Tema No.

11 Diseminacin viral (Transmisin)

Alba Nava

Febrero 2009

Tema No. No. Diseminacin Viral Tema 11. 8. Transmisin

Mecnica Propagacin vegetativa

Semilla, Polen
Vectores insectiles:

No Circulativos: No persistente Semi persistente Circulativos: Propagativos

No propagativos

Vectores no insectiles : Hongos, caros, Nematodos

Tema No. No. Diseminacin Viral Tema 11. 8. Transmisin

Por qu la transmisin?
El virus no abandona espontneamente la planta (requiere ayuda)
Transmision vegetativa por semilla Infeccin primaria Vectores, Mecnica

Infeccin primaria secundaria

Enfermedad Monocclica

Enfermedad Policclica

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Mecnica
TMV

Enferma Sana Contacto natural de hojas

Enferma Sana Manipulacin

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Mecnica

Inhibidores Condiciones ambientales Hospedero para propagacin Plantas indicadoras Tejido especifico (floema)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Vegetativa

Abutilon mosaic virus

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Semilla

Lettuce mosaic virus

Infeccin de gametas antes de fertilizacin (acceso indirecto al embrin) Invasin del embrin despus de fertilizacin (acceso directo al embrin)

18 % virus

Enferma

Semilla con virus

Plntula infectada con virus

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Semilla

Lettuce mosaic virus

Estrategia viral perfecta para sobrevivir entre ciclos de siembra Rango estrecho de hospederos de plantas anuales Transmitidos por vectores en forma no persistenten o con poca movilidad

Tema No. 11. Diseminacin Viral

plant-disease.ippc.orst.edu

Polen
Prunus necrotic ringspot virus en cereza cida

rbol infectado en floracin

Flor de rbol infectado Virus en el polen

El virus se mueve del polen infectado hacia flores de rboles sanos

El virus se mueve de la flor hacia el resto del rbol

rbol enfermo

Tema No. No. Diseminacin Viral Tema 11. 8. Transmisin

Cul es el medio ms comn de diseminacin viral en el campo?

VECTORES

Virus transmitidos (%)

Aleyrodidae

Delphacidae

Cicadelidae

Pseudococcidae

Membracidae

Nematodos

Aphididae

Psyllidae

Hongos

Acaros

Coleoptera

Fuente: Eppler et al., 2001

Thysanoptera

Tema No. No. Diseminacin Viral Tema 11. 8. Transmisin

Eficiencia de diseminacin viral por vectores

Forma de alimentacin El virus sobrevive en el vector Adaptacin al hospedero Plantas ms atractivas al vector
Amarillamiento Cambios en el contenido de a.a.

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Vectores insectiles: No Circulativos: No persistente Semi persistente Circulativos: No propagativos Propagativos

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Vectores insectiles: No Circulativos:

Partcula viral no atraviesa membranas celulares del vector No persistentes

Semipersistente

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Vectores insectiles: No Circulativos: No persistentes

No hay una asociacin de especificidad con el vector Algunos requieren de una protena no estructural Helper component (HC) involucrada en la unin al virin y al vector, regula especificidad y la eficiencia de la transmisin El virus es transportado en la punta del estilete Ingestin: 1-10 min

Retencin: 1-10 min

Tema No. 11. Diseminacin Viral

No Circulativos, No persistentes

Ingestin

Inoculacin

Ingestin: 1-10 min Retencin: 1-10 min

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Canal alimenticio

Maxilar

Canal salival

Mandbula

Corte transversal del estilete de vectores perforadores-chupadores

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Organizacin del genoma de un potyvirus

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Organizacin de la protena HC. A) Tres regiones esenciales de HC. B) Localizacin de la secuencias de amino cidos de unin al vector, unin al ARN, unin a la cpside. C) Funcin biolgica de las regiones de la HC, el triangulo indica que el motif del terminal C prolina-treonina-lisina (PTK) esta involucrado en la transmisin por fidos, el motif lisina-isoleusina-treoninacisteina (KITC) del terminal N es esencialmente para la transmision por afidos. La proteina HC actua como supresor de silenciamiento de genes post transcripcional (PTGS)(Siller 2006)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Receptor de Superficie celular

Tejido del vector

Moleculas HP Canal alimenticio Dominio de superficie de CP

Virion

Funcin del helper component (HC) en fidos transmisores de virus no circulativos. HC acta como puente reversible uniendo el virin a la cutcula del maxilar del canal alimenticio y del esfago del fido. (Syller 2006)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Organizacin del genoma de Cauliflower mosaic virus (CaMV) P2 ATF (II) : factor de transmisin por fidos

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Localizacin del receptor

Estilete entero Magnificacin Estilete mandibular

Microscopia Luz

Epifluorescencia

Ensayo de interaccin in vitro de estiletes disectados de afidos y P2-GFP. Canal alimenticio (FC) y salival (SC), ducto comn (CD). (Uzest y col. 2007)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Vectores insectiles: No Circulativos, No persistente:

Potyviridae (Potyvirus-fidos)-HC Caulimoviridae (Caulimovirus- fidos)-HC

Cucumovirus (fidos)
Alfamovirus (fidos) Potexvirus (fidos)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

No Circulativos, No persistente

Stylet-borne: el virus sin asociacin especfica o como contaminante de la punta distal del estilete, es inoculado en la prxima planta cuando el vector comienza a alimentarse de ella, el vector acta como una aguja Ingestin-egestin: virus es adherido a mltiples sitios de la parte anterior del canal alimentario durante la ingestin de material de la planta y es liberado durante los periodos de regurgitacin y salivacin, el vector acta como una jeringa Ingestin-salivacin: virus esta asociado con mltiples sitios de la parte anterior del canal alimentario, pero solo se transmiten los virus unidos a la punta proximal del maxilar del estilete, donde el canal alimentario y salival estn fusionados. El virus es liberado por salivacin

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Vectores insectiles: No Circulativos:

Semipersistentes

Virus asociado con el intestino anterior (estomodeo) del vector

Closterovirus Sequivirus (fidos) (fidos)

Waikavirus-HC

(fidos)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

No

Circulativos:
Semipersistentes
CTV

Ingestin: min. 10 min Retencin: 1-7 das

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Vectores insectiles: Circulativos:

Virus atraviesa diferentes rganos del vector Mecanismos de endocitosis/exocitosis
No propagativos (Luteovirus, Enamovirus, Geminiviridae)

Propagativos

(Reovirus, Rhabdovirus, Bunyavirus)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Circulativos-no propagativos

Ingestin: Horas- das Inoculacin: Horas- das Retencin: 1da-semanas

Transporte de luteovirus en el cuerpo del fido. Ingestin de partculas por el canal de alimentacin (fc) y tracto digestivo, del intestino medio posterior (mesenteron) (pmg) e intestino posterior (proctodeo) (hg) pasan a la hemolinfa (he). Los viriones entran a las glndulas salivales accesorias (asg) y son inoculados a la planta hospedero por el canal salival (sd). fg: intestino anterior (estomodeo), psg: glndulas salivales principales, sto: estomago (Brault et al. 2007)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

intestino

hemolimfa

ASG

Modelo de transporte transcelular de luteovirus a travs de las clulas del intestino y las glndulas salivales accesorias (ASG) apl: plasmalemma apical, mvb: cuerpo multivesicular, mlv: vescula multilamelar, vs: vescula no cubierta, tv: vesculas tubulares, endo: endosoma, lys: lisosomas, bpl: plasmalemma basal, bl: lamina basal, sc: canal salival, sy: simbionin, v: virion, cp: cavidad cubierta, Cyto: citoplasma, cv: vescula cubierta, lu: lumen. (Brault et al. 2007)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Intestino medio

Intestino posterior

Partculas de luteovirus en el intestino (gut) del fido. apl: plasmalemma apical, mvb: cuerpo multivesicular, mlv: vescula multilamelar, vs: vescula no cubierta, tv: vesculas tubulares, bpl: plasmalemma basal, bl: lmina basal, r: ribosoma, lu: lumen

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Viriones en las glndulas salivales accesorias bl: lmina basal, bpl: plasmalemma basal, vc: vesculas cubiertas, apl: plasmalemma apical, r: ribosoma, lu: lumen

Tema No. 11. Diseminacin Viral

BWYV 6.4 Sin la proteina RT

readthrough protein

BWYV 5.123L Cambios 3 aa en parte central de la proteina RT

Modelo hipottico para la adquisicin de Beet western yellow virus (BWYV) en la hemolimfa ER: receptor endoctico (reconoce motif en CP) CR: receptor de captura (reconoce un motif de la proteina RT) lu: lumen, apl: plasmalemma apical, cyto: citoplasma, bpl: plasmalemma basal, bl: lmina basal, he: hemolinfa

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Circulativos-propagativos
El virus atraviesa diferentes rganos del vector El virus se reproduce en el vector Adquisicin durante el estado de larva Transmisin durante 2do instar y adulto

http://www.eppo.org/QUARANTINE/virus/TSW_virus/

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Coleopteros
El virus puede ser inoculado en una herida o mordida, puede translocarse rpidamente por los elementos del xilema lejos del sitio de inoculacin y alimentacin Circulativos, el virus es isomtrico, los determinantes de transmision se encuentran en la regurgitacin Cowpea severe mosaic comovirus (ARNasa pancretica) (CSMV) Bromovirus Carmovirus Comovirus Sobemovirus Tymivirus
Cerotoma arcuata

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Tipo de transmisin No circulativos No persistente

Tiempo

Retencin
Pocas horas

Adquisicin
Seg. a min.

Inoculacin
Seg. a min.

Latencia

Semipersistente Das o semanas

Circulativos No propagativos Semanas-vida Propagativos (*)

Seg. a min.

Seg. a min.

Horas-das

Horas-das

Da-semanas

* El virus se reproduce en el vector

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Hongos
Olpidium
Virus es llevado por zoosporas unidas a la superficie de la planta, penetran la pared y membrana celular mecnica y enzimticamente, al entrar en el citoplasma el virus es liberado por el hongo Circulativos

Polymixa

Spongospora

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Olpidium
Necrosis del tabaco (Necrovirus)

Necrosis del pepino (Tombusvirus) CP y zoosporas determinantes de transmisin Venas grandes de la lechuga (Varicosavirus)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Olpidium
Necrosis

del pepino (CNV Tombusvirus) CP y zoosporas determinantes de transmisin

La unin CNV/zoospora unin poliovirus/clula husped, Sugiere conservacin evolutiva de caractersticas funcionales de la cpside de virus de plantas y animales (Ann. Rev. Phytop. 2004.42:211-241)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Polymixa
Mosaico del trigo (Bymovirus)

Nervaduras necrticas amarillas de la remolacha (Furovirus)

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Spongospora
Enanismo de los tallos Potato mop top virus

de papa

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Leprosis en ctricos
www.scielo.br/img/revistas/sp/v32n3/a01fig03.gif

caros (semipersistente?)
Orchid fleck virus

www.plbio.kvl.dk/~thluj3/ symptoms/cymbofv.html www.rib.okayama-u.ac.jp/ pmi/2002/image/6.jpg

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Nematodos
Nepovirus (isomtricos)
Grapevine fanleaf virus Xiphinema index

Tobravirus (tubulares)
Tobacco rattle virus Trichodorus spp.

Ambos tienen 2 cadenas simples de ARN (+),

encapsidadas en partculas separadas RNA-2 contiene determinantes para transmisin (CP) La mayora son transmitidos por semilla y tienen un rango amplio de hospederos

Tema No. 11. Diseminacin Viral

ARN1 ARN2

Vpg Vpg

63kDa

Helicasa

Pro

Polimerasa

(A)n

MP

CP

(A)n

Nematodos

Nepovirus (isomtricos)
Grapevine fanleaf virus - Xiphinema index

ARN1 ARN2

Helicasa CP 2b

Polimerasa 2c

C-C

TS

Tobravirus (tubulares)
Tobacco rattle virus -Trichodorus spp.

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Nematodos
Los tres tobravirus (Tobacco rattle, Pea early browning, Pepper ringspot) son transmitidos por el nematodo Trichodorus
11 especies transmitidas por dos generos: Paratrichodorus y Trichodorus 12 de 36 nepovirus son transmitidos por el nematodo longidorus 3

Xiphinema

generos:

Longidorus,

Paralongidorus,

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Nematodos
La interaccin entre vector y virus es especfica La poblacin de una especie del vector puede

diferir en la habilidad de transmitir diferentes aislamientos de un virus esta correlacionada con propiedades de la cubierta proteica serolgicas

La interaccin esta determinada por el ARN-2 y

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Mecanismos de transmision
Transmisin semi-persistente Puede persistir en el nematodo por semanas hasta

ms de un ao, dependiendo de la especie y la actividad alimenticia de los nematodos

No se han detectado viriones dentro de la clulas El tiempo de ingestin puede variar desde 15

minutos hasta horas, afecta la eficiencia eficiencia hospedera puede depender de

La

la

planta

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Mecanismos de transmisin
La retencin en el aparato digestivo y la liberacin son importantes El mecanismo de retencin puede involucrar

carbohidratos en algunos nematodos

La regin terminal C de la cubierta proteica de los tobravirus puede interactuar con protenas helper no estructurales

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Criterios para demostrar la transmisin por nematodos Demostrar la infeccin de la planta

Hacer experimentos con nematodos Controles apropiados para descartar otro tipo de transmisin Identificar los nematodos Caracterizar el virus

Tema No. 11. Diseminacin Viral

Procedimiento
Los nematodos deben tomar el virus de una planta fuente Los nematodos deben retener el virus que

infectar plantas indicadoras

Demostrar que no hay contaminacin