Mecanismos de Toxicidad

CONOCIMIENTO DE LA TOXICIDAD
Niveles de profundidad: Qu ocurre?: efectos, patologa Cmo sucede?: fisiopatologa Por qu se produce?: mecanismos
(bioqumicos y moleculares)

Mecanismos de Toxicidad
Todos los procesos de accin txica pueden resumirse en dos grupos principales, segn consistan en:
afectacin de la integridad de la estructura celular alteracin de la funcin celular.
procesos inmunitarios (mixtos)

Mecanismos de Toxicidad
Destruccin Celular total
Alteracin de la membrana Celular
Vascular, muscular, nerviosa, etc.

Alteracin de los rganos subcelulares

Estructura Celular

ACCION SOBRE

Retculo endoplsmico Mitocondrias Ribosomas Lisosomas Cito esqueleto DNA

Funcin Celular

Mecanismos de Toxicidad
Estructura Celular

Mod. de Permeabilidad de las Membranas Modificacin de la Actividad Enzimtica Inhibicin

Estreo ismeros Tiolprivos Hg, Pb, Cu, Ag, Mn Metalprivos SH2, CNH, CO Reaccin

ACCION SOBRE

Funcin Celular

Activacin

Induccin
Modificacin de la Reproduccin Celular
Genotoxicidad Mutagenicidad Carcinogenesis Teratogenesis

Mecanismos de Toxicidad
Los efectos nocivos que se derivan de la unin de una sustancia qumica con las biomolculas pueden ser de dos clases:

potencialmente reversibles, de carcter subletal, generalmente de tipo funcional, e

irreversibles, frecuentemente letales para la clula, que se expresan como modificaciones estructurales.
Los investigadores se afanan por encontrar los indicadores que marquen el punto de no retorno, es decir, el momento en que se establece el dao definitivo o se inician los pasos que decididamente conducen a la muerte de la clula o necrosis.

Accin sobre la ESTRUCTURA CELULAR

1. Destruccin celular total 2. Alteracin de la membrana celular: vascular, nerviosa, etc 3. Alteracin de los orgnulos subcelulares:
a. b. c. d. Retculo endoplsmico Mitocondrias Ribosomas Lisosomas

Mecanismos de Toxicidad
AFECTACION DE LA ESTRUCTURA CELULAR

Mecanismos de Toxicidad
la biotransformacin de xenobiticos se pueden originar dos tipos de metabolitos especialmente reactivos:
los agentes alquilantes o arilantes y los radicales libres

Ambos son capaces de: establecer enlaces covalentes con biomolculas celulares y originar especies de oxgeno activo, formadoras de perxidos a partir de lpidos celulares, principalmente fosfolpidos de membrana.
Regulados por los niveles de glutatin (GSH) y otros proteintioles que, como agentes nucleoflicos pueden neutralizar a los radicales libres y, como compuestos oxidables, pueden reducir especies oxidantes, en tanto el organismo disponga de suficiente reserva de dichos tioles.

Mecanismos de Toxicidad Muerte Celular

Tradicionalmente, la muerte de la clula se ha denominado necrosis (del griego necro, muerte)
procede del griego onkos, hinchazn. Se utiliza en sustitucin del de necrosis, para situaciones patolgicas en que la principal caracterstica de la clula enferma es su inflamacin, seguido de formacin de vesculas y estallido

Oncosis y Apoptosis

se aplica a la muerte para el recambio celular fisiolgico, que elimina las clulas daadas, precancerosas o en nmero excesivo (como un antnimo de mitosis); pero se ha visto que la Apoptosis tambin puede inducirse por xenobiticos

Mecanismos de Toxicidad

Por definicin, Apoptosis es la muerte celular por un proceso activo, controlado genticamente, que elimina clulas no necesarias o daadas. Se origina por lesin o modificacin del ADN nuclear, la cual lleva a cambios en la estructura que conducen a la fragmentacin celular sin respuesta inflamatoria.

MUERTE CELULAR

Necrosis

Apoptosis

Necrosis secundaria

APOPTOSIS
en griego: cada natural de los petalos de las flores

"Muerte fisiolgica (programada) celular"

DIFERENTE DE LA NECROSIS

INDUCIBLE POR TOXICOS QUE ACTIVAN A:

* * CASPASAS, ETC *

TOPOISOMERASA ENDONUCLEASA

Apoptosis en Toxicologia

Ejemplo: estrs oxidativo por dimetilnaftoquinona: concentraciones bajas (10 M): proliferacin medias (30 M): apoptosis altas (100 M): necrosis

Mitosis

Seal 1

+
Clula en reposo Clula activada

+
Seal 2

Apoptosis

QUINASAS DEPENDIENTES DE CICLINA (CDK) CDK MITOSIS

PROLIFERACION
SEALES

TRANSFORMACION APOPTOSIS

INHIBICION

XENOBIOTICOS

Papel desequilibrador del txico

Factores Antiapoptsicos Factores Proapoptsicos

Bcl

p-53, Apf, FAS, Bax

Txico

Apoptosis

MUERTE CELULAR
CAUSA
GENETICA (NATURAL)

DENOMINACION
APOPTOSIS

MECANISMO
ENDONUCLEASA

AGENTES
DIOXINAS CORTICOIDES T-BUTILESTAO Cl4C QUINONAS PEROXIDOS CISTAMINA FALOIDINA PARAQUAT

TOXICA

NECROSIS

PEROXIDACION

GSH ATP Ca++

RUPTURA DE MEMBRANAS CITOESQUELETO

DIFERENCIAS ENTRE APOPTOSIS Y NECROSIS

VARIABLE
Origen Especifidad Celular Proceso Tamao Celular

APOPTOSIS
Programacin Gentica S

NECROSIS
Accidental No Pasivo Aumenta: (Balonamiento) Se desintegra Se desintegran Flocula Roturas al Azar No; Lisis Total S

Activo. Consume Energa

Disminuye. Condensacin Ncleo Se conserva. Aparecen Vesculas Se conservan Se agrega a Membrana Fragmentacin a Nucleosomas

Membrana Plasmtica Orgnulos Cromatina Adn Cuerpos Apoptsicos Reaccin Inflamatoria

Se forman
No

Apoptosis visualizada mediante:

Hematoxilina eosina

TUNEL

Fluorescencia

Electroforesis en Gel en agarosa

Mecanismos de Toxicidad Alteraciones de la funcin Celular

Modificaciones de : * Permeabilidad de la Membrana * Actividad Enzimtica:

* Reproduccin

A) afectarn a la entrada y salida de nutrientes, frmacos y excretas, tambin iones Na, K y Ca, responsables de los fenmenos de polarizacin y despolarizacin de la membrana y, en definitiva, de la transmisin elctrica del impulso nervioso. B) Inhibicin: esteroisomeria, tiolprivos: As, Hg, Pb, Cu, Ag, Mn que, al formar sulfuros muy estables con tioles, inactivan enzimas importantes en la respiracin celular como las deshidrogenasas. Son los vulgarmente conocidos como metales pesados,

metalprivas; inactivan a los citocromos respiratorios, a la superxido dismutasa, la glutatin reductasa, protectoras de la peroxidacin lipdica copulando los elementos metlicos indispensables para la funcin enzimtica, como Mg, Mn, Fe, Cu, Se; son el SH2, CHN, CO.

Modificaciones de la reproduccin.
En la divisin celular: (Mitosis) impedimento en formacin de huso acromtico; :. Corte en la distribucin de cromtidas. (colchicina), En el material gentico (c. nucleicos):
alteraciones transmisibles, si se afecta ADN, en cl.

germinales ( mutagnesis, teratognesis).

alteraciones no transmisibles si se afecta el ADN,

en cl. somticas (cancerognesis), el ARN o la transcripcin en la sntesis de protenas (cancerognesis, otras).

Clases de mecanismos de toxicidad segn su ESPECIFICIDAD o la actuacin sobre receptores:

Clase
A

Mediacin
Por receptores

Accin
especfica

B
C

No-receptores
Reacciones inmunitarias

especifica/ inespecfica
(si/no R) especfica / inespecfica

Genes metaboliz. lpidos

CNCER HEPTICO

Proliferacin Peroxisomas
PROMOCIN TUMORES

PP ep PPAR
Genes reguladores crecimiento Proliferacin Hepatocitos

PP= Proliferadores de peroxisomas PPAR = Receptor nuclear de esteroides activados por PP ep= Mecanismo epigentico

Proliferacin de peroxisomas hepticos

No Mediado por receptores:

Acciones especficas basadas en: Interaccin con molculas pequeas e iones con formacin de quelatos. Reemplazo o sustitucin de constituyentes celulares por xenobiticos Suplantacin de metabolitos por antimetaboltos.

Acciones inespecficas: Cambios en permeabilidad de la membrana. Alteraciones irreversibles ( causticacin)

MECANISMOS LESIVOS IRREVERSIBLES

1.- CAUSTICACION 2.- ALQUILACION.ARILACION REACTIVOS ELECTROFILICOS ESTRES OXIDATIVO
2.1.- REACCIONES RADICALARIAS
2.2.- REACCIONES CON ESPECIES DE OXIGENO ACTIVO 2.3.- REACTIVOS DE OXIDO NITRICO 2.4.- TIOLES REACTIVOS

3.- ALTERACION DE LA HOMEOSTASIS DEL Ca

La causticacin supone una desorganizacin de los componentes tisulares. Es una quemadura qumica, diferente de la trmica, producida en el lugar de contacto del txico con el tejido orgnico, tanto en piel, mucosas externas y en vas digestivas y respiratorias, as como en rin, mdula espinal, nervio ptico, etc., donde llegan o se concentran determinados xenobiticos o se originan metabolitos para los que resultan especialmente sensibles los tejidos locales (fenol, formol, tricloroactico, etc.).

Los agentes custicos (alcalinos) y los corrosivos (cidos) son sustancias de pH distante del fisiolgico, o bien oxidantes o deshidratantes, disoluciones de algunos cationes orgnicos o inorgnicos, aniones aromticos (como el cido saliclico), detergentes catinicos, etc., que destruyen o al menos desorganizan la arquitectura celular al desnaturalizar las protenas

De las cuatro clases de estructuras que configuran las protenas, la estructura primaria, es decir, la constituida por la secuencia lineal de los aminocidos, unidos mediante enlaces covalentes, es la ms resistente. Pero las estructuras secundaria, terciaria y cuaternaria, mantenidas por enlaces mucho ms dbiles, como los puentes de hidrgeno o de disulfuro y fuerzas de Van der Waals, respectivamente, son ms fcilmente atacadas

La muerte celular por custicos alcalinos se denomina necrosis colicuativa, pues va acompaada de reblandecimiento y licuefaccin (tumefaccin y colicuacin) del tejido, mientras que los cidos producen coagulacin, endurecimiento o fijacin.

En general, la unin de un frmaco con sus receptores es altamente reversible, lo que favorece la caducidad de la accin y la intervencin de los antagonistas. Ello indica que las fuerzas de unin xenobitico-receptor son bastante dbiles, del tipo de puentes de hidrgeno, dipolo-dipolo o interacciones de dispersin (de Van der Waals). En algunos casos se ha mostrado un mecanismo de transferencia de carga, mediante la cesin parcial de un electrn por parte de un xenobitico a la biomolcula. De esta manera se altera la actividad biolgica de la misma o se modifica el comportamiento qumico de las molculas implicadas

Pero las modificaciones ms importantes de los receptores se producen cuando el xenobtico establece con ellos uniones qumicas mediante enlaces covalentes. Entonces, sta adquiere un carcter generalmente irreversible; supone todos aquellos casos en los que las biomolculas experimentan reacciones de alquilacin o arilacin, segn que el reactivo sea lineal o cclico, muy frecuentes en procesos txicos en los que homlogos naturales son sustituidos por xenobiticos que se fijan fuertemente.

Los reactivos alquilantes son capaces de actuar sobre cualquiera de los componentes qumicos celulares. As, establecen enlaces covalentes con los aminocidos proteicos, del hem (sobre la lisina) y sobre las bases de los cidos nucleicos (ADN y ARN) con los que forman aductos, y sobre los componentes del esqueleto celular (miofibrillas). Al incidir sobre los lpidos de la membrana (fosfatidilcolina), especialmente a travs de reacciones radicalarias de peroxidacin, se forman xidos y perxidos de los cidos grasos insaturados (sobre todo de los poliinsaturados, PUFA), con liberacin de alcanos, alquenos, hidroxialdehdos, productos de polimerizacin, etc.

Consecuencias de la biotransformacin
c

Oxidacin biomolculas

Txico

Interaccin fsica o qumica Con sustancias endgenas

biotransformacin
ESPECIES OXIDANTES

S. Q. s no txicas

Radicales libres

S.Q.s electroflicas Unin covalente nucleofilos

Degradacin

Reaccin con molculas no esenciales

INICIACIN COMN DE EFECTO TXICO

Clasificacin de los METABOLITOS REACTIVOS segn su periodo de vida

1. de vida ultracorta: reaccionan con la propia enzima "suicidio enzimtico" 2. de vida corta: reaccionan con otros constituyentes de la clula 3. de vida larga: pueden alcanzar la va sistmica y actuar sobre otros tejidos

Metabolitos Reactivos: Electroflicos

1. Radicales libres: (+/)
un electrn desapareado. Ej: triclorometilo (metabolito del CCl4), paraquat Dficit de 2 electrones Ej: nitrosaminas, acetamidofluoreno

2. Ion carbonio (+) 3. Carbeno (neutro)

Un Carbono divalente con 2 electrones desapareados Ej: monxido de carbono, isocianuros R-N=C 4. S atomico similar carbeno se forma por accin de las MFO, reacciona con las protenas inmediatas, sobre tioles formando disulfuros RSSH, y eliminndose como tiocianato . 5.- Por oxidacin de tioles (R-SH), tioamidas (RS-NH2), tioureas (NH2SC-NH2), etc., se forman sulfinos, sulfenos, cidos iminosulfnicos e iminosulfnicos, etc., tambin electroflicos, ms reactivos cuanto ms oxidados sean; originan aductos con los aminocidos y las bases de cidos nucleicos

Lpidos

Lipoperoxidacin Rotura de las

membranas biolgicas

Radicales libres

Prdida o
Protenas

modificacin de la funcin biolgica

cidos nuclicos

Oxidacin de Mutagnesis

bases nitrogenadas

Formas de Oxgeno activado

Radicales libres inters toxicolgico

1. Extraordinaria reactividad, que les permite establecer uniones covalentes (alquilaciones o arilaciones) muy persistentes con molculas biolgicas nucleoflicas, de donde se derivan trastornos funcionales y lesiones celulares. 2. Gran poder oxidante sobre todo tipo de biomolculas.

P
2 O2

P
2O2

R. HaberWeis

SOD

H2O2 + O2
Fe++
+

Catalasa

R. Fenton

Fe++, Cu++

HO

HO

1O

Formas de Superxido dismutasa

REACCIN DE FENTON:

-Fe3+ H2O2 + Fe2+ Catalasa OH + OH +

Cu

Sigue:

Fe3+ + O2

Fe2+ + O2

Conjunta:

REACCIN DE HABER-WEIS:

. O2 + H2O2

OH + OH-+O2

El proceso fisiopatolgico se puede desarrollar por los siguientes mecanismos: 1. El radical libre del producto primitivo puede alquilar diferentes componentes tisulares (membranas celulares, retculo endoplsmico, enzimas, etc.), produciendo necrosis o dficit metablico o de defensa, o trastornos en la reproduccin celular (cncer) por alteracin de los cidos nucleicos. 2. Las formas de "oxgeno activado" actan preferentemente oxidando fuertemente los lpidos celulares (especialmete los lpidos insaturados) y tambin los compuestos con grupos SH (glutatin, etc.), iniciando lo que se conoce como estrs oxidativo, que da lugar a procesos inflamatorios y citotxicos. Precisamente, los fagocitos activados, en su funcin bactericida, liberan O2, y H2O2.

Destino de los hidroperxidos lipdicos

VIT E

MALONILDIALDEHIDO

Glutation (GSH)

Funciones del Glutation

A:
REDUCCION
(GSH GSSG)

OXIDACION

B:

CONJUGACION
con comp. ELECTROFILICOS MERCAPTURICOS (Orina)

Metabolismo del paracetamol

Acciones fisiopatolgicas por radicales libres

1. Alquilacin de elementos nucleoflicos:
Necrosis Dficit metablico o de defensa Cncer

2. Peroxidacin lipdica en cadena 3. Oxidacin de GSH y protentioles.

Estrs Oxidativo

Estrs oxidativo:
Oxigeno activado

Quelantes
antioxidantes

Fe , Cu

SOD, catalasa Glutatinperoxidasa G 6 - PDH

Lesin ADN Peroxidacin lipdica Oxidacin de Tioles y protenas

< ATP y NADPH Alquilacin / Arilacin Lesin de membrana/ > Ca 2+ Activacin enzimtica

NECROSIS

e Cl4C
MFO, CYP

O2

Cl3C radical

Cl3COO

Peroxidacin lipdica Uniones covalentes a molculas biolgicas Activacin de enzimas calcio-dependientes

Q.F. CLG Curso de Toxicologia 2004

Muerte celular

ETANOL Y RADICALES LIBRES

CH3 - CH2OH
O2 -C

CYP-450 II E1 OXIDASAS
Peroxidacin Lipdica Aductos 8-(1-hidroxietil)guanina 8-(2hidroxietil)guanina

H CH3 H2O2 OH 1-hidroxietilo

En:

Membranas Retculo endoplsmico Hgado De: Ncleo Mucosa gstrica Corazn Cerebro

+ factor quimiotctico Leucocitos PMN Testculos

Q.F. CLG Curso de Toxicologia 2004

RESUMEN MECANISMOS RADICALARIOS

Radicales Alquilantes que no alteran el GSH
Producen
Uniones covalentes Peroxidacin lipdica

CCl4 Txicos: Bromoformo Cl vinilo Halotano

Radicales Alquilantes que consumen GSH

Uniones covalentes

Txicos:

Producen

Peroxidacin lipdica Eliminacin de Ac Mercaptrico

Alil alcohol P-acetamol Cinamaldehido Dietilmaleato

Metabolitos No-Alquilantes sino Oxidantes Nitrofurantoina (ciclos Redox) Txicos:

Producen Peroxidacin lipdica
Q.F. CLG Curso de Toxicologia 2004

Naftoquinonas Paraquat Bleomicina

Selectividad celular de los radicales libres

Diana
Hepatocito Neumocito Cl. endoteliales vasc Clulas bronquiolares

Txicos
CCl4 Paraquat Alcaloides de pirrolizidina CCl4, bromobenceno Compuestos furnicos (4-ipomeanol, etc.)

TIOLES REACTIVOS
I:) POR OXIDACION DE TIOALCOHOLES (Mercaptanos): R-SH
SE FORMAN:

R-S.OH R-S.O2H R-S.O3H R=C=S=O (R)2.SO (R)2.SO2

Acidos Sulfnicos Acidos Sulfnicos Acidos Sulfnicos Sulfenos Sulfxidos Sulfonas

TIOLES REACTIVOS
II:) POR TRANSTIOLACION:
R-X hidrocarburo halogenado

GSH +Glutatin

GS-R
Glutamiltransferasa Gliciltransferasa

Glu Gly

Cys-S-R
-liasa

H-S-R
muy electroflico

ADUCTOS NECROSIS

Reacciones por xido ntrico

Donadores Enzimas
Acciones
Peroxidacin de:

Nitratos Arginina

NOS

NO . NO NO+ O -2
peroxinitrito

Lpidos
tioles inh. Enzimtica Alt. transp. elec.

Activacin

ONOO Calmodulina

+2 .2 NO NO

3. Alteracin de la homeostasis del calcio

Actualmente se considera que la alteracin de las protenas que regulan el calcio intracelular es el eslabn entre los mecanismos alquilantes o los oxidantes con la muerte celular. Se acepta que la concentracin de calcio en el citosol regula diversas funciones celulares; a su vez esta concentracin, que es extraordinariamente ms baja que la del plasma, es regulada por tres mecanismos: entrada y salida de iones calcio (Ca++) en la clula a travs de la membrana plasmtica, con intervencin de la bomba de calcio; captacin de Ca++ por el retculo endoplsmico, y captacin por las mitocondrias.

Consecuencias
La peroxidacin de lpidos de la membrana o la lesin de las bombas de Ca++ en membrana, mitocondria o retculo, puede elevar considerablemente los niveles de Ca++ intracelulares, por mayor entrada a la clula o por salida al citosol desde las vesculas del retculo endoplsmico, o bien por insuficiencia de la bomba de Ca++ a causa de dficit de ATP por lesin mitocondrial. En esta situacin, el Ca++ citoslico activa a distintas enzimas proteasas y fosfolipasas que participan directamente en la muerte celular.

Alteracin de homeostasis del calcio

c

regulacin
Exceso activa

a.- entrada y salida bomba de calcio. b.- captacin por retculo endoplsmico. c.- captacin por mitocondrias. Lesin ADN citoesqueleto citoesqueleto
( microtbulos)

* Proteasas

Endonucleasas Calpanas Calmodulina

proteinquinasa

* Fosfolipasas

fosforilasa

glucgeno Fosfolpidos( membrana) Lisofosfolpidos citotxicos

Fosfolipasa A2

1. Entre las proteasas activables por el calcio destacaremos la endonucleasa, que fragmenta al ADN, lo que conduce a la muerte celular, y las caspasas, cuya activacin produce daos en el citoesqueleto, por disociacin de los microfilamentos de actina. 2. Tambin se estimula la calmodulina, protena presente en clulas animales y vegetales, que cuando se une a cuatro iones de calcio por cada molcula, modifica su conformacin y activa, a su vez, a otra enzima, la proteinquinasa, que fosforila a la fosforilasa, que participa en la degradacin del glucgeno; la calmodulina tambin afecta al citoesqueleto (microtbulos) y a la divisin celular. 3. Por otra parte, entre las fosfolipasas activables por Ca++ est la fosfolipasa A2 (PLA2) que acelera la hidrlisis de los fosfolpidos de membrana, con liberacin de cidos grasos y lisofosfolpidos, que a su vez son citotxicos.

Enzima inactiva

Calmodulina

Enzima activada

Ca2+

Q.F. CLG Curso de Toxicologia 2004

A travs de estas acciones, aparecen vesculas que, o se separan de ella o se rompen o se fusionan entre s, lo que conduce a la ruptura de la membrana ; a su vez, la disminucin del potencial de membrana mitocondrial se traduce en un dficit de ATP, lo que da lugar a acumulacin de cido lctico, y descenso del pH citoslico.
Con todo ello se llega a disrupcin de la membrana plasmtica y del citoesqueleto, con disolucin de la actina y dispersin de los microtbulos, ms una disminucin del pH intracelular, por acumulacin de cido lctico consecuente a la lesin mitocondrial, desacople de la fosforilacin oxidativa y dficit de ATP.

Ca++ CALIMICINA Activacin de:

TXICO: ESTRS OXIDATIVO Ca++

ATP

ADP

Calmodulina Proteasas Fosfolipasa A2

Ca++ - ATPasa

Alteraciones citoesqueleto
Retculo endoplsmico

Ca++
Ca++
NADP+

Mitocondria

( 10-7 M)
Ca++ Inhibicin Ca++ - ATPasa

Oxidacin NADPH

CICLO REDOX

GSH Deplecin

Protein-tiol deplecin

Otras inactivaciones enzimticas

TXICO

Mecanismos inmunotxicos
Sistema inmunitario
Elementos:
Organos:
Mdula sea Timo Bazo

Clulas: linfocitos Agentes:

Inmunoglobulinas: anticuerpos Mediadores qumicos: linfocinas

Vasos y ganglios linfticos

Procesos Inmunitarios
En los ltimos aos se ha desarrollado vigorosamente la llamada inmunotoxicologa, rama cientfica que estudia tres tipos de procesos patolgicos desde un punto de vista toxicolgico:

a) Las reacciones inmunitarias por sensibilidad adquirida en el contacto con sustancias qumicas (hipersensibilidad).

b) Los procesos de inmunodepresin o inmunosupresin, en que la asociacin de un txico conduce a disminucin de las defensas inmunitarias; aunque lgicamente se trata de un proceso indeseable, a veces es provocado en la clnica para hacer posibles injertos y trasplantes.
c) Fenmenos de autoinmunidad.

El sistema inmunitario realiza una misin defensiva mediante la identificacin de estructuras propias y deteccin de extraas. Esta defensa tiene dos modalidades: una natural, innata, de carcter inespecfico, y otra adquirida, especfica al agente que la provoca, cuyos sucesivos estmulos incrementa la respuesta. Es un complejo sistema repartido por todo el organismo y constituido por rganos especficos (mdula sea, timo, bazo y tejido linftico, formado ste por los vasos y los ganglios distribuidos por todo el organismo) y por clulas perifricas , que son leucocitos diferenciados (linfocitos, macrfagos y micrfagos). Las clulas pluripotentes de la mdula de los huesos son los rganos de produccin de los linfocitos, as como de la maduracin de los llamados linfocitos B, en tanto que los linfocitos T maduran y se diferencian en el timo. El bazo y los ganglios linfticos (incluidos los de intestino, pulmn y piel) son rganos secundarios de diferenciacin. Macrfagos y micrfagos son fagocitos; los primeros quedan unidos a los tejidos corporales, en tanto que los segundos (granulocitos, neutrfilos) circulan en la sangre. Las clulas perifricas se difunden a todos los tejidos a travs del flujo sanguneo y regresan por un sistema vascular propio, el sistema linftico, que finalmente vierte su contenido a la sangre en las venas subclavias a travs del conducto torcico.

Los linfocitos no son todos iguales, no forman una poblacin homognea, sino varias subpoblaciones constituidas por clulas que, gracias a la presencia de diferentes receptores en su superficie, poseen distinta reactividad y funciones. Pueden distinguirse usando tcnica de citometra de flujo y anticuerpos monoclonales. Aunque los linfocitos B y T no se distinguen por su forma, slo las clulas B y su progenie segregan anticuerpos o inmunoglobulinas, mientras que las T, s bien los poseen, no los liberan, sino a las molculas llamadas mediadores, y tienen adems la misin de estimular o reprimir la actuacin de las B.
1. 2. 3. 4. Tan slo un 2% de los linfocitos segregan anticuerpos Los antgenos para los receptores de los linfocitos B son molculas complejas, normalmente glucoprotenas, Los antgenos para los receptores de los linfocitos T pueden ser pptidos pequeos, con 9-11 aminocidos. Cuando se produce esta unin, el linfocito puede resultar estimulado o paralizado; si se estimula, empieza a producir ms anticuerpos idnticos al que se uni al antgeno, y adems crece y se divide y subdivide, dando lugar a una prole o lnea de clulas genticamente idnticas que recibe el nombre de clon. Estas clulas hijas, dedicadas a producir el mismo tipo de anticuerpos, reciben el nombre de clulas plasmticas o plasmocitos. Algunas de estas clulas vuelven al estado de reposo y representan la memoria del suceso, permaneciendo dispuestas a reiniciarlo a la nueva llegada del antgeno. En los tejidos, a partir de los linfocitos T, se diferencian las clulas cebadas o mastocitos.

5.

6.

MDULA SEA

Clula madre comn

TIMO

Linfocitos T
maduros Antgeno

Coadyuvantes Supresores Citotxicos

Linfocitos B maduros
Antgeno

Linfocitos B estimulados Linfocitos T estimulados

Clula plasmtica

Linfocitos T trasformados (mastocitos)

Liberacin de anticuerpos (IgD, IgM, IgG, IgA, IgE) Liberacin de mediadores

msculo plaquetas Terminacin nerviosa de piel eosinfilos

capilar

glndula

Los principales mediadores qumicos que se liberan son:

a) Histamina: que produce aumento de la secrecin mucosa, contraccin del msculo liso (broncoconstriccin, etc.). b) Serotonina. c) Factores quimiotxicos de los eosinfilos (ECF-A) y de los neutrfilos (NCF-A). d) Enzimas diversas. e) Heparina. f) Calicrena y bradicinina ( o bradiquinina). g) Prostaglandinas, tromboxano y leucotrienos (SRS-A), etc.

Hay tambin otras poblaciones de clulas linfoides entre las que destacamos las conocidas como K y como NK; las clulas K (del ingls killer, asesinas) son linfocitos grandes, granulosos, que cuando se les unen inmunoglogulinas G (IgG) especficas presentes en la superficie de otras clulas, provocan la lisis de stas.

Las clulas NK (agresoras naturales) son linfocitos no dependientes de anticuerpos, que realizan una defensa inespecfica contra clulas infectadas por virus, contra clulas neoplsicas, o con el ADN alterado; intervienen tambin en la inmunidad innata, y se les considera un eslabn entre los sistemas inflamatorio e inmunitario.
La eliminacin en el timo de los linfocitos inmaduros y de los que posean receptores anmalos, as como la actuacin de los linfocitos K asesinos, (que mediante perforinas abren poros en las clulas que atacan) tienen lugar mediante procesos de apoptosis, tras activacin de caspasas, algunas de las cuales intervienen como enzimas convertidoras (activadoras) de interleucinas (ICE).

Los linfocitos T activados segregan tambin citocinas o citoquinas (interleucinas), poliptidos que transportan seales entre clulas y que, a su vez, estimulan la reproduccin clonal de los linfocitos T y el aumento de eosinfilos, y estn presentes en las enfermedades autoinmunitarias. Igualmente son citocinas el factor de necrosis (NF) y el factor de necrosis tumoral (TNF) que favorece la destruccin de las clulas cancerosas; ambos participan en la apoptosis desencadenada por txicos, como portadores de seales de muerte celular. Debe recordarse que las relaciones entre las clulas se producen por dos vas: contacto clula-clula, o liberacin de mediadores que reciben el nombre de hormonas y, en inmunologa, citocinas o citoquinas. Estas son pequeas molculas de polipptidos que intercambian informacin dentro de la misma clula, a otra clula prxima o a clulas situadas a cierta distancia, y sus funciones son quimiotxicas y reguladoras; se sintetizan no slo dentro del sistema inmunitario, sino tambin en otros tejidos. Las citoquinas producidas por los linfocitos se denominan linfoquinas.

Hay tres clases principales de citoquinas: a. Factores de crecimiento. Se producen en la mdula sea, clulas endoteliales, fibroblastos y linfocitos B y T. b. Mediadores en la inflamacin : Interfern Tipo I ( IFN-a , IFN-b ) , generados por linfocitos y fibroblastos. Factor de necrosis tumoral ( TNF- a ), liberado por macrfagos estimulados por bacterias. Su sobreproduccin puede conducir a shock y muerte. Interleuquina-1 ( IL-1 a , IL-1 b ); son pirgenos. Interleuquina-6 c. Citoquinas inmunomoduladoras. Son tambin interleuquinas IL, de las que se conocen ms de 18. Actan como factores de activacin, maduracin y diferenciacin de los linfocitos.

Afectacin txica del sistema inmunitario

Hipersensibilizacin: puede deberse a una proliferacin de clulas, con o sin estimulacin en la sntesis de anticuerpos, con incremento de los efectos cada vez que el individuo se expone al mismo xenobitico o a otro relacionado con l (reaccin cruzada) Inmunodepresin: puede deberse a que el txico elimine poblaciones de clulas o impida su maduracin o inhiba directamente a los anticuerpos Autoinmunidad: el txico lesiona un rgano, el cual produce o libera molculas propias que actan como antgenos capaces de desencadenar una posterior respuesta inmunitaria contra ellos al provocar la formacin de anticuerpos contra el propio rgano.

Mecanismo de hipersensibilidad (anafilaxia)

Txico Trauma
Leucocitos

Ag. infeccioso

Ig

Mediadores

Anafilaxia

Shock anafilctico
Reaccin violenta, sobreaguda, con posibilidad de muerte, tras la absorcin de un alergeno Consiste en :
Vasodilatacin Incremento de la permeabilidad de los vasos sanguineos, con salida de plasma Disminucin de la volemia, cada de las constantes fisiolgicas, hipotensin y shock Edema pulmonar por acmulo del plasma Angioedema, espasmo bronquial y edema de glotis: gran dificultad respiratoria Miocarditis

Reacciones ANAFILACTICAS

Mediadas por IgE

(reaginas)

Reacciones ANAFILACTOIDES = NO mediadas por IgE

Tipos de reacciones de hipersensibilidad

Tipos
Tipo I Inmediato o

bases mecanismo
IgE mastocitos y basfilos liberacin de aminas IgM, IgG activacin del complemento lisis celular

ej. patologas
anafilaxia asma,rinitis,conjuntivitis fiebre del heno Hemlisis, anemia, agranulocitosis trombocitopenia anemia hemoltica autoinmunitaria alveolitis, lupus, enf. del suero, dermatitis por contacto

Tipo II

Tipo III

IgE,IgM,IgG activacin del complemento Linfocitos T

Tipo IV Hipersensibilidad retardada

Ej. de alteraciones inmunitarias por metales. 1.- Reacciones de hipersensibilidad. Tipo I = Co, Cr, Ni, Pt Tipo II = Au Tipo III = Au, Hg Tipo IV = Be, Cr, Co, Hg, Ni, Au. 2.- Reacciones de autoinmunidad = Hg, Au. 3.- Inmunosupresin = Cd,Co, Hg, Pb, compuestos orgnicos de estao.

Respuesta inmunitaria contra el tiempo

Ttulo de anticuerpos

RESPUESTA PRIMARIA

RESPUESTA SECUNDARIA

Tiempo [ meses]

Inmunodepresin
Por sustancias que a dosis subtxicas inhiben al SI Porque:
Disminuyen el nmero de clulas Impiden su maduracin Disminuyen la sntesis de Ac

Ejemplos:
Derivados orgnicos e inorgnicos de: Pb, Cd, Hg, Sn DDT, PCB, carbaril, metilparation, dieldrin

3. Autoinmunidad
XENOBITICO + PROTENA (ANTGENO)

ANTICUERPOS

LESIN AL TEJIDO

DONANTE DE LA PROTENA

Las reacciones de autoinmunidad se clasifican en dos grupos: respuestas organoespecficas y respuestas sistmicas.
Las organoespecficas consisten en la reaccin del anticuerpo directamente, o mediado por clulas, sobre un antgeno especfico localizado sobre una clula, un tejido o un rgano. Son ejemplos clnicos la anemia hemoltica autoinmunitaria por autoanticuerpos eritrocticos, la miastenia gravis por autoanticuerpos contra el receptor de la acetilcolina del msculo, la diabetes tipo I (insulinodependiente) autoinmunitaria, el hipotiroidismo autoinmunitario, etc. En las enfermedades sistmicas autoinmunitarias, las lesiones se presentan en mltiples tejidos cuando, sobre stos o sus vasos, se depositan los inmunocomplejos formados por el autoanticuerpo y los antgenos solubles procedentes del ncleo o del citoplasma de las clulas daadas. Ejemplos de estas enfermedades generalizadas son, vasculitis, lupus eritematoso, artritis reumatoide, discrasias sanguneas, esclerodermia, dermatomiositis, polimiositis, neuropatas, neuroesclerosis, glomerulonefritis, etc.

Se acepta que en la gnesis de los trastornos autoinmunitarios participan los polimorfismos enzimticos, que dan lugar a metabolitos diferentes o distintas cinticas de eliminacin. Hasta hace pocos aos, las reacciones de autoinmunidad se consideraban raras, pero un gran nmero de ellas se han reproducido en modelos animales. Unas se manifiestan localmente pero otras son sistmicas o generalizadas, como lupus eritematoso, artritis reumatoide, esclerodermia y neuroesclerosis, dermatomiositis y polimiositis, glomerulonefritis, neuropatas, vasculitis, discrasias sanguneas, etc. En los enfermos se encuentran anticuerpos (autoanticuerpos) contra los distintos constituyentes de las diferentes clulas (ncleos, nuclolos, orgnulos citoplasmticos, membranas, etc.).

XENOBITICO
POR

SIST.INMUNITARIO: FUNCIN clulas perifricas rganos

LINFOCITOS
ANTICUERPOS

POR

LINFOCITOS INH. ANTICUERP

= ANTGENO/HAPTENO
RGANO

REACCIN ALERGICA

EFECTOS

ANTGENO

REACCIN AUTOINMUNIT

Carcinognesis

Tipos:
Va gentica Va epigentica

A) CARCINGENOS GENOTXICOS
NO DEPENDIENTES DE ACTIVACIN (Carcingenos directos) Agentes alquilantes. Mostazas, benceno. Compuestos con halgenos activos Hidrocarburos aromticos policclicos. Nitrosaminas. Aminas heterocclicas y aromticas. Formaldehido. Dialquilhidrazinas. Hidrocarburos halogenados. Biotoxinas. Carbamatos. Metales Fenobarbital, Antioxidantes. Sacarina. Plaguicidas cido nitrilotriactico Estrgenos, Aminotriazol Ciclosporinas. Mercaptopurinas Plsticos. Asbestos Metales

DEPENDIENTES DE ACTIVACIN (Procarcingenos)

INORGNICOS

B) CARCINGENOS EPIGENTICOS
PROMOTORES CITOTXICOS MODIFICADORES HORMONALES INMUNOSUPRESORES MATERIALES SLIDOS NORGNICAS

C) NO CLASIFICADOS
PROLIFERADORES DE PEROXISOMAS MISCELNEOS Clofibrato Dioxano. Hidrocarburos halogenados. Ftalatos. Tioureas

Compuestos carcingenos

INICIACIN

PROMOCIN

PROGRESIN

Virus

Alteracin gentica

Expansin clonal

CNCER INVASIN

Activacin de
Radiaciones

protooncogenes

METSTASIS

Inactivacin de

genes supresores de tumores

Lesin preneoplsica

Harris/Marquardt, 1999

CARCINOGNESIS
GENOTXICOS
COMPUESTOS
Unin a

CARACTERSTICAS Bases ADN, ARN Cadenas ADN, ARN Protenas

Requieren activacin metablica

EJEMPLOS
Epxidos, Lactonas, Ni, Cr, U

Carcingenos

Procarcingenos Cocarcingenos Promotores Progresores

HPC, aminas, micotoxinas Pireno, catecol.

Aumentan efecto Absorcin previa simultnea

Inmunosupresores Aumentan efecto Absorcin posterior Hormonas sexuales

(?)
Prdida de control celular

Arsnico, Benceno, Asbestos Ciclinas Hormonas

EPIGENTICOS

Carcingenos qumicos Radiaciones Virus Determinantes genticos

Aumentada

por promotores

Lesin

Mitosis

Reparacin
Clula normal

Apoptosis

ADN daado

Disminuida por

promotores y por bcl-2.

Aumentada por p-53

ETAPAS DE LA CARCINOGNESIS Y MECANISMOS DEFENSIVOS

PROCARCINGENO Activacin metablica

CARCINGENO
Reparacin ADN INICIACIN

ADN E. desalquilasas ADUCTO ADN

Eliminacin Eliminacin base daada nucletidos daados
glucosidasa nucleasas

Desalquilacin

polimerasa I

PROMOCIN

Replicacin ligasas

ADN CNCER

Esquema General Va Gentica

Activacin metablica COMPUESTO ELECTROFLICO ADN
Sustitucin de Bases Fragmentacin-Recombinacin

CARCINOGNESIS
XENOBITICO

equilibrio ADN daado (mutacin) Genes

Mecanismos de reparacin

Protooncogenes Activacin

Gen supresor

Inactivacin
Telomerasa

Activacin

Oncogenes

Acumulacin de mutaciones Mitosis

P.53 bcl-2 bax APOPTOSIS

Proliferacin celular

Tumor

CLASIFICACIN CARCINGENOS
Grupo 1: Carcingenos humanos:
Suficiente evidencia epidemiolgica experimental

Grupo 2: Evidencia limitada:

2.a: Probables carcingenos

2.b: Posibles carcingenos

Grupo 3:

Insuficiente evaluacin

Grupo 4:

Probablemente no carcingenos