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Leishmania sp.
Classificao: Filo Sarcomastigophora Sub-filo Mastigophora Ordem Kinetoplastida Famlia Trypanosomatidae Gnero Leishmania Caractersticas gerais Protozorio flagelado Dois hospedeiros obrigatrios (igual ao T. cruzi /brucei ), heteroxnico Habitat: - Vetor: lmen do trato digestivo (Subgenus Leishmania: intestino anterior/mdio) (Subgenus Viannia: intestino anterior/mdio/posterior) - Hospedeiro vertebrado: clulas do sistema mononuclear fagocitrio (SMF), principalmente macrfagos
Polimrfico: Promastigota
Paramastigota Promastigota metacclico Amastigota Reproduo por diviso binria
Inseto
Hospedeiro mamfero
Organizao celular
- Genoma com 36 chromossomos (L. major, Projeto genoma completo), 8305 genes identificados (4/2005) - K(C)inetoplasto, trans-splicing
Ciclo de vida
Formas promastigotas metacclicas regurgitadas por mosquitos so depositadas na dermis, onde so fagocitados por macrfagos
Vetores (Diptera, Phlebotomidae: Lutzomiya, Phlebotomus), no territrio brasileiro: Lutzomiya longipalpis, L. wellcomei e outros
Promastigotas dentro do fagolisossomo se transformam em amastigotas, que se multiplicam no macrfago. A clula hospedeira rompida liberando amastigotas que so fagocitados por outros macrfagos
Macrfagos infectados com Leishmanias do subgnero Viannia (espcies das Amricas) contm menos parasitas em vrios vacolos parasitforos (ajuda no diagnstico por microscopia)
Subgnero Leishmania
Subgnero Viannia
Aps ingesto, amastigotas se transformam em promastigotas e se multiplicam dentro de uma membrana formada pelo vetor
Trato digestivo
Membrana peritrfica
Promastigotas se desenvolvem para paramastigotas que aderem em pontos diferentes no trato digestivo (critrio da localizao: subgennero de Leishmania), a proliferao estimulada se a fmea ingere sucos vegetais
Aps 3-5 dias, promastigotas metacclicos migram ativamente para partes anteriores do tubo digestivo
Assim, o parasita parece interferir ativamente com a capacidade de ingesto do hospedeiro mosquito! A saliva do flebotomneo muito importante para a infecciosidade da Leishmania Somente promastigotas metacclicos so infecciosos para os hospedeiro vertebrado!
C3b iC3b
Protena gp63 cliva o fator do complemento C3b para iC3b. Complemento ajuda na aderncia das promastigotas nos macrfagos (receptor principal CR3). Interao de LPGs e gp63 com fibronectina tambm ocorre. Esta via de internalizao no leva a produo radicais de oxignio ou NO (silent entry)
Receptor de complemento
CR1
M
iC3b
Porque uma clula profissional do sistema fagocitrio no consegue eliminar um parasita dentro do fagossomo?
1. A sinalizao para ativao do macrfago est impedido por ao de LPG: Traduo de sinais, mobilizao de clcio, ativao de Proteina kinase C.
M
2. Induo de resposta disfuncional: inibio da produo de radicais de OH e NO Falha na apresentao em MHC2 aps estimulao com IFN Fosfoglicanos bloqueiam produo de IL-12
IFN
3. Proteina tirosina quinases tambm so bloqueados Secreo de EF1 da Leishmania para o citossol Ativao de SHP-1 (uma Phosphotirosina fosfatase) Inativao da Fosfotirosinaquinase: reao atenuada a IFN M
(Leishmanias que ocorrem no Brasil) A expresso diferencial ou presena/ausncia de genes provavelmente causa as diferenas nas patologias observadas
Tegumentaria:
a) Cutnea: - Infeco confinada na derme, com epidermis ulcerada - Velho mundo, L. tropica, L. major e L. aethiopica - Novo mundo, leishmanias do complexo mexicana e braziliensis
- no Brasil:
b) Muco-cutnea: - Infeco na derme (ulceras), invaso de mucosa e destruio da cartilagem - No novo mundo: L. braziliensis, L. guyanensis, L. mexicana (espundia), no Sudo/Etipia L. major, L. tropica
c) Cutnea difusa:
- Infeco confinada na derme, formando ndulos no ulcerados. Disseminao por todo o corpo - Associado a deficincia imunolgica do paciente - Novo mundo, L. pifanoi, L. amazonensis - Velho mundo, L. aethiopica
Responsvel pela patologia o estado imunolgico do hospedeiro predominncia de resposta celular (Th1) leva a imunidade e cura, resposta humoral (Th2) leva s formas crnicas IFN, TNF, IL-2 I MHC Th1 II Clulas T helper
- Na forma visceral, no h resposta Th1 e nem aumento de atividade Th2. Fatores parecem ser do prprio macrfago infectado. Possivelmente, lipofosfoglicanos da Leishmania esto envolvidos.
Leishmaniose Tegumentaria
Clnico Caratersticas da leso e dados epidemiolgicos
Diagnstico
Laboratorial
- Exame direto de esfregaos corados (Romanowsky, Giemsa ou Leishman)
- Exame histolgico
- Cultura - Inculo em animais - PCR (reao em cadeia da polimerase, permite a identificao da espcie infectante) Importante para excluso de tuberculose cutnea, hansenase, infeces por fungos, lcera tropical, neoplasmas
Leishmaniose Tegumentaria
Imunolgicos - Teste de Montenegro (teste da resposta contra formas promastigostas mortas do parasita, resposta celular) - Reao de imunofluorescncia indireta (RIFI) (resposta humoral) - Hemaglutinao indireta
Diagnstico
Laboratorial:
1. Exames Parasitolgicos a) Demonstrao direta do parasita Esfregaos corados com Giemsa ou Leishman de: - Material obtido por puno de medula ssea, fgado ou bao - Biopsia (menos eficiente ~ 50%)
c ) Isolamento em cultivo in vivo Inoculao em animais - Hamsters ou camundongos isognicos (BALB/c) - Cepas dermatotrpicas: pata ou tocinho dos animais (positivo aps 2 a 4 semanas) - Cepas vicerotrpicas via intraperitoneal (positivo aps 6 meses) - Recomendado para o isolamento do parasita nas formas subclnicas Xenodiagnstico - Flebtomos - Usado em pacientes com AIDS portadores de Leishmaniose visceral
2. Testes Imunolgicos
a) Teste de Montenegro b) Testes serolgicos Antgenos (parasitas inteiros, inativados) - Reao de aglutinao direta Cave: Reatividade cruzada com Chagas e tuberculose Visualiza ttulos at de 1:51.200 Leishmaniose visceral ttulo > 1:1.600 (sensibilidade 100%) no Brasil o ttulo > 1:6.400 c) Deteco do antigeno rK39 na urina
3. Anlise do DNA de material recolhido a) Por reao em cadeia da polimerase (PCR) Usa oligonucleotdeos espcie-especficos do DNA dos minicrculos do DNA do cinetoplasto 100% sensvel e mais especfico que sorologia b) Possibilita discriminao de espcies
antimonial pentavalente
Pentostan (estibogluconato de sodio) - antimonial pentavalente - inibe glicolise e sntese - administrao intramuscular ou intravenosa absoro rpida
Antimoniais
Pentamidina
- Administrao intramuscular
- Excretado lentamente, seqestrado nos tecidos (tem uso profiltico contra tripanossomiase)
Anfotericina B - lipoflico
- Liga a esterois (ergosterol) da membrana formando poros. Funciona como um ionforo - 2-5% excretado na urina - 90% ligado a protenas do plasma - Meia vida 18 horas
Miltefosin
2. Imunoterapia
Medidas de preveno
Identificao de focos de Leishmania (animais infectados em proximidade a domiclios: silvestres e domsticos: erradicao Imunizao em massa de cachorros (Leishvaccin) Vacinas para seres humanos? Componentes da saliva de Phlebotomneos como vacina?
Mosquito palha
fmea
macho
Medidas de preveno
Tratamento de sintomticos e assintomticos em regies com alta incidncia de flebotomneos Tratamento/exterminao de animais domesticos infectados
Dentistas:
Ateno na hora do tratamento de pacientes em rea endmica: eventuais leses na boca
Med. oral patol. oral cir.bucal (Internet) v.12 n.4 Madrid ago. 2007
Literatura: L. Rey: Parasitologia Markells & Voges Medical Parasitology Links interessantes: http://www.hhmi.ucla.edu/parasite_course/Default.htm http://www.genedb.org/genedb/leish/index.jsp http://www.leishmaniasis.info/
1. Cita uma espcie de cada Leishmania causadora para leishmaniose cutnea, mucocutnea e visceral, que ocorre no Brasil. 2. Associe as formas amastigota, paramastigota e promastigota metacclico de Leishmania aos seus habitats (clula/tecido) de ocorrncia. 3. No humano, em qual tipo de clula ocorre a proliferao de Leishmania?
4. Explique as diferenas morfolgicas entre o processos da infeco do humano por Anopheles/Plasmodium e Flebotomneo/Leishmania 5. O que necessrio para se infectar acidentalmente no tratamento odontolgico de um portador de Leishmania braziliensis com leso nos lbios?