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NUTRICION
Nutrientes para la sntesis
Energa para biosntesis ANABOLISMO (biosntesi)
Productos de desecho (Productos de fermentacin, cidos, CO2, etc; aceptores de electrones reducidos)
CATABOLISMO
En el ecosistema de ro Tinto se puede encontrar a ejemplares como esta Euglena mutabilis. Foto: Linda Amaral-Zettler.
Imagen de la costa gallega despus del vertido de petrleo del Prestige en 2002. Fotografa cortesa de Ingrid Salazar.
Imgenes de microscopa ptica de contraste de fases que muestran microorganismos fototrficos caractersticos de los tapetes microbianos del Delta del Ebro. A. Amphora eggregia. B. Lyngbya aestuarii. C. Microcoleus chthonplastes. D. Chroococcus sp. un miembro del grupo Gloeocapsa. E. Aphanothece sp. un miembro del grupo Cyanothece. F. Una nueva bacteria roja del azufre. (A, B, C, E y F, Barra=25 m; D, Barra=50m).
BIOELEMENTOS
Las clulas microbianas tienen la capacidad para llevar a cabo reacciones qumicas y organizar sus molculas para formar estructuras especficas. La expresin final de esta organizacin es el crecimiento (replicacin). Antes de que una clula se divida, deben ocurrir muchas reacciones qumicas en la clula, estas reacciones se denominan metabolismo.
Reacciones energticas
Reacciones de ensamblaje Inclusiones Envoltura Flagelo Pili Citosol Poliribosomas Nucleoide Estructuras de E. coli
Metabolitos PO 3- precursores
4
G L U C O S A
NH3
Productos energticos
Nucleoide
DNA (cromosoma haploide, ~1 molcula)
molculas/clula)
Citosol
1,000 protenas (~10
5 6
molculas/clula)
Cpsula 1 complejo polisacrido Pared celular Peptidoglucano (1 molcula/clula) Periplasma 50 protenas (~10
4
Polisomas
molculas/clula) ~ 18,000 ribosomas/clula en 1,000 polisomas 55 protenas (~106 molculas, 1 por cada ribosoma 70S) molculas/clula) 3 RNAr (5S, 16S, 23S; 56,000 molculas; 1 por cada ribosoma 70S) 1,000 RNAm (1,400 molculas, 1 por polisoma)
molculas/clula)
A las sustancias en el medio ambiente utilizadas por los organismos para el catabolismo y el anabolismo, se les llama nutrientes. Dicho de otro modo, para obtener energa y elaborar nuevos componentes celulares, los organismos tienen que disponer de materias primas o nutrientes. Son sustancias que se emplean en la biosntesis y produccin de energa. Son necesarios para el crecimiento microbiano Dependiendo de las cantidades que se requieran se habla de macronutrientes y micronutrientes. Existen diferencias en cuanto a los requerimientos nutricionales de cada microorganismo.
Nutrientes
Los factores ambientales, como la temperatura, el nivel de oxgeno y la concentracin osmtica del medio son esenciales para cultivar con xito los microorganismos.
Nutrientes
MACRO
Carbono. Nitrogeno. Fosforo. Azufre Potasio Magnesio Sodio Calcio Hierro
MICRO
Cromo Cobalto Cobre Manganeso Molibdeno Niquel Selenio Tungsteno Vanadio y Zinc.
Son captados por los microorganismos en cantidades relativamente grandes. Ms del 95% del peso seco de la clula microbiana .
Macronutrientes o macroelementos
Son captados por los microorganismos en cantidades relativamente grandes. Ms del 95% del peso seco de la clula microbiana esta constituido por C, O, H, N, S, P, K, Ca, Mg y Fe.
C, O, H, N, S y P.
Son componentes de carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nuclecos. Son necesarios en cantidades de g/L de medio de cultivo.
Carbono.
Fuente de energa y/o compuestos para biosntesis
Nitrgeno y azufre*.
Se encuentran en las clulas en forma reducida como grupos amino y sulfhidrilo; generalmente en forma reducida, aunque algunos m.o. los asimilan en forma oxidada. Sulfatos, nitratos, peptonas (N y S) y cisteina. Fijacin de N2 (N2 NH3)
Oxgeno
Clasificacin de los microorganismos segn el efecto del oxgeno: Aerobios obligados o estrictos: requieren oxgeno (21% o ms) Ej. Bacillus, hongos, etc. microaeroflicos: lo requieren a niveles menores que el atmosfrico (5-10%) Ej. Azospirillum Anaerobios facultativos: no requieren oxgeno, pero el desarrollo es mejor con oxgeno. Ej. Levaduras, E. coli aerotolerantes: no son sensibles al oxgeno (crecen en ausencia o presencia de oxgeno). Ej. Enterococcus faecalis, Sreptococcus spp. obligados o estrictos: no toleran el oxgeno, muere en su presencia Ej. Methanobacterium, Clostridium
Las flavoprotenas se pueden autooxidar en presencia de O2, produciendo H2O2 (perxido de hidrgeno) y O2- (radical superxido), ambos txicos Proteccin frente al perxido:
Catalasa:
Peroxidasa:
Superxido dismutasa:
(SOD)
Superxido reductasa:
Reaccin de la catalasa
Resazurina
Aerobio
Anaerobio
Anaerobios facultativos
Microarofilo
Anaerobios aerotolerantes
Cultivos en anaerobiosis
tubos con medio de cultivo llenos por completo. medios con sustancias que reaccionan con el oxgeno y lo excluyen. dispositivo especial (cmara anaerbica) cajas o tubos incubados en recipientes con granos germinados (cebada, centeno)
Cmara del catalizador Contiene pastillas de paladio El oxgeno se elimina de la cmara, al combinarse con hidrgeno para formar agua. Esta reaccin es catalizada por las pastillas de paladio Sobre generador de gas Se aade agua a las sustancias qumicas contenidas en el sobre para generar H2 y CO2. El dixido de carbono promueve el crecimiento ms rpido de los microorganismos Tira indicadora de anaerobiosis El azul de metileno pierde el color en ausencia de O2
JARRA DE ANAEROBIOS
K, Ca, Mg y Fe:
se encuentran en la clula en forma de cationes, desempeando varias funciones. Se utilizan en cantidades de mg.
entre ellas algunas que participan en la sntesis de protenas. Ca2+: contribuye a la termorresistencia de endosporas. Mg2+: acta como cofactor de muchas enzimas, forma complejos con el ATP y estabiliza los ribosomas y las membranas celulares. Fe2+ y Fe3+: Forma parte de los citocromos y es cofactor de enzimas y de protenas transportadoras de electrones.
pirimidinas, algunos CHTOS y lpidos. P: presente en cidos nucleicos, fosfolpidos, nucletidos como ATP, varios cofactores, algunas protenas y otros componentes celulares. S: necesario para la sntesis de sustancias como los a.a. cistena y metionina, algunos CHTOS, biotina y tiamina.
Micronutrientes o microelementos u
Son en cantidades tan pequeas, que los contaminantes presentes en agua, en los recipientes para el cultivo y en los componentes habituales del medio son a menudo suficientes. Normalmente son parte de enzimas y cofactores; facilitan la catlisis de reacciones y mantenimiento de la estructura de protenas. Mn, Zn, Co, Mo, Ni y Cu deben estar
de algunas enzimas. Mn2+: facilita a muchas enzimas la catlisis de la transferencia de los grupos fosfato. Mo2+: necesario para fijar nitrgeno. Co2+: componente de la vitamina B12.
Estructura del FeMoCo, el cofactor que forma parte del centro activo de la dinitrogenasa. El cubo de Fe7S8 se une al Mo, y esta estructura se une a los tomos de O del homocitrato y a los tomos de N y S de la dinitrogenasa. Cada molcula de dinitrogenasa posee dos FeMoCo
Son de ciertos constituyentes orgnicos de la clula que el m.o. es incapaz de sintetizar; generalmente se requieren en pequeas concentraciones. Existen tres clases principales:
1. Aminocidos sntesis de protenas 2. Purinas y pirimidinas sntesis de cidos nucleicos 3. Vitaminas normalmente forman la totalidad o parte de los cofactores enzimticos; constituyen grupos prostticos o centros activos de ciertas enzimas.
Las principales vitaminas requeridas por los microorganismos son: tiamina (vitamina B1) biotina, piridoxina (vitamina B6) y covalamina (vitamina B12)
Factores de Crecimiento:
En relacin al requerimiento de factores de crecimiento los microorganismos se pueden dividir en: Prottrofos: microorganismos que sintetizan sus propios factores de crecimiento. Auxtrofos: microorganismos que requieren una fuente exgena de factores de crecimiento debido a que son incapaces de sintetizarlos. Las vitaminas se clasifican en dos grupos, hidrosolubles y liposolubles. Dentro de stas ltimas la vitamina A, D y E no son necesarias para el crecimiento de las bacterias. Todas las vitaminas hidrosolubles, excepto el cido ascrbico, son necesarias para el crecimiento de bacterias. La mayor parte de las vitaminas hidrosolubles son componentes de coenzimas. En los medios indefinidos se utiliza como fuente de vitaminas el extracto de levaduras.
Factores de crecimiento
Son
molculas orgnicas especficas requeridas en muy pequeas cantidades por algunas bacterias No tienen funcin plstica (no sillares de macromolculas) ni sirven de fuente de energa suelen ser coenzimas o sus precursores, vitaminas, que determinadas bacterias no pueden sintetizar por s mismas las deben tomar del medio ambiente Ejemplos:
Brucella requieren biotina, niacina, tiamina y pantotnico Haemophilus necesita hemo y piridn-nucletidos
Auttrofos:
Son m.o. que pueden utilizar CO2 como principal y nica fuente de carbono.
Hetertrofos:
Son organismos que utilizan molculas orgnicas preformadas y reducidas como fuentes de carbono. La mayora usan nutrientes orgnicos como fuente tanto de C como de energa. Este grupo incluye a todos los animales, hongos, protozoarios y la mayora de las bacterias.
Prottrofo:
Es un m.o. que precisa de los mismos nutrientes que la mayora de los miembros de su especie.
Auxtrofo:
Es un m.o. mutado que carece de la capacidad para sintetizar un nutriente
Fottrofos (o fotosintticos):
Littrofos:
(que comen roca) obtienen su energa de la oxidacin de compuestos inorgnicos como el azufre elemental (S0), el in amonio (NH4+), el hierro ferroso (Fe2+) ,el H2,. SH2, S0, NH3, NO2, Fe, etc.
Organtrofos:
Obtienen electrones o hidrgeno a partir de compuestos orgnicos. (hidratos
Todos los organismos requieren tambin fuentes de energa, hidrgeno y electrones para poder crecer. Los microorganismos se pueden agrupar en tipos nutricionales, segn satisfagan ciertas necesidades:
Requerimientos Fsicos
Temperatura:
Los microorganismos se encuentran en casi todos los ambientes, incluso ambientes muy extremos
Todos los microorganismos tienen una temperatura ptima de crecimiento. Esto significa que a determinada temperatura la velocidad de duplicacin (o la velocidad de crecimiento poblacional) de los microorganismos es mayor. Hay que tener en cuenta que no todos los microorganismos crecen en el mismo rango de temperaturas:
CLASIFICACION TERMOFILOS MESOFILOS PSICROFILOS RANGO 25-80C 10-45C -5-30C OPTIMA 50-60C 20-40C 10-20C
La temperatura afecta la estabilidad de las protenas celulares porque induce cambios conformacionales que alteran la actividad biolgica de estos compuestos, especialmente la de enzimas.
TEMPERATURA
Psicrfilos: temperatura ptima baja (Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligenes) Mesfilos: temperatura ptima normal (la mayor parte de los organismos) Termfilos: temperatura ptima alta (microorganismos aislados de reas volcnicas) Termfilos extremos: temperatura ptima muy alta (Thermococcus celer 103 C)
Temperaturas extremas
Sicrfilos: microorganismos capaces de crecer a bajas temperaturas. Sicrfilos obligados Sicrfilos facultativos Termfilos: microorganismos capaces de crecer a temperaturas superiores a 45C. En la naturaleza hay pocos ambientes con temperaturas tan elevadas:
chorros de vapor
compostaje
manantilaes calientes
Adaptaciones a la termofilia: enzimas y protenas estables al calor membranas ricas en cidos grasos saturados
En lagos termales, como este Twin Butte Vista Spring de Yellowstone, se forman mantos microbianos con extremfilos. Foto: Dave Ward NeoFronteras
Mesfilos - rango: 15-45 C, ptimo: 30-40C la mayora de los microorganismos (del suelo, aguas, patgenos) Termfilos - rango: 40-70C, ptimo de 55-65oC membrana contiene alto % de cidos grasos saturados enzimas estables al calor Bacillus stearothermophilus, organismos de compostaje Hipertermfilos - rango: 80-113C, ptimo > 90oC Pyrococcus, Pyrodictium (aguas termales)
pH ptimo 7
- Ej.: bacterias patgenas humanas. Acidfilo: pH ptimo < 7 - Ej.: muchas de las archeobacterias y hongos. Basfilo: pH ptimo > 7 - Suelos y aguas ricas en carbonatos
En Espaa en las minas de Riotinto. Sus aguas tiene un pH de 1,16.
Ferroplasma acidarmanus
pH:
La mayora de los microorganismos crecen en pH cercanos a la neutralidad, entre 5 y 9, cosa que no excluye que existan microorganismos que puedan soportar pH extremos y se desarrollen. Segn el rango de pH del medio en el cual se desarrollan pueden dividirse en: CLASIFICACION ACIDOFILOS NEUTROFILOS ALCALOFILOS 9.5 pH EXTERNO 1.0-5.0 5.5-8.5 9.0-10.0 pH INTERNO 6.5 7.5
Los microorganismos regulan su pH interno mediante un sistema de transporte de protones que se encuentra en la membrana citoplasmtica, que incluye una bomba de protones ATP dependiente. El rango de pH ptimo para el desarrollo de los microorganismo es estrecho debido a que frente a un pH externo muy desfavorable se requiere un gran consumo de energa para mantener el pH interno.
El agua
Selaginella lepidophylla
Fuentes de agua:
en bacterias oligotrficas, aw est cercano a 1 en bacterias que viven en sangre y fluidos, aw = 0.995 en bacterias marinas, aw = 0.980 ciertos bacilos Gram-positivos aguantan cierta sequedad (aw = 0.950) microorganismos xerfilos (aw en torno a 0.75)
Actividad de Agua: El agua es el solvente en donde ocurren las reacciones qumicas y enzimticas de la clula y es indispensable para el desarrollo de los microorganismos. La actividad de agua (aW) del medio representa la fraccin molar de las molculas de agua totales que estn disponibles, y es igual a relacin que existe entre la presin de vapor de la solucin respecto a la del agua pura (p/po). El valor mnimo de aW en el cual las bacterias pueden crecer vara ampliamente, pero el valor ptimo para muchas especies es mayor a 0.99. Algunas bacterias halfilas (bacterias que se desarrollan en altas concentraciones de sal) crecen mejor con aW = 0.80. Variaciones en la actividad de agua puede afectar la tasa de crecimiento, la composicin celular y la actividad metablica de la bacteria, debido a que si no disponen de suficiente cantidad de agua libre (no asociada a solutos, etc) en el medio necesitaran realizar ms trabajo para obtenerla y disminuir el
Bacilos irregulares, mviles. Gram negativos. No requieren Aminocidos para su crecimiento, no utilizan carbohidratos, fuertemente proteolticos. Aislados desde ambientes neutros, altamente salinos y asociados con pescado y alimentos salados. H. salinarum: especie tipo.H. pharaonis: aisladas de lagos salados alcalinos como Wadi Natrun en Egipto. Haloarcula Bacilos irregulares, formas rectangulares o triangulares. Algunas cepas son mviles, Gram negativas, aerobias o anaerobias facultativas, utilizan carbohidratos y producen cidos desde azufre. Aisladas desde ambientes salinos neutros tales como lagos, salinas marinas y suelos salinos.H. vallismortis: especie tipo. HaloferaxBacilos irregulares, forma de discos o copas, mviles. Utilizan carbohidratos y producen cidos desde azcares. Acumulan polihidroxibutirato. Encontrados en ambientes salinos neutrales como lagos y marinas salinas.H. volcani: especie tipo. Halococcus Cocos, Gram variables, inmviles, aerobios estrictos. Aislados desde lagos y suelos salinos, marinas salinas y agua de mar.H. morrhuae: comnmente aislado del bacalao y sus productos. Natronobacterium Bacilos, Gram negativos, aerobios estrictos alcalfilos. Encontrados en lagos, salinas y suelos alcalinos. N. gregoryi: especie tipo. Natronococcus Cocos inmviles alcalfilos, Gram variables.N. occultus: especie tipo.
Otras condiciones
Halfilos: bacterias que para su crecimiento requieren altas concentraciones de sal (10 - 15%). Son aquellas bacterias aisladas del mar y ciertos alimentos. Microorganismos que viven en altas concentraciones de sales. Osmfilos: microorganismos que viven en altas concentraciones de azcares. Xerfilos: microorganismos viven en ambientes secos. que
Potencial de Oxido-Reduccin:
El Potencial de Oxido-Reduccin es una medida de la tendencia del medio a donar o recibir electrones. Es crtico para el crecimiento de los microorganismos y generalmente est asociado con la presencia de oxgeno molecular disuelto en el medio el cual es muy oxidante. En medios que contienen oxgeno, en condiciones similares a las atmosfricas, el potencial redox vara entre 0,2 y 0,4 Voltios. Los anaerobios estrictos necesitan una atmsfera sin oxgeno pues deben crecer en medios reductores donde el potencial no sea mayor a -0,2 Voltios.
En el mar hay poca radiacin UV por debajo de 290 a 300 nm. La radiacin UV de long. de onda menor de 287 nm es absorbida por el O2 de la atmsfera terrestre: este proceso forma una capa de ozono entre 40 y 48 km por encima de la superficie terrestre.
R A D I A C I O N
Nuestro ambiente est bombardeado con radicacin electromagntica de varios tipos. La luz solar es la fuente principal de radiacin de la Tierra. Comprende: Luz visible, radiacin ultravioleta (UV), rayos infrarrojos y ondas de radio. La luz visible es el aspecto ms importante y destacado de nuestro ambiente: La vida depende de la capacidad de los organismos fotosintticos para captar la energa solar. Casi el 60% de la radiacin solar se encuentra en la regin de infrarrojos, ms que en la parte visible del espectro. Los rayos infrarrojos son la fuente principal de calor de la Tierra.
Radiacin Ultravioleta( 10-300nm) :Puede producir la muerte de todas las clases de microorganismos debido a su longitud de onda corta (aproximadamente, de 10 a 400 nm) y alta energa. La ms letal 260 nm, acta sobre el DNA y RNA, forma dmero de timina (pirimidinas). Impide la duplicacin del DNA dado que la DNApol inserta nucleotidos incorrectos. Los daos pueden ser reparados mediante diferentes mecanismos: Fotorreactivacin, una enzima fotorreactivadora emplea la luz azul para separar los dmeros de timina. Reactivacin oscura, se produce en ausencia de luz, se puede cortar y sustituir una secuencia corta que contenga el dmero de timina. Deinococcus radiodurans soportan la radiacin mucho mayor que cualquier organismo.
Radiacin Visible (380-760 nm). La luz visible es enormemente beneficiosa porque es la fuente de energa de la fotosntesis. Cianobacterias (700nm). Bacterias rojas y verdes (1000 nm). Sin embargo, incluso la luz visible, cuando est presente a una cierta intensidad, puede daar o destruir clulas bacterianas. Normalmente se precisan O2 y pigmentos denominados fotosensibilizadores. Todos los microorganismos poseen pigmentos, como clorofila, bacetrioclorofila, citocromos y flavinas, que pueden absorber energa lumnica, excitarse y activarse, y actuar como fotosensibilizadores. El fotosensibilizador excitado (F) transfiere su energa al O2 generando un oxgeno en estado de singlete (1O2). luz F F (activado) + O2 F (Activado) P + 1 O2
El oxgeno en estado de singlete es muy reactivo y un agente con gran poder oxidante, que destruye rpidamente una clula. Es probablemente el agente principal empleado por los fagocitos para destruir las bacterias fagocitadas. Muchos microorganismos que se trasmiten por el aire o viven sobre superficies expuestas usan pigmentos carotenoides para protegerse frente a la fotooxidacin. Los carotenoides inactivan eficazmente el oxgeno en estado de singlete (absorben energa de ste y lo convierten de nuevo en estado elemental no excitado)
Radiacin Ionizante( R-X, csmicos y gmmma). Longitud de onda muy pequea y nocivas para los microorganismos. Diversos cambios producidos en las clulas se deben a la radiacin ionizante: rompe los enlaces de hidrgeno, oxida los dobles enlaces, destruye las estructuras de anillo y polimeriza algunas molculas. El oxgeno aumenta estos efectos destructivos probablemente por la generacin de radicales hidroxilo (OH*). A nivel de DNA genera rupturas dentro de la cadena, originando errores en la sntesis que no pueden ser corregidos. La radiacin ionizante puede utilizarse para esterilizar objetos. Deinococcus radiodurans y endosporas bacterianas pueden sobrevivir a dosis elevadas de radiacin ionizante.
PRESION:
Barotolerantes: mayora de organismos soportan presiones menores a 200 atm., pero desarrollan mejor a presiones menores. Barfilas moderadas: desarrollo ptimo a 400 atm, tambin lo hace a presiones bajas como 1 atm y tan altas como 700 atm. Estas bacterias se las encuentran a 5000 m de profundidad. Algunas bacterias presentes en el intestino de invertebrados de los fondos marinos, como anfpodos y holoturias. Importantes en el reciclaje de los nutrientes en las profundidades marinas Barfilas extremas: desarrollan ptimamente entre 700 y 800 atm. Se las encuentra a profundidades extremas como 10000 m. (Zanja Mariana cerca de las Islas Filipinas aprox. 10500 m)
Extraen su energa del sulfato de hidrgeno y de otras molculas que emergen del suelo marino mediante la quimiosntesis, que no requiere de la luz.
MEDIO ENRIQUECIDO: medio que tiene un gran exceso de nutrientes y se utiliza para microorganismos que tienen grandes exigencias nutricionales. No pueden ser selectivos. Agar chocolate, agar cerebro-corazn, etc. MEDIO SELECTIVO: medio que slo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibe el de otros. Permite seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones mixtas Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de ciertos Staphilococos). MEDIO DIFERENCIAL: medio que permite revelar caractersticas fisiolgicas de los microorganismos. Levine (permite visualizar la fermentacin de lactosa por viraje de un indicador cido-base), Agar sangre (permite visualizar la sntesis de hemolisinas). ENRIQUECIMIENTO: Es una tcnica que permite el desarrollo de un grupo de microorganismos a partir de una muestra que contiene una gran variedad de microorganismos. Se utiliza un medio selectivo lquido para favorecer la competencia entre los organismos y se incuba bajo determinadas condiciones. Aquellos microorganismos para los que el ambiente sea ms favorable crecern ms que los otros y finalmente sern
Colecciones de cultivos
La primera coleccin conocida de cultivos tipo fue la de Kral en Praga (1900). Estados Unidos (ATCC) est en Rockville (Maryland). Francia (CIP) est en el Instituto Pasteur (Pars). Reino Unido (NCYC) est en Norwich. Espaa (CECT) est en Valencia. Alemania (DSM) est en Darmstadt. Holanda (CBS) est en Baarn. Japn (IFO) est en Osaka.
http://edicion-micro.usal.es/web/educativo/micro2/tema06.html#anchor151200
Las bacterias del azufre, al igual que las plantas, son fotosintticas (usan la luz del Sol para producir carbohidratos a partir del CO2).
Metabolismo de las bacterias anaerobias de las profundidades del mar, las cuales reducen el sulfato para convertirlo en cido sulfdrico (rojo); y las bacterias fotosintticas del azufre, las cuales oxidan el cido sulfdrico para obtener energa (verde).
www.afinidadelectrica.com/articulo.php?IdArti...
Un recuento en placa es una medida directa y proporciona un recuento de viables. En primer lugar, la muestra se diluye seriadamente, transfiriendo 1 ml de la muestra a 9 ml de medio estril y se mezclan adecuadamente. Este proceso se repite basta obtener una dilucin apropiada en este ejemplo, 1:100000 (10-5). Posteriormente se aade 0,1 ml a una placa de agar nutritivo, bien extendindolo en la superficie de la misma (mtodo de extensin en placa) o mezclndolo con el medio (mtodo de vertido en placa). Las placas se incuban y se recuentan las colonias que se desarrollan. Debido a razones estadsticas, las placas deben contener entre 30 y 300 colonias. En este ejemplo, la placa tiene 225 colonias.
El mtodo del nmero ms probable (NMP) proporciona un recuento de viables. Al aumentar el factor de dilucin, se alcanza un punto en el que algunos tubos contienen slo un organismo y los otros, ninguno. A partir del nmero, determinado por los tubos que presentan turbidez en tres diluciones sucesivas (en este caso 5, 3, 1), puede determinarse el nmero ms probable de clulas estadisticamente (11,0) en la primera de las tres diluciones, mediante una tabla de nmeros ms probables (Tabla 8.6). Este valor, multiplicado por el factor de dilucin nos proporciona el nmero de clulas viables de la muestra.
aulavirtual.usal.es/.../58/texthtml/cap804.htm