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Microscpio ptico

Prof.Teresa Condeixa 0809

CLUBE DE CINCIAS

Discentes:

Jessica Karoline Marianne Reis Mauricio Correia Rogrio Zampieri

MICROSCOPIA

Cincia que estuda os mtodos e as aplicaes em que se usa o Microscpio para observao de objetos, ou por menores com dimenses inferiores ao limite de resoluo do olho humano (0,1 mm).

Histrico
Desenvolveu um tipo de microscpio composto (que possui duas lentes) para observaes.

Robert Hooke (1635-1703)

Anton von Leeuwenhoek (1632-1723)

Classificao dos Microscpios Em funo do nmero de sistemas de lentes

Microscpio simples ou Lupa;

Microscpio composto.

Classificao dos Microscpios Compostos Em funo do principio de iluminao

Fotnico
Electrnico

Componentes do Microscpio ptico Composto

Ocular Tubo ou Canho Revlver Coluna ou Brao Charriot ou Pina Objectivas Mesa ou Platina Condensador Parafuso macromtrico Parafuso micromtrico

Diafragma
Espelho ou Fonte de luz P ou base

http://www.slideshare.net/nunocorreia/microscpio

http://www.slideshare.net/nunocorreia/microscpio

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Classificao dos Microscpios Compostos

Os microscpios dividem-se em duas categorias: Microscpio ptico: funciona com um conjunto de lentes que ampliam a imagem por um feixe de luz que pode ser: Microscpio de fundo escuro. Microscpio de contraste de fase Microscpio de contraste interferencial. Microscpio de fluorescncia.

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TIPOS DE MICROSCOPIA
Microscopia de fundo escuro

(DAVIDSON E ABRAMOWITZ,2005)

Baseia-se no princpio de que a luz dispersa pela superfcie dos materiais que possuem diferentes ndices de refrao. A luz dispersada entra na objetiva e o objeto aparece iluminado e brilhante sobre um fundo escuro. A luz atinge o material a ser analisado e somente os feixes desviados pelo objeto percorrem as objetivas e as oculares, formando a imagem (Taboga, 2001).

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Aspecto de clulas vivas observadas com: microscpio ptico de campo luminoso (a); microscpio ptico de contraste de fase (b) (Reis, 2003).

Microscopia de contraste de fase A luz que passa atravs de materiais com densidades ligeiramente diferentes refratada ou desviada do seu trajeto original. Variaes mnimas de fase, devidas s diferenas de ndice de refrao dentro do objeto, so ampliadas e transformadas em mudanas de amplitude (intensidade) as quais so visualizadas como diferenas de contraste na imagem (Reis, 2003).

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(DAVIDSON E ABRAMOWITZ,2005)

http:www.tod osfauna.com

Microscopia de contraste interferncial Trabalha com a defasagem dos comprimentos de ondas. Assim, a defasagem gera uma deformao na imagem, permitindo o contraste interferncial, aumentando a superfcie do material analisado. Esse tipo de microscopia utiliza-se de prismas pticos posicionados na passagem da luz. Esses prismas modificam as fases luminosas que contrastaro com o meio em que se encontra o material a ser observado.

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Microscopia de fluorescncia
Permite observar microorganismos capazes de absorver a energia da radiao ultravioleta emitindo depois radiao dentro do espectro de luz visvel. Microorganismos corados por um corante fluorescente aparecem como objetos luminosos Na microscopia de fluorescncia pode-se detectar compostos naturalmente fluorescentes, como a clorofila, lignina de paredes celulares, elastina e colgeno (Taboga, 2001).

(DAVIDSON E ABRAMOWITZ,2005)

Cienciahoje.uol.com.br

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Classificao dos Microscpios Compostos

Microscpio eletrnico: amplia a imagem por meio de feixes de electres, estes dividem-se em duas categorias:
Microscpio de Transmisso Microscpio de Varredura.

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Como que se calcula o valor da ampliao?

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Como se calcula o valor da ampliao?

Ampliao total

ampliao da ocular

x x

ampliao da objectiva

400x

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Ampliaes utilizadas/ rea real observada.

Ao ampliar uma imagem reduz-se a rea observada

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Visualizao ptica
P

A IMAGEM : ampliada; invertida da esquerda para a direita: Invertida de baixo para cima

O microscpio nos d imagens invertidas. As lentes de aumento (lentes convergentes) so posicionadas nas extremidades de um tubo cilndrico. As lentes da parte superior do tubo se chamam oculares e as do extremo inferior, objetivas.

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As Oculares e Objetivas
As oculares mais utilizadas so as de ampliao 10x, mas nos microscpios binoculares tambm existem oculares de 12,5x, 8x e 6x. As objetivas podem ser designadas em secas e de imerso. Existem objetivas de 10x, 40x, 50, 90x, 100x.

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As Objetivas Secas e de Imerso

As objetivas de 10x, 40x e 50x so secas pois entre a preparao e a objetiva existe somente ar. As de 90x e 100x so as de imerso, uma vez que, para as utilizar, necessrio colocar uma gota de leo de imerso entre elas e a preparao, a qual, por ter um ndice de refrao semelhante ao do vidro, evita o desvio do feixe luminoso para fora da objetiva.

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Utilizao correta do MOC para Objetivas Secas

http://www.prof2000.pt/users/biolo gia/relacao.htm

Desce-se o condensador Sobe-se o diafragma para que a iluminao no seja muito intensa. Escolhe-se a menor objetiva. Seguidamente foca-se Se ainda no possivel uma boa visualizao, passe para uma outra objetiva de maior capacidade. Fazendo uma primeira aproximao da objetiva e s depois a focagem por afastamento usando o parafuso macromtrico e posteriormente o micromtrico para focagem final.

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Utilizao correta do MOC para Objetivas de Imerso

Sobe-se o condensador Abre-se o diafragma Regula-se a iluminao da fonte luminosa no mximo, de modo a conseguir-se uma iluminao intensa, apropriada observao de lmina coradas. Coloca-se na lmina uma gota de leo de imerso e procede-se focagem. Primeiro aproximando a objetiva lmina, seguidamente a focagem propriamente dita com o parafuso macromtrico e finalmente o aperfeioamento da focagem com o parafuso micromtrico.

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Em quantas vezes um microscpio pode aumentar a imagem?

Os microscpios no podem ampliar, indefinidamente, um objeto. Isto acontece por que h um limite de resoluo da imagem.

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Cuidados com o Aparelho

a) Observe se a voltagem compativel com a do aparelho; b) As lentes da objetiva nunca devem tocar a lmina; c) No tocar as lentes. Se estiverem sujas, limpe-as com algodo ou com pano; d) Limpar sempre a objetiva de imerso aps o uso. Se o leo estiver endurecido, poder ser aplicado um pouco de xilol sobre o algodo. Cuidado, pois o excesso de xilol pode dissolver o cimento das lentes; e) No esquecer a lmina no microscpio aps o uso; f) Manter a platina sempre limpa e seca; g) No inclinar o microscpio a maioria tcnicas empregadas exigem que a lmina seja examinada sempre na posio horizontal; h) Dever ser guardado sempre coberto ou em sua caixa; i) No deixe a fonte de luz acesa quando no estiver utilizando o microscpio.

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Histrico
Em 1931, na Alemanha, Knoll e Ruska desenvolveram o primeiro microscpio

eletrnico, com base no experimento de Bush (1926) que provou que era possvel focalizar um feixe de eltrons utilizando uma lente eletromagntica circular.

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Microscpios Eletrnicos
Utilizam um feixe de eltrons para formao da imagem.
Possuem maior poder de resoluo do que os microscpios pticos, sendo assim, possvel observar organelas muito pequenas. A ampliao mxima de um microscpio ptico pode chegar a 1500X, entretanto, o microscpio eletrnico pode gerar imagens com aumento de 300mil X ou mais!! Com este poder de resoluo foi possvel a descoberta de novas estruturas ou at mesmo, uma reviso daquelas j conhecidas.

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Microscpio

Eletrnico

de

Varredura:

Funciona como uma super lente de aumento, ou seja, no podemos olhar o interior das clulas mas possvel observar toda a sua superfcie, alm de outros objetos.

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Microscpio Eletrnico de Transmisso:

Neste tipo aparelho possvel observar o interior das clulas evidenciando ncleo, mitocndrias, cloroplastos, lisossomos...

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MOC Microscpio ptico Composto MET Microscpio Electrnico de Transmisso

Imagens

Alga

Colnia

Tubos Dentrios

Imagens

Folha (capilar)

Folha (capilar)

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Referncias
ABRAMOWITZ, M.;, SPRING, K.R.; FLYNN, B.O.; LONG, J.C.;TCHOURIOUKANOV, K.I; DAVIDSON M.W. Disponvel em:http://micro.magnet.fsu.edu/primer/photomicrography/index.html (Acesso em 10/04/2005). DAVIDSON, M.W.; ABRAMOWITZ, M. Optical microscopy .http://microscopy.fsu.edu. (Acesso em 17/04/2005). REIS, C.M.G. Microscopia Disciplina de Biologia Celular.Escola SuperiorAgrria, Instituto Politcnico de Castelo Branco, Laboratrio de BiologiaVegetal. 24p. Apostila. 2003.

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TABOGA, S.R. Micoscopia. In: RECCO-PIMENTEL, S.M.; CARVALHO,H.F. A clula 2001.cap. 2.. p. 06-14. 2001WEISS, D.G.; MAILE, W.; WICK, R.A. Video microscopy. http: www.portalsaofrancisco.com.br

http://www.ufrgs.br/agrofitossan/agr04401vd/microscopia.htm

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Obrigado