PRUEBAS BSICAS A MEDICAMENTOS

LABORATORIOS DE MEDICAMENTOS (FISICOQUMICO Y MICROBIOLOGICO)

Bogot, octubre de 2010

OBJETIVO

Familiarizar

los

profesionales

de

los

Laboratorios de Salud Pblica y profesionales de IVC en los mtodos comnmente usados para

evaluar la calidad de los medicamentos y

establecer un sistema sostenible de control de calidad de medicamentos, basado en el uso de pruebas bsicas o de baja complejidad.

RESULTADOS ESPERADOS

Que las Direcciones Territoriales de Salud empleen los mtodos de pruebas bsicas como herramienta que sirva para detectar oportunamente medicamentos falsificados y con deficientes parmetros de calidad en el mercado.

TEMAS A TRATAR
Procedimientos de muestreo. Pruebas bsicas: Inspeccin Fsica/Visual

Desintegracin simple
Cromatografa de Capa Delgada

Manejo de Datos y Reportes.

PROCEDIMIENTO DE MUESTREO PARA MEDICAMENTOS

OBJETIVO

Proporcionar los principios generales,

propsito, precauciones y otras

consideraciones importantes a tener en

cuenta durante las actividades de

muestreo, para realizar anlisis de

calidad a medicamentos.

CONSIDERACIONES GENERALES
El muestreo abarca las operaciones diseadas para seleccionar una porcin representativa de un producto farmacutico, con el fin de determinar la calidad de este en el mercado o para detectar productos farmacuticos de baja calidad, sospechosos y falsificados. Debe ser realizado por un inspector responsable que tenga entrenamiento en aspectos bsicos de muestreo y conocimientos de las sustancias farmacuticas, para ejecutar el trabajo con eficacia y seguridad.

DEFINICIONES
Producto Farmacutico Alterado. Es el que se encuentra en una de las siguientes condiciones: Cuando se le hubiere sustrado total o parcialmente o reemplazado los elementos constitutivos que forman parte de la composicin oficialmente aprobada o cuando se les hubiere adicionado sustancias que pueden modificar sus efectos o sus caractersticas farmacolgicas, fisicoqumicas u organolpticas.

Cuando se encuentre vencida la fecha correspondiente a la vida til del producto.

de

expiracin

Cuando el contenido no corresponda al autorizado o se hubiere sustrado del original, total o parcialmente. Cuando por su naturaleza no se encuentre almacenado o conservado con las debidas precauciones.

DEFINICIONES
Producto Farmacutico Fraudulento. Es el que se encuentra en una de las siguientes condiciones: El elaborado por laboratorio farmacutico que no tenga autorizacin para su fabricacin. El que no proviene del titular del Registro Sanitario, del laboratorio farmacutico fabricante o del distribuidor o vendedor autorizado, de acuerdo con la reglamentacin que al efecto expida el Ministerio de Salud. El que utiliza envase, empaque o rtulo diferente al autorizado. El introducido al pas sin cumplir con los requisitos tcnicos y legales establecidos en el Decreto 677/95. Con la marca, apariencia o caractersticas generales de un producto legtimo y oficialmente aprobado, sin serlo. Cuando no est amparado con Registro Sanitario.

PROCEDIMIENTO
Caractersticas de la Muestra:
Las muestras deben cumplir con los requisitos de rotulacin exigidos en el Decreto 677/95. Los medicamentos importados requieren la siguiente informacin en espaol: Composicin, nombre o direccin del importador, condiciones especiales de almacenamiento y Registro Sanitario.

PROCEDIMIENTO
Caractersticas de la Muestra:
No recoger productos Alterados y/o Fraudulentos.
Enviar en lo posible la cantidad de muestra requerida (Manual de Normas Tcnicas de Calidad). No recoger productos que no sean de nuestra competencia. No tomar muestras abiertas o sin identificar. No enviar muestras para determinar la autenticidad.

No tomar muestras de envases vacos o etiquetas.

A los productos Homeopticos se le realizan anlisis microbiolgicos, de alcoholes y ausencia de metales pesados.

PROCEDIMIENTO
Cantidad de Muestra a Tomar
FORMA FARMACUTICA
TABLETAS CPSULAS SOLUCIONES PARENTERALES DE GRAN VOLUMEN LQUIDOS (Suspensiones, jarabes) hasta 120 mL LQUIDOS (Suspensiones, jarabes) de ms de 120 mL POLVOS Y GRANULADOS de ms de 100 g POLVOS ESTRILES PARA RECONSTITUIR hasta 10 mL

CANTIDAD 120 100 6 30 15 6 120

UNGENTOS, CREMAS Y GELES entre 10-50 g

30

PROCEDIMIENTO
Cantidad de Muestra a Tomar
En caso de no estar disponible la cantidad necesaria, tomar el mayor nmero de unidades posibles para realizar las pruebas de mayor importancia, las cuales varan de acuerdo a la forma farmacutica o la queja recibida del producto. Se toman en forma aleatoria y del mismo nmero de lote.
Empacar la muestra manteniendo las condiciones indicadas en el rotulo del envase y el empaque. Deben permanecer siempre en sus envases y empaques originales.

PROCEDIMIENTO
Toma de Muestras
Tomar al azar un nmero de muestras, que cumpla con los criterios descritos antes (caractersticas de las muestras). Verificar que se esta almacenada en un lugar seguro, bajo las condiciones de almacenamiento indicadas en los rtulos. Embalar adecuadamente los empaques y envases originales, para prevenir su deterioro, que lleguen en mal estado al laboratorio o la prdida de cualquier unidad. Registrar en un formato adecuado la informacin de la muestra (rotulacin).

PROCEDIMIENTO
Transporte de Muestras
Una vez empacadas, asegurar el cierre del embalaje con sellos de seguridad, para evitar extracciones o intercambios durante el transporte.

Protegerlas de la luz, de condiciones extremas de humedad y calor (15 25C). Refrigeradas cuando requieran cadena de fri y evitando en general cambios bruscos de temperatura, luz y humedad.
Una vez las muestra lleguen al laboratorio se debe verificar que se han mantenido las condiciones de almacenamiento durante el transporte y su integridad.

ANLISIS DE LA MUESTRA
En el laboratorio se realizan pruebas fisicoqumicas (cualicuantitativas) y microbiolgicas. En varias pruebas, las muestras son comparadas contra estndares de referencia, empleando tcnicas validadas. El concepto se emite sobre la muestra, no sobre el producto. Los laboratorios no tienen capacidad para realizar pruebas de toxicidad, ni se concepta sobre la autenticidad de los productos.

INSPECCIN VISUAL

GENERALIDADES
La inspeccin visual cubre la evaluacin de la integridad del empaque y del etiquetado, as como una descripcin de las formas de dosificacin. Los medicamentos sospechosos con etiquetas incorrectas, informacin incorrecta acerca de la dosis, dosificacin o fecha de vencimiento estn sujetos a otras pruebas.

EMPAQUE
El empaque incluye los envases, cierres y etiquetas

empleados para identificar y proteger un producto.

Los medicamentos se empacan dentro de envases que

pueden ser generalmente de vidrio, plstico o de metal. El

envase primario es a menudo protegido por un cartn plegable que tiene la rotulacin o identificacin del producto

y en algunas ocasiones un folleto que explica el rgimen de

dosificacin, los efectos adversos, las acciones del medicamento entre otros.

EMPAQUE
Envase y Cierre.
El envase y el cierre deben proteger al producto del ambiente exterior y deben asegurar que el medicamento cumplir con las especificaciones apropiadas durante su vida til.
En la inspeccin visual debe determinarse si el envase y el cierre son apropiados para el producto que lleva adentro.

EMPAQUE
Etiqueta.
Nombre comercial

Nombre del ingrediente activo (cientfico)

Nombre y logotipo del fabricante Direccin completa del fabricante Dosis del medicamento Forma farmacutica (Ej: tableta, jarabe) Nmero de unidades por envase Nmero de lote Fecha de vencimiento

EMPAQUE
Etiqueta. La informacin puede estar impresa en una etiqueta adherida al envase o impresa directamente sobre el mismo envase. Toda la informacin debe ser legible e indeleble. El empaque y etiquetado de productos farmacuticos es un negocio complejo y costoso. Por lo que el proceso y la calidad del material de empaque son difciles de falsificar.

INSPECCION DE ENVASES
Verificar que la etiqueta contenga toda la informacin que se supone debe contener (nombre del medicamento, nombre y logotipo del fabricante, dosis, nmero de lote y fecha de vencimiento).

Verificar detalles como deletreo, logotipo de la compaa entre otros.

Verificar el cierre (hermeticidad). Si una caja de cartn protege al envase, comprobar que la informacin en el cartn coincide con la etiqueta del envase.

INSPECCION DEL EMPAQUE

El empaque (caja de cartn), protege al envase primario y su informacin debe coincidir con la etiqueta del envase. La calidad del cartn refleja la originalidad del producto, por lo que una inspeccin visual detallada del cartn permite detectar si se trata de una falsificacin, para lo cual se debe verificar:

La etiqueta de la caja.
Calidad del papel usado (es reciclado, blanqueado, sin blanquear). Tamao y forma del marco del cartn. Detalles sobre las aletas de cierre y de las tapas, su bordes y sus ranuras de fijacin.

INSPECCIN DE FORMAS DE DOSIFICACIN SLIDAS

Tabletas y cpsulas:
La etiqueta debe indicar si se trata de tabletas recubiertas o sin recubrimiento. Revisar si existen indicios de humedad, marcas de suciedad, erosin por abrasin, grietas o cualquier otro indicio de adulteracin. Comprobar si hay fusin y/o decoloracin de las tabletas/ cpsulas. Revisar cualquier inscripcin en las tabletas/ cpsulas (logotipos, dosis o cualquier smbolo).

INSPECCIN DE FORMAS DE DOSIFICACIN LQUIDAS

Soluciones, suspensiones y emulsiones:

La etiqueta debe indicar si se trata de una solucin, jarabe, suspensin, emulsin, etc.
Revisar si hay presencia de partculas extraas, olor extrao u objetable o cualquier otro indicio de adulteracin. Verificar si el color es No caracterstico o No homogneo. Verificar en las suspensiones si el sedimento es fcilmente redispersable. Verificar en las emulsiones que no haya separacin de fases.

ALMACENAMIENTO
Los medicamentos se mantienen estables cuando el producto se fabrica cumpliendo normas de calidad, se empaca en el envase correcto y se almacena en condiciones apropiadas de temperatura y humedad a travs de su vida til. Las condiciones de almacenamiento se deben indicar en la etiqueta y se comprueban para asegurar que el medicamento est almacenado correctamente.

EXAMEN FSICO
Para determinar las caractersticas fsicas, el analista debe: Tomar la muestra usando guantes. Si se trata de tabletas, colocarlas sobre un papel blanco. Examinar la muestra bajo la luz ordinaria del lugar. Registrar las observaciones encontradas durante la inspeccin visual.

EXAMEN FSICO
Caractersticas a observar:

Uniformidad de tamao
Uniformidad de forma Uniformidad de color

Marcas (logotipos, nmeros, otros)

Roturas o presencia de grietas Manchas en la superficie o contaminacin

Contaminacin con partculas extraas

Presencia de envases vacos Envases o productos pegajosos

CONCLUSIONES
Si la muestra presenta un buen aspecto fsico, se pueden realizar las pruebas bsicas. Si la muestra falla las pruebas fsicas (inspeccin visual), se debe tomar ms muestra para pruebas adicionales, el resto del lote debe ponerse en cuarentena y ser evaluado mediante pruebas bsicas o si se requieren ensayos complejos debe ser enviada al Laboratorio Nacional de Referencia, para tomar una decisin sobre este lote.

PRUEBAS BSICAS: DESINTEGRACIN SIMPLE

GENERALIDADES
La desintegracin se define como el estado en el cual cualquier residuo de la unidad, con excepcin de fragmentos insolubles del recubrimiento o de las cpsulas permanecen en el aparato de prueba como una masa suave que no tenga ncleo firme palpable.

GENERALIDADES
La desintegracin no se lleva a cabo cuando se trata de tabletas masticables o estn diseados como formas de dosificacin de entrega modificada (liberacin controlada o liberacin prolongada).

La desintegracin requiere de aparatos/dispositivos sofisticados como: un ensamble especial de canastillas, un matraz en forma de vaso de 1000 mL (de 138 a 155 mm de altura con dimetro interno de 97 a 110 mm), un bao termostatado entre 35 y 39C y un dispositivo para levantar y bajar la canastilla en el medio de inmersin a un frecuencia constante entre 29 y 32 ciclos por minuto.

GENERALIDADES
En la desintegracin simple (simplificada), se obtiene un estimado robusto con un tiempo lmite (30 minutos) para que una forma de dosificacin del medicamento se desintegre en agua a 37 2C.

Esta prueba la deben cumplir las tabletas sin recubrimiento, cpsulas y todas las tabletas solubles, dispersables, efervescentes y con cubierta de pelcula (formulaciones de liberacin rpida).
Si el producto no cumple esta prueba, se debe confirmar el resultado en el Laboratorio Nacional de Referencia a travs del ensayo de Disolucin y no es necesario realizar la identificacin del Principio Activo.

OBJETIVO
Comprobar con un mtodo simple, si una forma de dosificacin de medicamento (tableta, cpsula) se rompe o se descompone en sus elementos constitutivos, partes o partculas pequeas en el tiempo lmite establecido en el criterio de aceptacin (30 minutos).

APARATO/EQUIPO
1. 2. 3. Un vaso de cuello ancho de 100-150 mL 100 mL de agua Termmetro o dispositivo para medir la temperatura

4.
5.

Reloj o cronmetro para medir el tiempo

Una muestra del medicamento (tableta o cpsula) a la vez

PROCEDIMIENTO
Colocar una tableta o cpsula en un vaso de cuello ancho de 100-150 mL que contenga 100 mL de agua a una temperatura de 37 2C. 1. Mezclar o agitar el lquido del vaso con movimientos giratorios peridicos, continuar por 30 minutos (para registrar o documentar los datos, se debera continuar hasta que se observe una desintegracin completa). 2. Leer y registrar el tiempo (en minutos) en que la desintegracin sea completada. 3. Repetir la prueba con cinco (5) tabletas o cpsulas adicionales.

RESULTADOS
El lote pasa la prueba simple de desintegracin si (todas) las tabletas o cpsulas se desintegran dentro de 30 minutos. Si una (1) tableta o cpsula falla la desintegracin, repetir por completo el ciclo de la prueba. El lote falla la prueba simple de desintegracin si una de las tabletas o cpsulas adicionales falla otra vez en la segunda ronda.

CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA (TLC)

GENERALIDADES
En la cromatografa de capa delgada (TLC), una alcuota de la solucin de la muestra se aplica en una capa porosa de material adsorbente. La mezcla de sustancias de la muestra es resuelta en sus componentes individuales por migracin diferencial de un sistema de solventes a travs del absorbente. El sistema de solventes se desplaza a travs de adsorbente solamente por accin capilar, no se requiere ninguna fuente externa de presin.

GENERALIDADES
La TLC permite el anlisis simultneo de varias muestras al mismo

tiempo bajo las mismas condiciones.

Se emplea para hacer identificaciones presuntivas al observar manchas con valores idnticos de Rf y de magnitud igual, de una

muestra desconocida y una muestra de referencia, corridas en la

misma placa cromatografica. En cada anlisis se emplea un adsorbente fresco y requiere una

cantidad de solvente pequea.

GENERALIDADES

TLC Clsica
La TLC no requiere de instrumentacin compleja. Los mtodos son porttiles (se pueden realizar fuera del laboratorio) y se pueden utilizar para la investigacin rpida de productos farmacuticos en lugares como puertos de entrada, centros de distribucin o en las reas que carecen de recursos para otros anlisis ms costosos.

GENERALIDADES
La TLC se utiliza para uno de tres propsitos:

Para realizar un anlisis cualitativo y determinar la presencia de una sustancia particular en una mezcla.
Para hacer anlisis cuantitativos y determinar la cantidad de una sustancia particular en una mezcla de la muestra, medidas por comparacin. Para purificar y aislar una sustancia particular separndola de cualquier contaminante. Los componentes permanecen en el adsorbente y se pueden recuperar para experimentacin adicional.

INSTRUMENTACIN/ APARATOS
Para realizar la TLC se requiere: Una cmara de desarrollo con la tapa: Un envase de vidrio en el que se puedan acomodar una o ms placas y que se pueda cerrar. Un aspersor de reactivos: emite un aerosol fino, para aplicar los reactivos de deteccin a la placa. Micropipetas: Se aplican volmenes iguales de la solucin de prueba y del estndar (10 L). Plantillas: ayudan en la aplicacin de las soluciones a intervalos regulares.

INSTRUMENTACIN/ APARATOS

TLC
Solventes: varan, los ms comunes son metanol, acetonitrilo, agua, etc.

Adsorbentes: Capa uniforme y relativamente fina de material seco,

finamente pulverizado que se aplica a una capa. Las placas deben estar limpias y libres de pelusa, aceites y contaminantes. Se debe usar guantes al manejar las placas para prevenir contaminacin. Fieltros: Para mejorar el movimiento del solvente a travs de la placa (papel)

INSTRUMENTACIN/ APARATOS
Sistemas de deteccin: Las manchas pueden verse directamente bajo la luz blanca, luz ultravioleta de longitud de onda corta (254 nm) o luz ultravioleta de onda larga (360 nm). Estas lmparas estn disponibles en el comercio. Se puede hacer una inspeccin bajo luz blanca o UV despus del uso de un reactivo que har las manchas visibles (aspersin, derivatizacin).

DEFINICIONES
Rf. Distancia del centro de la mancha desde su origen dividido entre las

distancia que el frente del solvente viaj desde el origen.

Frente del solvente. Punto ms lejano que el solvente se movi durante el desarrollo. Desarrollo. Movimiento del solvente a travs del adsorbente. Cromatografa de fase normal. TLC de adsorcin o participacin en la

cual la fase estacionaria es ms polar en relacin al sistema de

solventes solvente

DEFINICIONES
Cromatografa de fase reversa o inversa. TLC de particin en la cual la fase estacionaria es no polar comparada con el sistema de solventes. Sistema de solventes. Es la fase mvil del sistema de TLC que se mueve hacia arriba de la placa para efectuar la separacin. Longitud de onda larga. Se refiere a la radiacin ultravioleta en la gama de 365 nm, usada para visualizar muestras que despiden luz fluorescente cuando son expuestas a la luz UV de 365 nm. Longitud de onda corta. Se refiere a la radiacin ultravioleta en la gama de 254 nm, usada para visualizar muestras en las placas de TLC que contienen indicador fluorescente al UV.

SEGURIDAD

Antes de manipular cualquier reactivo o estndar es importante leer las hojas de seguridad, para estar enterado de los peligros qumicos y fsicos de cada sustancia.
Recolectar todos los desechos de TLC y eliminarlos correctamente (reactivos orgnicos y principios activos)

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTNDAR PARA TLC

PROPOSITO

El propsito de este procedimiento operativo estndar es proveer una gua general para los

anlisis realizados por Cromatografa de Capa

Delgada (TLC).

APLICACIN

Este procedimiento es aplicable al anlisis de las muestras de medicamentos que se van a identificar por Cromatografa en Capa Delgada (TLC)

PROCEDIMIENTO
Material de la Placa
Las placas ms empleadas son de Silica gel 60 F254. En varios trabajos, las placas se usan sin pretratamiento a menos que se presenten interferencias debidas a contaminacin de la placa. Para obtener resultados ms reproducibles, las placas deben ser tratadas as: -Marcar la direccin de desarrollo con un lpiz en la parte superior de la placa. -Correr la placa con 20 mL de metanol. -Secarla por 30 minutos en un horno limpio a 120C. -Equilibrarla a las condiciones del laboratorio (temperatura y humedad relativa), en un recipiente que la proteja del polvo y los vapores.

PROCEDIMIENTO
Preparacin del Sistema
Colocar un fieltro de papel filtro en la cmara. Adicionar una cantidad suficiente de solvente para tener una profundidad de 5 a 10 mm. Saturar el fieltro con el solvente. El borde inferior del fieltro debe tocar el solvente en el fondo de la cmara. Cerrar la cmara con una tapa. Permitir que el sistema se equilibre.

PROCEDIMIENTO
Preparacin del Sistema
Insertar el fieltro de modo que descanse en el fondo de la cmara. Colocar el fieltro en la pared, si se usa una cmara rectangular. Este debe ser lo suficientemente ancho para que permanezca contra la pared cuando se presione contra los lados. Mojar completamente el fieltro cuando se agregue el solvente. Si no esta completamente mojado, poner la tapa e inclinar suavemente el tanque para mojar el resto del fieltro.

PROCEDIMIENTO
Preparacin del Sistema
Placas precubierto

Algunas tcnicas requieren el uso de una cmara no equilibrada. Permitir que la cmara cerrada se equilibre por lo menos 30 minutos, a menos que la tcnica indique que se use un sistema no equilibrado o sin saturar. Si se especifica el uso de la cmara sin equilibrar en la tcnica, agregar el solvente apenas justo antes de colocar las placas.

PROCEDIMIENTO
Aplicacin de la Muestra
Aplicar la solucin de prueba y la solucin de estndar como indique la tcnica del producto, teniendo en cuenta lo siguiente: Los puntos deben tener una separacin entre si alrededor de 1.5 cm, alrededor de 2 cm del borde inferior de la placa y 1.5 cm de los bordes laterales de la placa. Colocar la placa en la cmara de desarrollo, sumergiendo el borde inferior de la placa, pero no los puntos de aplicacin de la muestra.

Colocar la cubierta y permitir que el solvente ascienda de 7 a 9 cm arriba de los puntos de aplicacin (15 minutos a 1 hora).

PROCEDIMIENTO
Aplicacin de la Muestra
Los utensilios de aplicacin deben estar limpios y no contaminados (no reutilizar aplicadores). Colocar todas las aplicaciones a la misma distancia del borde inferior de la placa. Idealmente el dimetro de todas las aplicaciones debe ser menor de 5 mm. Es preferible muchas aplicaciones pequeas a una grande. Las aplicaciones deben estar secas antes de colocar la placa en la cmara de desarrollo. En la cmara de desarrollo, el lado del absorbente de la placa de TLC debe estar frente al fieltro.

PROCEDIMIENTO
Aplicacin de la Muestra
Colocar la placa en la cmara en un ngulo con la parte superior de la placa descansando contra la pared, justo arriba del fieltro. El resto de la placa no debe tocar las paredes de la cmara o el fieltro del papel.

La cmara no debe moverse mientras que las placas estn en desarrollo.

Marcar rpidamente el frente del solvente antes de que desaparezca, cuando la placa se retire de la cmara.

PROCEDIMIENTO

Preparacin y Almacenamiento de la Fase Mvil

Medir los volmenes requeridos (o pesos) y llevarlos a un recipiente adecuado, con cierre hermtico, y agitar. Para medir volmenes menores a 1.0 mL usar micropipeta, hasta 20 mL emplear pipeta graduada y ms de 20 mL probeta graduada. Preparar fase mvil suficiente para un da de trabajo (su composicin puede cambiar con el tiempo).

PROCEDIMIENTO
Desarrollo
Introducir la fase mvil en la cmara de manera que el papel sea humedecido totalmente y se adhiera a la pared posterior de la cmara.
Dejar equilibrar la camara por 30 minutos. Marcar la distancia de desarrollo con un lpiz en la parte superior de la placa. Al colocar la placa en la cmara, la parte trasera descansa sobre la pared y la cara frontal queda al frente del papel filtro.

Desarrollar la placa hasta la marca.

Dejar secar la placa mnimo por 5 minutos a las condiciones ambientales del laboratorio.

PROCEDIMIENTO
Deteccin
Realizar primero la deteccin bajo luz UV de longitud de onda corta (254 nm), seguido por deteccin a longitud de onda larga (360 nm). Si las manchas son visibles, medir y registrar la distancia de cada una desde el punto de origen e indicar bajo cual longitud de onda la mancha era visible. Determinar los valores de Rf para las manchas principales. Si la tcnica lo requiere, rociar la placa con los reactivos especificados y repetir las observaciones bajo luz blanca y luz ultravioleta. Comparar los resultados de la Solucin prueba con los de la Solucin estndar.

PROCEDIMIENTO
Deteccin
1. Bajo radiacin de longitud de onda corta, los compuestos que se ven con fluorescencia aparecen como reas oscuras en la placa (la radiacin de fluorescencia es disminuida en las reas de la placa que contengan sustancias que absorben al UV, si contienen indicador de fluorescencia).
2. Usar guantes dentro de la lmpara, para proteger las manos contra la radiacin UV.

3. Marcar las manchas visibles con lpiz, en el borde de la placa a la altura de la mancha que se est marcando con una nota de a que carril pertenece la mancha que se esta viendo.
4. Antes de rociar las placas de TLC, estas deben estar totalmente secas. 5. Evitar la sobresaturacin de la placa, porque el reactivo de roco se puede escurrir de la placa y las manchas pueden fluir. Probar el flujo del aerosol antes de rociar la placa (niebla fina). 6. Permitir que la placa se seque en una campana de extraccin por algunos minutos y si se requiere calentamiento, colocarla en un horno a la temperatura apropiada. Permitir que la placa se enfrie antes de manipularla.

PROCEDIMIENTO
Derivatizacin
1. Colocar la placa en una cabina de extraccin en forma vertical contra un papel filtro o papel absorbente.
2. Rociar la placa con movimientos horizontales y verticales hasta que este cubierta homogneamente con el reactivo. 3. Secar la placa como lo indique la tcnica. 4. Si requiere calentamiento, encender la estufa y seleccionar la temperatura. 5. Esperar que la temperatura se estabilice y colocar la placa. 6. Remover la placa despus del tiempo indicado en la tcnica.

PROCEDIMIENTO
Documentacin
Actualmente se puede realizar la documentacin fotografiando la placa a longitud de onda corta y larga. Cuando la placa es derivatizada se toman imgenes antes y despus de la derivatizacin. Adicionalmente, se puede realizar un scner de la placa y ver el cromatgrama. En cuanto a la placa, para almacenar se puede identificar el cdigo o nmero de muestra en la esquina superior. En la parte posterior adicionar informacin adicional como fecha, principio activo y otros, empleando cinta de enmascarar.