COLGENO Y PROTEOGLICANOS

DR. I GNACI O ALFREDO VALERI O MORALES REUMATOLOG A I NSTI TUTO NACI ONAL DE REHABI LI TACI N MARZO 2013

CONTEXTO
Tejido conectivo Matriz extracelular Tendones

Cartlagos
Vasos sanguneos Enfermedades Congnitas Futuro teraputico.

CONTEXTO

Los tejidos constituyen una familia de tejidos que se caracterizan porque sus clulas estn inmersas en un abundante material intercelular, llamado la matriz extracelular.

Variedades celulares en tejido conectivo: conectivos, derivados del mesnquima,

Clulas estables

Clulas Migratorias

Curso de Biologa Celular y Tisular del departamento de Biologa Celular y Tisular de la Facultad de Medicina de la UNAM . Autor: Dr. en C.B. Andrs Castell.

CONTEXTO

Matriz extracelular es una red organizada, formada por el ensamblaje de una variedad de polisacridos y de protenas secretadas por las clulas estables, que determina las propiedades fsicas de cada una de las variedades de tejido conjuntivo.

Curso de Biologa Celular y Tisular del departamento de Biologa Celular y Tisular de la Facultad de Medicina de la UNAM . Autor: Dr. en C.B. Andrs Castell . Actualizacin Junio 2010 Fotografa: Atlas de histologa animal y vegetal Pilar Molist Manuel A. Pombal, Universidad de Vigo. 2011

MATRIZ EXTRACELULAR

1.- Colgenos 2.- Proteoglicanos 3.- Molculas de adhesin 4.- Protenas de membrana

Goldman: Goldman's Cecil Medicine, 24th ed. Connective Tissue Structure and Function

TEJIDO CONECTIVO: FUNCIONES

Sostn y relleno estructural Segmentacin / compartimentalizacin Proteccin fsica e inmunolgica

Medio de intercambio de detritus metablicos, nutrientes y O2

Almacenamiento de grasa, agua, sodio y otros electrolitos Reparacin tisular

Curso de Biologa Celular y Tisular del departamento de Biologa Celular y Tisular de la Facultad de Medicina de la UNAM . Autor: Dr. en C.B. Andrs Castell. Actualizacin Junio 2010; Fotografa: Atlas de histologa animal y vegetal Pilar Molist Manuel A. Pombal, Universidad de Vigo. 2011

TIPOS DE TEJIDO CONJUNTIVO

laxos
reticulares Tejido Conjuntivo adiposos

Unir
Alojar, organizar Energa Resistencia Sostn

Fibrosos o
densos seo

Curso de Biologa Celular y Tisular del departamento de Biologa Celular y Tisular de la Facultad de Medicina de la UNAM . Autor: Dr. en C.B. Andrs Castell. Actualizacin Junio 2010; Fotografa: Atlas de histologa animal y vegetal Pilar Molist Manuel A. Pombal, Universidad de Vigo. 2011

COLGENOS
Familia de protenas. 28 tipos compuestos por 46 distintas cadenas polipeptidicas. Mas de 40 genes codifican aminocidos. 25 al 30% de las protenas corporales. Estructuras macromoleculares tridimensionales variadas. Mallas que atrapan Proteoglicanos

Colgeno tipo II 90-95% colgeno en cartlagos.

Collagen Structure and Stability Annu. Rev. Biochem. 2009. 78:92958

COLGENOS: ESTRUCTURA

Glicina y prolina en abundancia Secuencia repetitiva. Gli-x-y- Gli-x-y Todos los colgenos tienen uno de dos dominios estructurales:
Regin de unin de 3 cadenas polipeptdicas con enlaces que configuran triple hlice. Estructura globular.

Collagen Structure and Stability Annu. Rev. Biochem. 2009. 78:92958

Preparados en fresco sin tincin, se aprecian fibras de colgeno

como hebras incoloras, de recorrido ondulado, que se entrecruzan en todas direcciones Grosor variabale de 1-10mu A mayor aumento se aprecian fibrillas 0.2-0.5mu que se mantienen en paralelo con la matriz amorfa

Tricmico de Masson H-E Rojo van Gieson

Fibras Fibrillas Microfibrillas Tropocolgeno (tropo=giro) Cadenas alfa (3) / Triple Hlice Aminocidos

Collagen: an overview implant dentistry / volume 11, number 3 2002

COLGENO: CATEGORAS
FACITs (fibril-associated collagens with interrupted triple helices) MACITs (membrane associated collagens with interrupted triple Helices) MULTIPLEXINs (multiple triple-helix domains and interruptions).

Collagen Structure and Stability Annu. Rev. Biochem. 2009. 78:92958

TIPO DE COLAGENO I

CADENAS 1(I) 2(I)

MOLECULAS COLAGENOS FIBRILARES [1(I)]2 2(I) [1(I)]3 [1(II)]3 [1(III)]3 [1(V)]3 [1(V)]2 2(V) 1(V) 2(V) 3(V) 1(XI) 2(XI) 1(II) COLAGENOS DE MEMBRANA BASAL

DISTRIBUCION TISULAR

MUTACION=ENFERMEDAD

Piel, Hueso, tendones, capsulas de rganos, arterias Cartlago, vitreous humor Piel, Vasos sanguneos, Utero Piel, Vasos sanguneos, placenta, Corion, Utero

Osteogenesis imperfecta, Ehlers-Danlos tipo VIIA Sndrome Stickler's, osteoartritis. Ehlers-Danlos tipo IV, aneurismas aorticos. Ehlers-Danlos Sindrome

II III V

1(II) 1(III) 1(V) 2(V) 3(V)

XI

1(XI), 2(XI)

Cartlago

Chondrodysplasia, osteoarthritis Sndrome de Alport, Porencefalia Enfermedad degenerativa de disco, Osteoartritis.

IV

1-5(IV)

[1(IV)]2 2(IV)

Membranas basales

FIBRIL-ASSOCIATED COLLAGENS WITH INTERRUPTED TRIPLE HELIXES (FACIT) IX XII XIV 1-3(IX) 1(XII) 1(XIV) COLAGENOS FORMADORES DE MALLAS-REDES VIII X 1(VIII), 2(VIII) 1(X) [1(X)]3 Cornea, Vasos sanguneos Cartlago de crecimiento Endotelio de Fuch, Distrofia corneal Displasia espndilo metafisiaria. Epidermolysis bullosa 1(IX) 2(IX) 3(IX) [1(XII)]3 Cartlago, intervertebral discs Otros tejidos blandos. Ubicua.

LONG-CHAIN, ANCHORING-FIBRIL COLLAGEN WITH INTERRUPTED TRIPLE HELIX VII 1(VII) [1(VII)]3 OTROS Anchoring fibrils

VI
XIII

1-3(VI)
1(XIII)

1(VI) 2(VI) 3(VI)

Cartlago, Estroma
Piel, Intestino

Miopata Bethlem

Goldman: Goldman's Cecil Medicine, 24th ed. Connective Tissue Structure and Function Advanced Drug Delivery Reviews 55 (2003) 1531 1546

ESTRUCTURA Tejido adiposo Membrana basal

FUNCION
Proteccin, reserva energtica Soporte y barrera de filtracin

CELULAS
Adipocitos fibroblastos Clulas epiteliales y endoteliales

COMPONENTES CLAVE DE MATRIZ

Fibras finas reticulares Colgeno tipo IV, laminina Colgeno tipo I osteocalcina, sialoproteina sea hiidroxiapatita Colgeno tipo II, agrecano. Colgeno tipo I, elastina Colgeno tipo I, pequeosproteoglicanos Colgeno tipo I, pequeosproteoglicanos

Hueso

Soporte esqueltico, reserva Osteoblastos, osteoclastos, mineral, formacin de osteocitos sangre Movimiento articular, distribucin de carga Soporte, resilicencia Conexin hueso-articular Conexin hueso-msculo Soporte a rganos Recubrimiento articular, produccin de LS Soporte estructural a vasos sanguneos Condrocitos Fibroblastos Fibroblastos Fibroblastos

Cartlago Dermis Ligamentos Tendones Estroma Sinovia Pared vascular

Fibroblastos, clulas rgano- Colgeno tipo I, VI y especficas fibronectina. Fibroblastos, macrfagos Clulas de musculo liso de pared vascular Colgeno tipo I, III Colgeno tipo III y elastina.

Goldman: Goldman's Cecil Medicine, 24th ed. Connective Tissue Structure and Function

COLGENOS: SNTESIS

Collagen Structure and Stability Annu. Rev. Biochem. 2009. 78:92958

COLAGENO: SINTESIS
Enzimas que intervienen en las modificaciones secundarias de la molcula de colgeno. Prolil-hidroxilasa Lisil-Hidroxilasa Galactosil-transferasa Glucosil-transferasa N-acetil-glucosaminil-transferasa Monosil-transferasa Procolgeno-N-proteasa(s) Procolgeno-C-proteasa(s) Hidroxilacin Glucosilacin

Transformacin de procolgeno en colgeno.

Lisil-oxidasa

Formacin de enlaces transversales

Colllagen: an overview implant dentistry / volume 11, number 3 2002

COLGENO: DEGRADACIN
Todas las protenas del cuerpo sufren degradacin y resintetizacin
Los fragmentacin inicial de las molculas del colgeno insoluble ocurre por desgaste mecnico, radicales libres escisin por proteinasas.

Los fragmentos libres son fagocitados y degradados por enzimas lisosmicas

Degradacin excesiva de colgeno

Degradacin Excesiva Colgeno Artritis Reumatoide Colgeno del Cartlago Osteoporosis Colgeno del Hueso

METALOPROTEINASAS

Cartilage and Chondrocytes ; Firestein: Kelley's Textbook of Rheumatology, 9th ed. - 2012 - Saunders,

MARCADORES EN COLGENO (BIOMARCADORES)

Fragmentos de agregacanVIDIPEN y NITEGEN Fragmentos de colgeno TII
Excrecin urinaria de puentes cruzados de hidroxilisilpridinolina Propptido Carboxiterminal Anablicos Catablicos

MABs

PROTEOGLICANOS

Journal of Histochemistry & Cytochemistry 60(12) 885897

PROTEOGLICANOS
Son macromolculas compuestas que estn constituidas por un filamento proteico central (core protein) al cual se unen, por medio de enlaces covalentes, una serie de GAGs y oligosacridos

ESTRUCTURA GLUCOSAMINOGLICANOS

ESTRUCTURA GLUCOSAMINOGLICANOS

Los GAG atraen fuertemente al agua debido a su carga negativa generada en los enlaces sulfuro y carboxilo. El Ac. Hialurnico no es sintetizado por las clulas del tejido conectivo. Es un polmero lineal no sulfatado que contiene un gran nmero de unidades disacridas (N-acetilglucosamina) + Ac Glucurnico, unidas por enlaces de tipo 1-3, B-O Clasificacin de GAG

ACIDO HIALURONICO

Peso molecular 2000 kDa Se sintetiza a partir de la D-glucosa en los condrocitos, celulas sinoviales, (no tiene core protein) Es el nico GAG no sulfatado ni unido a protenas por enlaces covalentes (no pertenece a la familiar de PGs) Interacta por medio de enlaces no covalentes con lecticanos y glicoprotenas. integrinas, molculas de adhesin (No pasa por Golgi) Alto contenido en lquido sinovial En el agua forma una densa red de molculas, estabilizadas por puentes de OH que oponen fuerza al desplazamiento (VISCOCIDAD) Como molcula constitutiva proporciona elasticidad y turgencia.

Glipicanos

1 al 6 1 al 4
Aggrecan* Versican 0-3 Neurocan Brevican

HS

Syndecanos

HS, CS, DS

Lecticanos
Proteoglicanos

CS, KS*

Decorin* Biglycan Fibromodulin

SLRPs

Lumican Keratocan Mimecan

Trombomodulin

CS,DS,KS

CD44 (19 isoformas)

NG2/CSPG4 Cadena invariante Neuroglycan-C Colgeno tipo XVIII Perlecan Agrin Betaglycan Colgeno tipo IX
John R. Couchman and Csilla A. Pataki; An Introduction to Proteoglycans and Their Localization; J Histochem Cytochem 2012 60: 885

Otros

VARIABLE

John R. Couchman and Csilla A. Pataki; An Introduction to Proteoglycans and Their Localization; J Histochem Cytochem 2012 60: 885

John R. Couchman and Csilla A. Pataki; An Introduction to Proteoglycans and Their Localization; J Histochem Cytochem 2012 60: 885

DNDE SE LOCALIZAN?
Tcnicas de inmunohistoqumica Dificultades tcnicas significativas Ac. Con especificidad limitada Ac. Heparan, Dermatn, Condroitin-S pero no vs heparn sulfato. Western-Blot

Proteoglycan sequence; Mol Biosyst. 2012 June ; 8(6): 16131625

DISTRIBUCIN?
Tejido conectivo: Decorina Cartlagos: Agrecano

Membranas basales: Agrina, Perlecano, Colgeno tipo XVIII

Transmembrana

Eritrocitos sin PGs

CD44, Syndecanos y Glipicanos pueden ser hibridos. Localizacin nuclear
Proteoglycan sequence; Mol Biosyst. 2012 June ; 8(6): 16131625

FUNCIONES

Desarrollo

Heparn sulfato es indispensable para la vida multicelular FGRF, Clulas tallo. Receptores de mitgenos Papel el progresin tumoral (MM)

John R. Couchman and Csilla A. Pataki; An Introduction to Proteoglycans and Their Localization; J Histochem Cytochem 2012 60: 885

FUNCIONES

Arquitectura tisular

John R. Couchman and Csilla A. Pataki; An Introduction to Proteoglycans and Their Localization; J Histochem Cytochem 2012 60: 885

Hochberg: rheumatology, 5th ed. - 2010 mosby CHA PTER8T hearti cula r cartilage THESCIEN T IFI CBA SISOFRHEUMATIC DISEASE the articular cartilage

FUNCIONES

Regulacin inmune

John R. Couchman and Csilla A. Pataki; An Introduction to Proteoglycans and Their Localization; J Histochem Cytochem 2012 60: 885

FUNCIONES
Bsicas
Desarrollo
Heparn sulfato es indispensable para la vida multicelular FGRF, Clulas tallo. Receptores de mitgenos Papel el progresin tumoral (MM)

Enfermedad
Glipicanos:
(3)Sndrome Simpson-GolabiBehmel. (5) Sx. Nefrtico adquirido. (6) Omodisplasia autosmica recesiva. Delecin: Fatal Mutaciones: Displasia disegmentaria tipo SilvermanHandmaker Schwartz-Jampel
Osteocondritis dissecans Neurocano: Bipolar Brevicano: AlzHeimer

Perlecanos

Arquitectura tisular Regulacin inmune: Hialuronano. Papel en Enfermedad

N-Sulfatacin: NDST 1 y 2, 6-O-Sulfatacin: 5 epimerasa or 2O-sulfotransferasa

Lecticanos

Enzimas modificadoras de Heparn sulfato

John R. Couchman and Csilla A. Pataki; An Introduction to Proteoglycans and Their Localization; J Histochem Cytochem 2012 60: 885

DEGRADACIN

Mltiples vas lisosomales en vas de investigacin.

Enfermedades por almacenamiento: Ausencia de enzimas especficas para la hidrlisis de Glucosaminoglicanos.

John R. Couchman and Csilla A. Pataki; An Introduction to Proteoglycans and Their Localization; J Histochem Cytochem 2012 60: 885

PUNTOS A RECORDAR