error.

f)

Separacin del producto

El diseo del medio de fermentacin tiene fuertes implicaciones en el procesado posterior. El empleo de agentes antiespumantes hace que dichos agentes se recuperen con los slidos durante la separacin slido-lquido, contaminando el producto. Al seleccionar las materias primas a utilizar en el proceso de fermentacin hay que tener en cuenta su impacto econmico en la productividad, en la purificacin del producto y en el tratamiento de desechos.

MEDIOS DE CULTIVO DE CLULAS ANIMALES

El suero fetal de ternera es la mayora de las veces aplicable. El suero contiene diversos factores esenciales para el metabolismo y proliferacin celular, incluyendo factores de iniciacin, protenas ligadoras, factores de unin y compuestos de peso molecular bajo. Es conocido como BME (medio basal de Eagle), ampliamente utilizado en el cultivo de clulas de mamferos.

MEDIOS DE CULTIVO PARA CLULAS VEGETALES

Las fuentes de carbono ms utilizadas son: sacarosa, glucosa, fructosa, maltosa y lactosa. La fuente ms importante de nitrgeno, son los nitratos, a veces se suplementa con sales amnicas. Algunas especies de clulas necesitan nitrgeno orgnico en forma de aminocidos. En la mayora de los cultivos de clulas vegetales son necesarias hormonas vegetales: auxinas, y citoquininas.