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Objetivo
Comprender qu mecanismos rigen el transporte de solutos a travs de la membrana plasmtica.
Contenido
Introduccin Transporte activo y pasivo Cinticas del transporte activo y pasivo Bombas primarias Transporte secundario de iones Flujo de iones en la raz
Introduccin
Potencial de membrana
La
membrana de las clulas est polarizada, debido a que hay un reparto desigual de cargas elctricas entre el interior y el exterior de la clula. Esto crea una diferencia de potencial, siendo el exterior positivo respecto al interior.
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La diferencia de cargas a ambos lados de la membrana genera un potencial de membrana que puede ser medido con electrodos
-+
Gradiente elctrico
Gradiente de concentracin
Gradiente de concentracin
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Potencial electroqumico
La energa asociada a un in depende de: las caractersticas intrnsecas del in la concentracin la carga
j= j* + RTln Cj + z F
Potencial electroqumico j* =potencial electroqumico en condiciones estndar R=cte universal de los gases T=temperatura absoluta Cj=concentracin del in z = carga elctrica del in F=cte de Faraday =campo elctrico donde el in se encuentra
Cje
Cji
ji=je j* + RTln Cji + z Fi = j* + RTln Cje + z Fe zF (i e ) = RT (ln Cje - ln Cji) EjN = RT/zF x ln Cje / Cji
Potencial de Nernst
Es la diferencia de potencial elctrico a ambos lados de una membrana que requiere una especie cargada para estar en equilibrio, siendo sus concentraciones en ambos sistemas distintas.
1. A partir de un potencial de referencia se puede calcular la asimetra de un in cuando est en equilibrio 2. A partir de una asimetra, se puede calcular un potencial para el cual el in estara en equilibrio
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SIMULADOR NERNST
http://www.nernstgoldman.physiology.arizo na.edu/
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SALIDA TA
ENTRADA TA
TA= TRANSPORTE ACTIVO
Fuerza in motriz
En los sistemas vivos, la mayora de los iones no est en equilibrio. A la fuerza que acta sobre un in o gradiente de potencial electroqumico se denomina fuerza in motriz Se calcula averiguando la diferencia de potencial electroqumico entre el interior y el exterior: j= (j* +RTln Cji +zFi )- (j* +RTln Cje + z Fe ) j= [zF (i e )] [RT (ln Cje / Cji)] j= [zF (i e )] [EjNzF]
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La diferencia de potencial elctrico (mV) que se registra entre el lado interno ( i ) y el externo ( o ) de una clula es debido, en su mayor parte, a un potencial de difusin.
Una parte ms pequea de este potencial corresponde a las bombas electrognicas presentes en algunas clulas.
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Potencial de difusin
En reposo, se produce una difusin de iones dependiente de la permeabilidad
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Incorporacin
Concentracin externa
Protenas de transporte
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Canales
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Son protenas transmembrana que funcionan como poros selectivos (plasmalema, tonoplasto, m. de mitocondria, m. de cloroplasto, m. tilacoidal). Se asume que el flujo de iones a travs de la doble capa lipdica es prcticamente nulo. Se han descrito canales para K+, Ca2+ y Cl- y recientemente acuaporinas, muy abundantes en membranas sometidas a flujos grandes de agua. Tasa: 108 iones /s Principalmente iones y agua
Un canal tpico de K+ (los ms abundantes) consta de cuatro subunidades de 65-100 kDa que formaran el poro y que contienen un filtro de selectividad y sensores a distintos tipos de estmulos. Por ejemplo, un aumento del Ca2+ del citoplasma en respuesta a oscuridad o ABA induce el cierre de canales de entrada de K+ y la apertura de canales de salida de K+ y aninicos, lo que determina la prdida de turgencia de las clulas oclusivas y el cierre del estoma.
Bombas primarias
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Las
bombas primarias son protenas de membrana que mueven iones (masa y carga) en contra de su gradiente de potencial electroqumico y que generan gradientes tanto de concentracin como elctricos. Tambin se les llama electroenzimas.
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La existencia del transporte activo es esencial para las clulas vegetales ya que un correcto funcionamiento de las principales rutas metablicas requiere concentraciones internas de muchos iones muy por encima o por debajo de la concentracin interna de equilibrio.
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Bombas en el plasmalema
H+ ATPasa (tipo P)
Cuando el protn se une a la protena se da una fosforilacin y se cambia la conformacin de la protena, lo cual provoca el transporte de H+. La energa se obtiene en este caso del ATP, que proviene mayoritariamente de la respiracin mitocondrial. La energa metablica se acumula en forma de asimetra en la concentracin de H+ y especialmente como diferencia de potencial elctrico entre el citoplasma y el exterior o fuerza H+ motriz. Es una bomba electrognica que contribuye a energetizar la membrana o al potencial de membrana.
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Bombas en el plasmalema
Ca2+ H+ ATPasa (tipo P) Se trata de una bomba que saca Ca2+ del citoplasma al tiempo que incorpora H+ en un proceso igualmente dependiente de ATP.
Su funcin es evacuar Ca2+ del citoplasma para mantener su concentracin en torno a 0.1 uM
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Bombas en el plasmalema
Otras Hongos en medio alcalino y con Na+ + + + Bomba de Na (salida de Na acoplado a la entrada de H con consumo de ATP. No contribuye al potencial de membrana, es electroneutra.
Alga verde marina Acetabularia Bomba de Cl que emplea ATP para el transporte de Cl S contribuye al potencial de membrana.
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Bombas en el tonoplasto
La fuerza que impulsa la acumulacin de agua y la turgencia en las clulas es osmtica y el origen del potencial osmtico es la acumulacin de iones en la vacuola, principalmente K+.
En el tonoplasto hay dos bombas primarias que bombean H+ al interior de la vacuola, cuyo potencial de membrana es entre 5-20 mV (+ dentro de la vacuola). H+ ATP asa (tipo V) Pirofosfatasa (H+-PPasa): utiliza PPi como fuente de energa Por qu dos bombas?
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Consume la energa acumulada en las membranas por las bombas primarias y ello se refleja en la despolarizacin de las membranas.
A diferencia del transporte primario que genera una diferencia de potencial de membrana y es, por ello, electrognico, el transporte secundario disipa la diferencia de potencial acumulado en la membrana y es, por tanto, electrofortico.
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Transportadores (carriers)
Se aprovecha la energa de una bomba H+-ATP asa para mover otro in distinto al Hidrgeno. Esto es porque al acumularse H+ se genera una fuerza motriz del protn, que provee la energa. Una protena transportadora se une por un lado al H+ y por otro al in a transportar.
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