DETERMINAR LA CALIDAD DE AGUA DE MAR PARA USO RECREATIVO CON CONTACTO PRIMARIO

Descripcin de la zona de estudio

El rea de estudio corresponde a las zonas recreativas de playa en la Republica Mexicana que de acuerdo a su influencia turstica requieren de vigilancia de la calidad de agua.

OBJETIVOS DEL ESTUDIO REALIZADO

Prevenir riesgos a la salud de la poblacin baista estableciendo criterios de riesgo de acuerdo a los niveles de enterococos presentes en el agua. Establecer el procedimiento de muestreo y el mtodo de prueba para determinar el indicador de calidad de agua de mar. Establecer los criterios para la difusin de informacin confiable a los usuarios de las playas

METODOLOGIA UTILIZADA

1.ATRIBUCIONES Y COMPETENCIAS
Las autoridades estatales de Salud sern responsables: -Realizar los muestreos -Dar a conocer los resultados de la poblacin -Transmitir la informacin al consejo de Cuenca y al Comit Local Playas Limpia. -Enviar los resultados de cada muestreo

2.Criterio de Calidad de Agua de Mar

Se baso en estudios evaluados por la OMS, que establecen indicadores asociados a un aumento de la frecuencia de tipos de enfermedades.

-Tasas de incidencia de enfermedades derivadas de las curvas tpicas de distribucin de enfermedades y de funciones de densidad de probabilidad para organismos indicadores

CRITERIOS DE CALIDAD
Los estudios han identificado a los estreptococos y enterococos fecales como los indicadores ms representativos con los efectos sobre la salud en aguas marinas. Se establece el criterio de playa apta o no pata para uso recreativo.

Criterios para clasificar las playas que la Secretaria de Salud

Enterococos NMP/100ml 0 -500 > 500

Clasificacin de Playas Apta para uso Recreativo No apta para uso recreativo

Criterios para la toma de muestras

Los sitios representativos son: Gran Afluencia de baistas Drenajes Pluviales Descargas de aguas residuales tratadas Embarcaciones pequeas o grandes

Frecuencia de Muestreos
El muestreo se deber realizar una frecuencia mensual , en caso de que las aguas recreativas sean aptas, caso contrario se deber tener prioridad para la vigilancia del muestreo para que las aguas se restablezcan.

Procedimiento de Muestreo
Las Muestras se tomaran de acuerdo a los siguientes consideraciones: 1.-Zonas de oleaje tranquilo 2.-En Zonas de playa con rompiente cerca ala orillas. 3.-Tomar una muestra para determinar la Temperatura

8.Material para el muestreo

-Frascos -Bolsas de Plstico

9.Preservacion de las Muestras y Almacenamiento:

Debe preservarse de 1 a 5c y en oscuridad durante su transporte al laboratorio. Se deben colocar en hielo para evitar que se contaminen ,(bajo ningn motivo debe congelarse). Anlisis inmediato, no debe rebasar las 24 horas desde que fue tomada la primera muestra.

METODOS ANALTICOS

Mtodo del Sustrato Cromo gnico

Son una herramienta potente en la identificacin de microorganismos, debido a la deteccin de enzimas especficas producidas por los microorganismos. Mtodo Enterolert emplea un indicador nutriente que emite fluorescencia cuando es metabolizado por las bacterias del grupo entero coco. El sustrato cromo gnico tal como ortonitrofenil-b-D, es empleado para detectar la enzima b-glucosidasa, la cual es producida por la bacteria.

Formulacin del sustrato

Se establece a partir de la composicin de los sustratos requeridos para el desarrollo y determinacin de presencia y ausencia de patgenos.

Se requiere la fiabilidad del proveedor , para obtener un sustrato de buena calidad.

Procedimiento
Se inicia con un mezclado de agua esterilizada en una relacin de dilucin 1:10. Luego se coloca la muestra en el correspondiente dispositivo, se distribuye en las 49 celdas grandes y 48 pequeas. Se incuba durante 24 h, a 41C 0.5C. Finalmente se realiza el conteo para determinar NMP de enterococo.

Resultado de la interpretacin
Se observa un cambio de color en las celdas ala hora de ser expuestas a la luz ultravioleta. Si hay fluorescencia se presencia la existencia de enterococos ,en caso contrario hay ausencia de enterococos. El anlisis se debe tomar en un plazo mximo de 24h ,de lo contrario los resultados pueden alterarse.

METODOS DE TUBOS MULTIPLES

PROCEDIEMIENTO DE PRUEBA
Inocular una serie de tubos de caldo de Azida dextrosa 35 0.5C que mostraron turbiedad, en caso de no encontrar reincubar y volver a leer al final de 48 3h. Procedimiento de prueba confirmativa Considerar los tubos que mostraron turbiedad despus de 24 a 48 horas de incubacin como positivos. Sembrar una porcin de crecimiento de cada Incubar en las cajas invertidas a 35 0.5 C por 24 2 h. Colonias cafs negruzcas con halos color caf confirman la presencia de estreptococos fecales.

Metodo de filtro de membrana

Para llevar acabo este metodo se usa cristaleria y otros aparatos compuestos de material libre de patogenos como :
Botellas de muestreo Pipetas graduadas estriles. Contenedores para medio de cultivo. Cajas de cultivo. Petri plsticas pre esterilizadas. Unidad de filtracin. Filtro de membrana. Microscopio binocular

 Calentar para disolver los ingredientes, Esterilizar y mantener en un bao de agua de 44 a 46 C. Medio recomendado para cultivo de enterococos

El pH debe llegar a 7.1 0.2 antes de pasar por la autoclave. Calentar para disolver los ingredientes, esterilizar y mantener en un bao de agua de 44 a 46C.

 Este medio es recomendado para el Grupo D de estreptococos en agua dulce y marina.

Procedimiento:
1. Seleccionar un tamao de muestra y filtrar. 2. Incubacin. Invertir las placas de cultivo e incubar a 41C 0.5C por 48h 3. Despus de 48 horas por incubacin, transferir cuidadosamente el filtro al medio EIA. Incubar a 41C 0.5 C por 20 minutos. 4. El conteo de colonia es usando lmpara fluorescente
por medio de una lupa.