CRECIMIENTO, NUTRICIN Y METABOLISMO BACTERIANO

Introduccin

Qu utilidad tiene conocer las condiciones que un microorganismos requiere para crecer?
Cultivo

# Obtenerlo en el laboratorio

# Combatirlo o evitar su proliferacin

Introduccin

80 % de agua 20 % de peso seco:

Protenas cidos

Nucleicos Polisacridos Lpidos Peptidoglucano Otros compuestos de peso molecular mas bajo

Introduccin
Biosntesis: Ingreso de substancias para transformarse en compuestos estructurales

Nutrientes

Substancias necesarias para asegurar supervivencia. Proveen energa y elementos necesarios para sntesis de estructuras celulares. Ingreso por absorcin. Viabilidad: capacidad de reproduccin.

Nutrientes esenciales o Bsicos

Asimilables por simple difusin o por transporte activo Agua Fuentes de Carbono Compuestos de nitrgeno Fsforo (fosfatos inorgnicos)

Otros nutrientes

Iones potasio Iones Magnesio Factores de Crecimiento u orgnicos

Vitaminas
Aminocidos

Oligoelementos
Hierro
Cobre Cobalto

Factores Estimulantes

Influyen en el proceso de crecimiento. No son imprescindibles. En presencia de factores estimulantes crecen mas rpido y mejor.

Categoras Nutritivas

Fuente de Carbono
Carbono

inorgnico: dixido de carbono auttrofas o littrofas Carbono orgnico: Hetertrofas u organtrofas

Fuente de Energa
Fottrofas Quimitrofas:

energa suministrada por ATP

Categoras Nutritivas

Categoras Nutritivas

Crecimiento Bacteriano

Aumento de nmero (no de tamao) Multiplicacin bacteriana: fisin simple o binaria

Elongacin Auto duplicacin de ADN cromosmico Tabicado central Invaginacin membrana celular Sntesis de pared

Tiempo de generacin

Tiempo necesario para la duplicacin celular Distintiva de cada especie Puede influirse por factores estimulantes Varan de 20 minutos (Escherichia coli) hasta 24 horas

Curva de Crecimiento Bacteriano

Bacteria en medio adecuado Grfico de coordenadas: nmero de bacterias (logaritmo) versus lapso de tiempo. Distinta para cada bacteria En todas se identifican cuatro etapas

Fase de Latencia

El nmero de microorganismos no vara Adaptacin al medio, produccin de enzimas Tiempo variable: entre una hora a das. Tamao relativo aumentado por divisin

Fase exponencial o de crecimiento logartmico

Relacin casi lineal entre el tiempo y el nmero de elementos. Actividad metablica incrementada Depende del tiempo de generacin de cada bacteria Los antimicrobianos son mas activos Puede haber variaciones entre el crecimiento in vitro e in vivo.

Fase Estacionaria

En determinado punto el crecimiento disminuye La poblacin no aumenta Clulas nuevas reemplazan a las clulas muertas Actividad metablica mas lenta Clulas en animacin suspendida Produccin de metabolitos secundarios
Antibioticos Toxinas

Fase de Esporogenesis para las especies productoras de esporas

Fase de declinacin o muerte

Recuento de clulas disminuye sensiblemente El numero de clulas muertas supera al nmero de clulas vivas Acumulacin de productos txicos Disminucin de nutrientes Aparicin rpida : autolimitar diseminacin infecciones

Tcnicas para determinar el nmero y viabilidad de las clulas

Contar al microscopio el nmero de clulas en un volumen conocido Establecer el nmero de clulas por turbidimetria Recuento de elementos viables por cultivo (Unidad Formadora de Colonias o UFC)

Efecto de la Temperatura

Temperatura mnima de crecimiento Temperatura ptima de crecimiento Temperatura mxima de crecimiento

Sicrfilos

Requieren bajas temperaturas 15 20 C La mnima puede ser muy baja Bacterias en el fondo del mar y en los polos

Mesfilos

Rango de temperaturas: 25 40 C Temperatura ptima: 37 C 1 C Agentes que afectan al hombre y los animales

Termfilos

Toleran altas temperaturas Temperatura ptima: 55 C Temperatura mxima: 80 C o mas.

Condiciones de pH

pH : Potencial Hidrgeno. Va desde 0 a 14. pH < 6,5 cido pH > 7,5 bsico o alcalino pH 6,5 7,5 neutro Mas adecuado para crecimiento bacteriano Bacterias que crecen hasta pH 4 Acidfilas (Por ejemplo: Lactobacillus) Vibrio cholerae : medio alcalino

Presin Osmtica

Los solutos (sales y azcares) disueltos se desplazan a zonas de menor concentracin. El agua se desplaza a zonas de mayor concentracin de solutos Una presin osmtica alta causa prdida de agua y plasmlisis de la clula Halfilas: bacterias que toleran altas concentraciones salinas Halfilas facultativas : toleran hasta un 2 % de sales

Condiciones atmsfricas

Potencial de xido-reduccin o Redox (Eh) Respiracin bacteriana : reacciones de xidoreduccin, en cadena El aceptor final de electrones o hidrogeniones es variable

Aerobios

Requieren oxgeno, aceptor final de hidrgeno Formacin de H2O y CO2 Produccin de enzima Catalasa : desdoblamiento del Perxido de hidrgeno (H2O2) en H2O y oxgeno Prueba de Catalasa para diferenciar microroganismos (Staphylococcus de Streptococcus)

Anaerobios

Viven en ausencia de oxgeno atmosfrico Aceptor final de hidrgeno : compuesto inorgnico (NO3 o SO4) Fermentacin: la fuente de carbono provee energa, el donador de hidrgeno y el aceptor final (un compuesto orgnico como cidos o alcoholes) Muy frecuente en microorganismos orales

Anaerobios

Anaerobios obligados: no utilizan O2 Anaerobios moderados: toleran de un 2 a un 8 % de O2 Anaerobios aerotolerantes: sobreviven un tiempo en presencia de O2 Anaerobios facultativos: aceptan indistintintamente una situacin u otra

Microaerfilos

Requieren bajas concentraciones de O2 para crecer Utilizan el O2 como fuente de energa pero a concentraciones < 15 % Susceptibles a radicales superxido Enzima Superxido Dismutasa (SOD) : transforma radicales superxido en H2O2 Capnofilas: desarrollan mejor con concentraciones de CO2 elevadas La cavidad oral presenta todas estas variantes Las especies capnfilas aumentan en personas con alteraciones periodontales

Control de Microorganismos

Muchos factores estimulantes del desarrollo bacteriano se usan para preservar alimentos:
Baja

temperatura Salmueras Dulces Salados Ahumados

Metabolismo Bacteriano

Conjunto de reacciones o transformaciones quimicas que tienen lugar en un microorganismo para mantener su viabilidad Procesos o reacciones Catablicas
Degradan

nutrientes Liberan energa

Procesos o reacciones Anablicas

Tienden

a unir molculas Reacciones de sntesis que consumen energa

Enzimas

Catalizadores orgnicos que aceleran las reacciones qumicas por su presencia, controlados geneticamente Actan sobre un sustrato Reciben su nombre por el sustrato sobre el que actan (Lipasa = acta sobre lpidos) Enzimas de la respiracin : deshidrogenasas y oxidasas Protenas de gran tamao Protenas mas fraccin no proteica (cofactor)

Enzima

Holoenzima: protena (apoenzima) mas cofactor Coenzima : el cofactor es ion metalico o molecula orgnica compleja Grupo prostetico: cofactor unido fuertemente a apoenzima Constitutivas: preformadas en la clula Inducibles o adaptativas: se forma en condiciones ambientales especiales o en presencia de sustratos apropiados

Enzimas

Enzimas

Exoenzimas de tipo hidroltico: unin de agua a macromolculas, unidades pequeas (bloques estructurales. Facilitan penetracin pasiva, facilitada o activa a travs de pared y membrana Para ingreso activo: actividad de permeasas

Enzimas

Endoenzimas: biosintesis para formar macromolculas (Anabolismo) Mecanismos de Represin Vas anfiblicas: los productos generados en la degradacin de un elemento se aprovechan en la sntesis de otros

Vas metablicas mas conocidas

Gluclisis

Como consecuencia del metabolismo hay produccin de toxinas, vitaminas, antibiticos, compuestos de inters industrial (alcoholes)

Vas metablicas mas conocidas

Medios de Cultivo

Substancias nutritivas que permiten el desarrollo de microorganismos en el laboratorio Cultivo: brindar condiciones ptimas de crecimiento Fciles de preparar Baratos Permitir el desarrollo de gran variedad de grmenes Aportar nutrientes adecuados (aminoacidos, nucletidos, factores de crecimiento, glucosa, iones inorganicos)

Medios de Cultivo

Optimo contenido de H2O y correcto pH Requerimientos de O2 Estril, evitar contaminaciones Incubacin: temperatura ptima en estufas

Clasificacin de los medios de cultivo

Naturales: solo usados para enriquecer medios (leche, suero, papa) Artificiales se preparan en el laboratorio
Lquidos:

caldos Slidos: caldos adicionados de substancias capaces de solidificar (Agaragar)

Medios Complejos: extractos de carne, levadura, peptonas. Medios Enriquecidos: agregado de

Clasificacin de los medios de cultivo

Medios selectivos: permiten crecer un solo tipo de microorganismo (substancias inhibidoras) Medios diferenciales o indicadores: evidencia alguna actividad metablica por cambio de estado o color propia de un tipo determinado de microorganismo Medios de Transporte: traslado de muestras biolgicas manteniendo las bacterias viables