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2º semana

2º semana Célula - Postulados - Microscopía

Célula - Postulados - Microscopía

2º semana Célula - Postulados - Microscopía

DESCUBRIMIENTO DE LA CÉLULA

El microscopio ha permitido el estudio de la célula.

Los primeros microscopios data de los años 1600.

1. Jans y Zacharias Janssen (1580-1638) desarrollaron los primeros microscopios

compuestos 1590.

1 . Jans y Zacharias Janssen (1580-1638 ) desarrollaron los primeros microscopios compuestos 1590. 2 .

2. Galileo (1564-1642), científico italiano, realizó microscopio compuesto (dos lentes montadas en cada extremo de un tubo hueco) con el que observó insectos.

1 . Jans y Zacharias Janssen (1580-1638 ) desarrollaron los primeros microscopios compuestos 1590. 2 .

3. Robert Hooke (1635-

1703), mejoró el MC (30X) y observó cortes finos de corcho. 1665 en su libro

micrographia, usó la

palabra “células”.

No observó células vivas, se le reconoce haber sido la primera persona que

observó e identificó las

células.

3 . Robert Hooke (1635- 1703), mejoró el MC (30X) y observó cortes finos de corcho.
3 . Robert Hooke (1635- 1703), mejoró el MC (30X) y observó cortes finos de corcho.

4. Anton van Leeuwenhoek

(Royal Society of London) (1632-1723), construyó microscopios simples que aumentaba los objetos 200 veces.

4. Anton van Leeuwenhoek ( Royal Society of London ) (1632-1723), construyó microscopios simples que aumentaba

Observó células sanguíneas, bacterias y organismos simples en gotas de agua

“animalículos”, espermatozoides.

Microscopio de bronce hecho a mano, 1770

Descripción del microscopio de Leeuwenhoek

El Microscopio

Mikros= pequeño Skopein= ver

MICROSCOPIO ÓPTICO

MICROSCOPIO ÓPTICO Tres sistemas: 1. Mecánico 2. Óptico 3. Iluminació n

Tres sistemas:

1. Mecánico

  • 2. Óptico

  • 3. Iluminación

MICROSCOPIO ÓPTICO

MICROSCOPIO ÓPTICO
MICROSCOPIO ÓPTICO
Microscopio óptico convencional con doble óptica para aprendizaje

Microscopio óptico convencional

con doble óptica para aprendizaje

Microscopio óptico

Microscopio óptico de luz ordinaria (campo claro)

La calidad de la imagen observada depende del poder de

resolución = capacidad del microscopio de ver la distancia entre dos puntos del objetivo.

A mayor calidad del microscopio mayor poder de

resolución. El poder de resolución depende del ángulo de la luz incidente.

Microscopio óptico de campo

oscuro

Fondo oscuro, se coloca en el condensador un anillo que permite el paso de rayos de luz

que serán enviados, reflejados, si no

encuentran nada no entran en el objetivo y no se ve nada. Ej espiroquetas.

Ventajas

  • 1. Observar partículas dispersas en un medio homogéneo.

  • 2. Observación del movimiento Browniano.

  • 3. Observación de preparaciones sin colorear.

  • 4. Valiosa observar Treponema pallidum, diámetros superior a 0.2μ.

Desventajas

  • 1. Difícil acceso al microscopio por condensador especial (alto costo).

  • 2. No deja visualizar estructuras celulares especificas, solo bordes

de células o partículas.

Desventajas 1. Difícil acceso al microscopio por condensador especial (alto costo). 2. No deja visualizar estructuras

Microscopio de

fluorescencia

Incorpora lámpara especial, actúa emitiendo luz excitadora de los fluorocromos, con los que se tiñen las muestras a observar, posee un filtro especial, que permite el paso de la luz emitida por el fluorocromo.

Para observar es necesario teñirlas con sustancias fluorescentes o

marcarlas con sustancias conjugadas

con fluorocromos, como los anticuerpos.

Microscopio de fluorescencia Incorpora lámpara especial, actúa emitiendo luz excitadora de los fluorocromos , con los

Espermatozoides humanos

Ventajas

  • 1. Permite un alto contraste entre la señal y el ruido.

  • 2. Utilizando anticuerpos dirigidos contra una proteína permite ubicarla en una célula (y en relación a otras proteínas o estructuras).

  • 3. Versatilidad de estudiar funciones y procesos en células vivas.

  • 4. Inmunofluorescencia .

Ventajas 1. Permite un alto contraste entre la señal y el ruido. 2. Utilizando anticuerpos dirigidos
Ventajas 1. Permite un alto contraste entre la señal y el ruido. 2. Utilizando anticuerpos dirigidos

Microscopio óptico de contraste de fases

Las estructuras internas de las células presentan diferentes índices de

refracción y también diferente al medio que les rodea, hace posible observación de material en vivo, sin necesidad de tinción. Basado en las diferentes densidades que la célula posee, la luz que atravieza la

célula pasa a diferentes velocidades refractantes o desviándose en diferente ángulo, produciendo un contraste entre lo enfocado y el entorno.

Microscopio óptico de contraste de fases Las estructuras internas de las células presentan diferentes índices de

Ventajas

  • 1. Produce imagen brillante contra un fondo oscuro sin halos de difracción de una célula viva.

  • 2. Determinación del índice de refracción.

  • 3. Determinación de sólidos, masa seca y espesor de las estructuras celulares.

Desventajas

  • 1. Alto costo del equipo por los diferentes aditamentos utilizados.

  • 2. Costo alto por el mantenimiento de la muestra de células vivas.

  • 3. La microcinematografía requerida para mirar los procesos que realiza la célula in vivo requiere de equipos especiales y personal entrenado.

Microscopio

electrónico

Ultraestructura.

Investigación.

Electrones por tubo vacío en lugar luz y electroimanes en lugar

lentes.

Poder resolución mayor (25 mil veces y más).

Imagen sobre una pantalla excitada por electrones.

1.M.E. De Transmisión:

  • - Estructuras internas celulares.

  • - Corte muy fino (ultramicrótomo),

2. M.E. De Barrido:

  • - Los electrones no atraviezan la muestra, son reflejados y recogidos por un amplificador.

  • - Estructura externa células.

  • - No hay cortes pero si fijaciones.

Técnica observación microscópica

1. Fijación: (física o química). Metanol, formol, bicromato, calor, frío, etc.

  • 2. Inclusión: (parafina o epoxi).

  • 3. Deshidratación

  • 4. Corte (micrótomo, ultramicrótomo)

  • 5. Tinción

La célula se puede estudiar “in vivo” e “in vitro”

Coloraciones para Microscopía óptica

Observación de diferentes estructuras celulares, tomando en cuenta las características de las diferentes coloraciones se logra

resaltar estructuras. Coloraciones básicas, ácidas, naturales y sintéticas.

Coloraciones básicas: azul de metileno, azur, resaltan las estructuras ácidas de núcleo celular, cromatina.

  • Coloraciones ácidas: eosina tiñen las proteínas básicas, enzimas lisosomales en los gránulos.

La imagen microscópica, su intensidad y grado de color, dependen la calidad de la coloración, solución de trabajo (pH, concentración, estabilidad, etc.) y del procedimiento técnico.

Microscopio óptico y electrónico

Tamaños relativos

Tamaños relativos

TEORÍA CELULAR - POSTULADOS

Teoría Celular

1824, René Dutrochet, primero en establecer la célula era la unidad básica de la estructura, todos los organismos están formados por células. En 1833, Robert Brown (1773-1858), botánico escocés, descubrió que las células de hojas de orquídeas tenían una estructura central (núcleo).

  • Purkinje 1840, usó la palabra protoplasma para referirse al material

vivo en interior de las células.

1838 Matthias Schleiden botánico y 1839 Theodor Schwann, zoólogo; reconocieron las similitudes fundamentales entre los dos tipos de células; propusieron:

Todos los organismos están compuestos de una o más células.

La célula es la unidad estructural de la vida.

RUDOLF VIRCHOW (1858) presentó evidencia que las células se reproducen para formar nuevas células, propuso:

Las células sólo pueden originarse por división de una célula preexistente.

 RUDOLF VIRCHOW (1858) presentó evidencia que las células se reproducen para formar nuevas células, propuso:

POSTULADOS TEORÍA CELULAR

1. Todos los organismos están compuestos de células.

  • 2. En las células tienen lugar las reacciones metabólicas del

organismo.

  • 3. Las células provienen de otras células preexistentes.

  • 4. Las células contienen el material hereditario.

Características de la célula

Tiene vida.

Capacidad cultivar; 1951 George Gey “Johns Hopkins University”, primer cultivo células humanas.

Henrietta Lacks HeLa, in vitro, crecimiento indefinido, herramienta biólogos celulares y moleculares.

Características de la célula  Tiene vida.  Capacidad cultivar ; 1951 George Gey “Johns Hopkins

Propiedades básicas de las células

1.Complejas y organizadas

  • 2. Programa genético y medios para usarlo

  • 3. Reproducen

  • 4. Obtención y uso energía

  • 5. Reacciones químicas

  • 6. Actividades mecánicas

  • 7. Reaccionan a estímulos

  • 8. Autorregularse

ORGANIZACIÓN ESTRUCTURAL DE LAS CÉLULAS

1937 Chatton propuso:

  • 1. Células procarióticas

  • 2. Células eucarióticas

CÉLULAS C. COMUNES
CÉLULAS
C. COMUNES
C. DIFERENTES
C. DIFERENTES
  • Envoltura nuclear.

  • Cromosomas complejos (DNA).

  • Organelos citoplasmáticos complejos.

  • Organelos especializados para

respiración y fotosíntesis.

  • Citoesqueleto

  • Cilios y flagelos.

  • Vesículas membranosas (endocitosis

y fagocitosis).

  • Pared celular

  • División celular con formación huso mitótico.

    • Dos copias genes (diploide).

    • Meiosis y fecundación

Membrana plasmática.

  • Información genética codificada en el DNA.

  • Mecanismos similares transcripción y traducción .

    • Vías metabólicas compartidas

(glicólisis). Aparato similar para la conservación de

Eº en forma ATP.

  • Mecanismos semejantes para la

fotosíntesis.

  • Mecanismos parecidos para sintetizar e

insertar proteínas membrana.

  • Estructura similar proteosomas

(arqueobacterias y eucariota)

Esquema de una ultraescructura de una bacteria idealizada

Esquema de una ultraescructura de una bacteria idealizada

Diferencia entre célula vegetal y animal

Diferencia entre célula vegetal y animal CÉLULA ANIMAL 1 Membrana plasmática 2 Retículo endoplasmático granular 3

CÉLULA ANIMAL

1 Membrana plasmática

  • 2 Retículo endoplasmático

granular

  • 3 Retículo endoplasmático liso

  • 4 Aparato de Golgi

  • 5 Mitocondria

  • 6 Núcleo

  • 7 Ribosomas

  • 8 Centrosoma (Centriolos)

  • 9 Lisosomas 10 Microtúbulos (citoesqueleto)

CÉLULA VEGETAL

1 Membrana plasmática

  • 2 Retículo endoplasmático

granular

  • 3 Retículo endoplasmático liso

  • 4 Aparato de Golgi

  • 5 Mitocondria

  • 6 Núcleo

  • 7 Ribosomas

  • 8 Cloroplasto

  • 9 Pared celulósica

10 Vacuola 11. Glioxisomas

CÉLULA ANIMAL

CÉLULA VEGETAL

Cultivo celular

Técnicas que permiten el mantenimiento de las células 'in vitro', manteniendo al máximo sus propiedades fisiológicas, bioquímicas y genéticas.

Cultivo celular Técnicas que permiten el mantenimiento de las células 'in vitro', manteniendo al máximo sus

Cultivo celular

Ventajas

-Control preciso del medio ambiente (pH)

-Caracterización y homogeneidad

-Economía (muestra pequeña)

-Motivaciones éticas

Desventajas

-Técnica sensible (contaminantes crecimiento acelerado).

  • - Cantidad y costo.

  • - Inestabilidad.

Validez del modelo “in vitro”.

ÁREAS DE INTERÉS EN EL CULTIVO DE

TEJIDOS Y CÉLULAS

ÁREAS DE INTERÉS EN EL CULTIVO DE TEJIDOS Y CÉLULAS

CLASES DE CULTIVOS CELULARES

CLASES DE CULTIVOS CELULARES

CLASES DE CULTIVOS CELULARES

CLASES DE CULTIVOS CELULARES

Perspectiva Humana

Cultivo celular y de órganos en laboratorio in vitro. Transplante de órgano (evitar rechazos HCM). Trasplante de médula ósea (leucemias).

Aplicaciones:

  • 1. Virología (vacunas).

  • 2. Investigación del cáncer.

  • 3. Inmunología.

  • 4. Ingeniería de proteínas (interferón).

  • 5. Interacción y señalización celular.