Pseudomonas sp. Moraxella spp.

CTEDRA DE MICROBIOLOGA FACULTAD CIENCIAS VETERINARIAS

Falleci: 25/01/2009

Pseudomonas aeruginosa

Orden Pseudomonadales Familia Pseudomonadaceae

numerosas especies

ampliamente distribuidas en la naturaleza, suelo, agua y en todo lugar donde exista materia orgnica en descomposicin

De las ms de 100 especies que integran este gnero

Pseudomonas aeruginosa
es la nica que en el hombre y los animales reviste una enorme importancia clnica, aunque raramente constituye el agente primario de la enfermedad.

Palleroni (1984) por estudios de hibridacin del RNAr/DNA, clasifica al gnero en cinco grupos ej. Grupo I (Pseudomonas fluorescentes) est P. aeruginosa. Grupo II, integrado por P. mallei, P. speudomallei y P. cepacia, hoy constituyen el gnero Burkholderia.

P. aeruginosa
bacilo gramnegativo 0,5 a 1 mm por 3 a 4 mm mvil por uno a tres flagelos polares. Posee pili y fimbrias. No forma esporas. Algunas cepas estn rodeadas de una capa de mucus o polisacrido extracelular denominado slime, con capacidad de formar biofilm.

Biofilm

aerobio estricto utiliza el oxgeno como aceptor final de electrones puede crecer en un ambiente anaerbico utilizando nitratos como aceptor terminal de electrones.

No tiene exigencias nutritivas

Crece en medios comunes

medios slidos dos tipos de colonias grande, de 3 a 5 mm de dimetro, lisa con centro elevado y bordes ondulados (se parece a un huevo frito) y pequea (alrededor de 2 mm), rugosa y convexa. A veces mucoso productoras de slime

No desarrolla a 4 C Desarrolla de 10 y 42 C ptima 35 C 24-48 horas . Crecimiento a 42 C ayuda para diferenciarla de otras especies que integran el gnero. Los cultivos desprenden un aroma dulzn muy caracterstico como de uvas, que ayuda a la identificacin.

Pigmentos
1) 2) 3) 4) piocianina, fluorescena o pioverdina, piorrubina piomelanina,

siendo la nica especie que produce piocianina pigmento azul-verdoso.

Este pigmento, no colorea las colonias, sino que se difunde en el medio, favoreciendo la deteccin y facilitando el diagnstico de laboratorio.

La piocianina (del griego: pus azulado) casi el 90% de las cepas

responsable del caracterstico pus azul de las heridas.

este pigmento posee actividad antibacteriana e inclusive fungicida.

La pioverdina o fluorescena, emite fluorescencia a la luz ultravioleta.

Algunas cepas producen piorrubina, de color rojo y

piomelanina de color marrn-negro.

La produccin de pigmentos depende de la presencia de hierro en el medio de cultivo. P. aeruginosa elabora bacteriocinas o piocinas
sustancias de accin bacteriosttica sobre otras cepas del mismo gnero.

En agar sangre produce beta-hemlisis. No fermenta los carbohidratos. Citrato de sodio +

Factores de agresin de Pseudomonas aeruginosa

Virulencia multifactorial. componentes propios de la clula LPS pili, alginatos y productos extracelulares como enzimas y toxinas.

P. aeruginosa plsmidos R por conjugacin resistencia a la mayora de los antibiticos unida a la resistencia a metales pesados.

Factores de adherencia: Los pili facilitan la adhesin a las clulas epiteliales, permitiendo la colonizacin. Tambin coloniza tejidos profundos y expuestos, como ocurre en las quemaduras y heridas.
Las cepas productoras de slime, forman como una biopelcula, que impide la accin de los anticuerpos.

Endotoxina:

lpido A (componente de la endotoxina de la pared celular)

Exotoxina:
Exotoxina A responsable de la dermatonecrosis en quemaduras
es inmunodepresora y txica para los monocitos y mdula sea de los animales y humanos.

Exoenzimas S y T:
dao en las clulas epiteliales
Facilita diseminacin, invasin tisular y necrosis.

Enzimas proteolticas: La mayora de las cepas producen enzimas proteolticas

Degradan elastina casena colgeno gelatina fibrina.

Proteasas extracelulares: elastasas, proteasa alcalina.

DIAGNSTICO DE LABORATORIO

Muestras: orina, pus, exudados, raspados de la superficie de los tejidos infectados.

Siembra en medios simples 24-48 horas a 35 C, en aerobiosis.

Medio slido colonias translcidas, extendidas, con bordes ondulados semejante a un huevo frito.

Produccin de piocianina medio de cultivo azul verdoso que facilita la identificacin.

Agar sangre b-hemlisis. Los cultivos tienen un olor a uvas caracterstico.

medio selectivo de eleccin: agar cetrimida

resistencia a los compuestos de amonio cuaternario.

La identificacin de otras especies del gnero requiere una amplia batera de pruebas fisiolgicas.

En general, las cepas de Pseudomonas se pueden tipificar por:

serologa, sensibilidad a bacterifagos (fagotipificacin), patrones de sensibilidad a antibiticos, produccin de piocinas. Las tcnicas de epidemiologa molecular (DNA o RNA ribosmico) permiten clasificar las cepas con mayor sensibilidad y especificidad.

TRATAMIENTO Y CONTROL P. aeruginosa presenta una caracterstica inherente a su fisiologa, es la resistencia a varios antibiticos. Durante el tratamiento, muchas cepas sensibles se vuelven resistentes, al adquirir enzimas inactivantes por medio de plsmidos de resistencia o al mutar las protenas de los canales pornicos o, inducir alteraciones en el sitio diana

Pseudomonas aeruginosa

Coloracin de Gram

Pseudomonas aeruginosa

MEB

Pseudomonas aeruginosa

Colonias en Agar

Pseudomonas aeruginosa

Agar sangre

Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa

Meller Hinton

Pseudomonas aeruginosa

Agar nutritivo

Pseudomonas aeruginosa

Agar cetrimide

Pseudomonas aeruginosa

Produccin de piocianina

Pseudomonas aeruginosa

Reaccin en Agar doble azcar-hierro o Kligler NO MODIFICA

Pseudomonas aeruginosa
+ -

Produccin de oxidasa +

Moraxella spp.

Gnero propuesto por Lwoff en 1939 Ubicado en familia Neisseriaceae en 1968 En 1991 se propuso la creacin de una nueva Familia: Moraxellaceae gneros Moraxella Acinetobacter Psychrobacter

Los bacilos son muy cortos y gruesos, regordetes

en pares o cadenas cortas

en los cultivos variaciones de tamao celular, de la forma y an produccin de elementos filamentosos o de cadenas.

Son gramnegativos
No poseen flagelos

En general son aerobios

Poseen oxidasa, generalmente tambin catalasa y son muy sensibles a penicilina.

Moraxella bovis
queratoconjuntivitis de bovinos. bacterias aerobias inactivas frente a hidratos de carbono

con exigencias nutritivas

medios enriquecidos para su desarrollo (sangre, suero).

Queratoconjuntivitis
Moraxella bovis produce toxinas: Hemolisinas Citolisinas.
Estas toxinas tienen la propiedad de degradarse muy fcilmente, es decir, no duran mucho tiempo fuera de la Moraxella, pero s lo suficiente como para producir dao corneal.

PILI
Hay distintos tipos de pili, de muy variada composicin proteica
cada tipo piliar produce anticuerpos que protegen exclusivamente contra ese tipo piliar

DIAGNSTICO queratoconjuntivitis infecciosa cuadro clnico

aislamiento del microorganismo

Opacidad de la crnea

Toma de la muestra con hisopo estril fase inicial de la enfermedad Siembra debe hacerse en medios enriquecidos (agar sangre, agar chocolate) incubacin a 36-37 C durante 24-48 horas.

Desarrollo de colonias pequeas redondeadas grisceas

hemolticas (halo de hemlisis muy reducido)

Por microscopa se ven cocoides o bacilos cortos gramnegativos.

En cultivos viejos muestra marcado pleomorfismo.

Identificacin oxidasa positiva hidrlisis de gelatina

licuacin de medios con suero NO reducen nitratos a nitritos inactivo frente a hidratos de carbono. Completar con inmunodiagnstico

TRATAMIENTO profilctico, por vacunas especficas M. bovis es muy sensible a la mayora de los antibiticos (penicilina).

La tetraciclina de accin retardada suele ser la droga de eleccin, tpica o sistmica.