ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD FOSFOLIPASA Y PRODUCCIN DE BIOFILM COMO FACTORES DE VIRULENCIA EN CEPAS DE LEVADURAS PROVENIENTES DE MUESTRAS CLNICAS

Puigdomenech, Germn Bulacio, Lucia Garca, Mariana Ramadn Silvana 1- ISPI 9009 San Juan Bautista de La Salle-Rosario. 2- CEREMIC Centro de Referencia de Micologa-Facultad de Ciencias Bioqumicas y Farmacuticas. Universidad Nacional de Rosario. Argentina. e-mail: germanpuigdomenech@hotmail.com
INTRODUCCIN
La incidencia de infecciones causadas por especies de Candida se ha incrementado en los ltimos aos. Entre los factores que confieren ms virulencia a estos organismos, las enzimas hidrolticas como fosfolipasas y proteasas juegan un papel importante, ya que actan en la invasin de los tejidos. Otro factor importante a considerar es la capacidad de formar biopelculas (biofilm).
1; L 1-2; C 1; E 2. S

OBJETIVO MATERIALES Y METODO

El objetivo de este trabajo es evaluar la secrecin de fosfolipasas y produccin de biofilm por parte de levaduras recuperadas de pacientes con candidiasis oral. Se analizaron 93 cepas provenientes de pacientes: 48 de Candida albicans, 16 de C. parapsilosis, 7 de C. krusei, 5 de C. dubliniensis, y 17 de C. tropicalis. La deteccin de actividad fosfolipasa de evalu mediante el cultivo en Agar Sabouraud-Glucosa y Agar Extracto de Malta suplementados con yema de huevo, seguido de la cuantificacin del halo de precipitacin alrededor de las colonias. Se determin el ndice Pz, relacin entre el dimetro de la colonia y el dimetro de la colonia ms halo de precipitacin. La produccin de biofilm se evalu por incubacin en caldo Sabouraud-Glucosa utilizando tubos Eppendorf, seguida de coloracin con cristal violeta y lectura de absorbancia a 530 nm.

ACTIVIDAD FOSFOLIPASA

PRODUCCION DE BIOFILM

RESULTADOS
En cuanto a la actividad Fosfolipasa, 35 cepas de C. albicans, 1 de C. dubliniensis, 6 de C. krusei, 14 de C. tropicalis y 4 de C. parapsilosis mostraron ndice [Pz] menor a 0,69; por otro lado 5 cepas de C. albicans, 1 de C. dubliniensis, 2 de C. tropicalis, 1 de C. parapsilosis, arrojaron Pz entre 0,7-0,8, mientras que 5 cepas de C. albicans, 1 cepa de C. dubliniensis y 1 de C. parapsilosis, Pz entre 0,81-0,9. El resto de las cepas no presentaron actividad enzimtica (Pz =1). Con respecto a la produccin de biofilm: Resultaron fuertes productoras de biofilm 7 cepas de C. albicans, 6 de C. parapsilosis, 3 de C. krusei y 11 de C. tropicalis, en tanto que fueron productoras dbiles 7 cepas de C. albicans, 8 de C. parapsilosis y 3 cepas de C. tropicalis. El resto de las cepas estudiadas no produjeron biopelcula.

CONCLUSION
La produccin de biofilm y la secrecin de enzimas hidrolticas facilitan la adherencia y posterior invasin de los tejidos del hospedero por parte de las levaduras. Es sumamente importante detectar estas caractersticas a los efectos de establecer estrategias necesarias para evitar la diseminacin, instaurando tratamientos precoces. BIBLIOGRAFIA
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