Principales aspectos microbiolgicos

Genero Brucella.spp Principales aspectos microbiolgicos El manual de bioseguridad para laboratorios elaborado por la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) clasifica a los microorganismos del gnero Brucella en el Grupo de Riesgo III
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Divisin BXII. Proteobacteria Clase I Alphaproteobacteria Orden I Rhodospirillales Familia II Acetobacteraceae Gnero I Acetobacter Gnero IX Gluconobacter Orden II Rickettsiales FamiliaI Rickettsiaceae Gnero I Rickettsia Orden VI Rhizobiales Familia I Rhizobiaceae Gnero I Rhizobium Gnero II Agrobacterium Family III Brucellaceae Gnero I Brucella
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 Divisin Proteobacterias

Clase Alphaproteobacterias Orden Rhizobiales Familia Brucellaceae

-1887, David Bruce aisla una bacteria a partir del bazo de un soldado ingls muerto en Malta tras sufrir una enfermedad caracterizada por un cuadro febril ondulante. Bruce denomina a esta bacteria Micrococcus melitensis

1897 Bernhard Bang descubre una bacteria causante de abortos en vacas a la que denomina Bacillus abortus

1914 Temistocles Zammit demuestra que la brucelosis se transmite por el consumo de leche de cabra

1917 Alice Evans demuestra que la leche de vaca tambin transmite la brucelosis. Asocia la enfermedad al Bacillus abortus de Bang al que renombra como Brucella abortus

1931 Forrest Huddleson reconoce el microorganismo causante de la brucelosis en cerdos como una especie nueva: Brucella suis 1966 Leland Carmichael descubre una nueva especie a la que denomina Brucella canis por aislarse de casos de abortos en perros. Esta especie se demuestra capaz de infectar a las personas

Genero Brucella

GENERO Brucella: GENERALIDADES Pequeos cocobacilos Gram negativos Aerobios estrictos, catalasa y oxidasa positivos Crecimiento lento y nutricionalmente muy exigentes
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Nuevas especies Brucella cetcea Brucella maris Brucella pennipeda Brucella microti

Coloracin de Gram

Laboratorio de Inmunologia

cocobacilo, aerbico Gram negativo No poseen capsulas Son inmviles No son esporulados Parsitos intracelulares facultativos Particular perfil metablico Producen una infeccin de por vida en los animales

 Morfologa

Son bacilos pequeos de 0,6-1,5 m de longitud y 0,5-0,7 m de dimetro

Genero Brucella Especie : Brucella melitensis Biovares: melitensis abortus suis canis ovis neotomae maris

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RESERVORIOS COMUNES DE LA ESPECIE DE BRUCELLA ESPECIE BIOVAR. HOSPEDERO PATOGENICIDAD EN HUMANOS Br. melitensis Todos Caprinos/ovinos + Br. abortus T Todos Bovinos + Br. suis 1, 3 Porcinos + 2 Porcinos, liebres 4 Caribus, renos + Br. canis Caninos + Br. ovis Ovinos Br. neotomae Ratas de campo Br. maris Ballenas, delfines, bufeos + Focas, leones marinos

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Brucella lisas
B.abortus B.suis B.melitensis

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Brucella ovis y Brucella canis

Son cepas naturalmente RUGOSAS

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Principales caractersticas del Gnero cocobacilo, aerbico Gram negativo No poseen capsulas Son inmviles No son esporulados Parsitos intracelulares facultativos Particular perfil metablico Producen una infeccin de por vida en los animales
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CARACTERISTICAS GENERALES Morfologa Son bacilos pequeos de 0,6-1,5 m de longitud y 0,5-0,7 m de dimetro

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Por las caractersticas de su pared son Gram negativos. Inmviles No Poseen cpsula.

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Los cultivos lisos de Brucella (S) presentan tendencia a sufrir variaciones durante el crecimiento, especialmente con subcultivos y aparecen formas rugosas (R). Las colonias son entonces mucho menos transparentes, presentan una superficie mate ms granular y el color vara de blanco mate a marrn con luz reflejada o trasmitida.

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La comprobacin de esta transicin se realiza fcilmente por tincin con cristal violeta: las colonias rugosas aparecen rojas y las lisas de color amarillo plido. Si las colonias son lisas deben probarse con antisuero contra B. abortus lisa, o preferiblemente con antisueros monoespecficos contra los antgenos de superficie A y M. En el caso de colonias rugosas, las colonias deben probarse con antisuero contra el antgeno R de Brucella.
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La mayora de las especies son Catalasa positivas A la oxidasa son negativos B. ovis B. Neotomae Son aerobios estrictos a excepcin B. ovis y B. abortus, son microaerobias (5- 10 % de CO2)
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Requerimientos de Cultivo Necesita medios enriquecidos complejos, por requerir de ciertos animocidos ,tiamina, biotina, nicotinamida, pantotenato de calcio y trazas de magnesio. Se usan medios con suero Medio enriquecido Albimi
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En los medios se observan las colonias pequeas, hmedas y brillantes. El periodo de incubacin es de 72 a 96 horas. Presentan disociacin (SR)

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Coloracin de Gram

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Factores de virulencia y patogenicidad

Bacterias de vida endocelular

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Factores de Virulencia Lpido A Actividad antileucocitaria (Pared Celular)

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EL DIAGNSTICO

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Diagnostico Directo Aislamiento: sangre - hemocultivo fetos placenta semen Poner en evidencia el agente: Tcnicas de biologa molecular PCR

Coloraciones especificas: Coloracin de Stamp

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Medios enriquecidos Agar Brucella con 10% de suero estril Agar Tripticasa Soya con suero estril Medios selectivos Medios enriquecidos mas antibiticos Bacitracina Cicloheximida Polimixina B Agar base estril, fundirlo a 50C se le agregan las soluciones : Bacitracina 25.000UI por litro Polimixina B 6000 UI por litro Cicloheximida 100mg litro
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Pruebas bioqumicas bsicas

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BRUCELFAGOS 6 grupos de fagos : Tipo 1:: Tbilisi B.abortus en fase S SI o I Tipo 2: cepa Firenze75/13 . B.abortus S SI I y B.suis(4) Tipo 3:: cepa Weybridge B.abortus S SI I y B.suis Tbilisi Tipo 4: Berkeley BK0 BK1 Y BK2 Formas S abortus,neotomae,suis Tipo 5: R/O ,R/C Formas R de Brucella Tipo 6: Tzatnagar Iz Cultivos S,SI,I de abortus,melitensis,neotomae y suis.

El patrn de sensibilidad a los fagos muestra una gran vinculacin con la actividad de oxidacin metablica, definen : especie

 Por lo general, los cambios de morfologa colonial se asocian con cambios en la virulencia, en las propiedades serolgicas y/o en la sensibilidad a los fagos. La aglutinacin positiva con un antisuero anti-Brucella es una identificacin preliminar de que el aislado corresponde a Brucella. La identificacin posterior completa se realiza mejor en un laboratorio de

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Los animales infectados eliminan Brucella al medio, contaminando el ambiente (pastos, aguas,establos). La eliminacin es particularmente importante durante el aborto o los partos infecciosos, 1014 UFC/Brucella por gramo de tejido cotiledonario de vacas. En estos casos, los loquios, la orina, la leche y losfetos estn infectados. La eliminacin contina enforma importante durante los 45 das post-parto. La leche es tambin una va de eliminacin importantey fuente principal de infeccin para el hombre.

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En

los rumiantes, la enfermedad pasa desapercibida, siendo el nico signo clnico el aborto trimestre de la gestacin.

ltimo Las

cras pueden nacer muertas o dbiles.

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Slo

en los animales

Vacuna a las terneras con Cepa 19 2 ml, va SC en terneras de 3 a 8 meses de

edad.

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Enfermedad Quesos

profesional

principalmente de cabra
Leche

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 VIA DE EXTRACCIN - VOLUMEN (4 -5 ml.) - INSTRUMENTAL A UTILIZAR CALIDAD : - HEMOLISIS - CONTAMINACIN TIPO : - SANGRE ENTERA : refrigerada - SUERO: frizado EMBALAJE IDENTIFICACIN

B.abortus

B.melitensis

B.suis

Muchas gracias