UNIDAD IV- Mtodos pticos

Turbidimetra y Nefelometra
D- Dispersin. Nociones bsicas de Turbidimetra y Nefelometra. Aplicaciones.
Turbidmetro porttil Dra. Adriana Sales. Prof. Qca. Analtica II

La Turbidimetra y la Nefelometra son

tcnicas analticas basadas en la

dispersin de la luz por partculas que estn en

suspensin en el seno de una solucin.

Turbiedad : La turbiedad es una propiedad ptica caracterstica de las dispersiones.

Esta propiedad ptica hace que la luz se disperse en lugar de propagarse en lnea recta a travs de la muestra. Dicha dispersin la ocasiona la interaccin de la luz con las partculas suspendidas en la muestra (arcilla, materia orgnica, partculas inorgnicas, algas,

organismos microscpicos ) que impiden el paso de la

luz a travs del medio.

Turbidimetra: fundamento

Se mide la disminucin de la potencia de la radiacin emitida por una fuente al atravesar la solucin de la muestra debido a la dispersin sufrida.
Adecuada para concentraciones relativamente altas de partculas en suspensin

Nefelometra: fundamento

Se mide la radiacin dispersada en una direccin que forma, en general, un ngulo recto (90o) con la radiacin incidente.
Adecuada para concentraciones bajas de partculas en suspensin

Fundamento terico
Conceptos de dispersin y reflexin
Reflexin: se produce cuando incide una radiacin en la interfase entre dos materiales de ndice de refraccin distinto.

Dispersin: cuando la luz interacciona con partculas de pequeo tamao induce oscilaciones en las cargas elctricas de la materia que emiten ondas secundarias en todas las direcciones.

Fundamento terico
DISPERSIN: se produce cuando el tamao de la partcula es del mismo orden de magnitud o menor, a la longitud de onda del haz de luz incidente y adems estn

en un medio con ndice de refraccin distinto al suyo

propio.

REFLEXIN: se produce cuando las partculas son de mayor tamao con respecto a la longitud de onda incidente (aprox. 2).

Partculas que producen dispersin en diversas regiones del espectro (nm) Zona espectral Tamao de la partcula (nm) 15.000 750 Estado de agregacin Grandes partculas coloidales Partculas coloidales, macromolculas Molculas pequeas, tomos

10.000 500

IR Visible

RX

Entre todo el intervalo de tamaos de partculas que producen dispersin vemos dos casos:

Dispersin de Rayleigh (tamao no superior al 5-10% de la incidente).

Dispersin por partculas grandes (tamao superior al 10% de la ).

 Dispersin de Rayleigh o dispersin de partculas pequeas (tamao menor a 1/10 de la de la luz)

Dispersin simtrica de las intensidades de la luz alrededor de la partculas Distribucin uniforme en todas las direcciones.

Dispersin de partculas grandes (tamao superior al 10% de la de la luz, pero no mayor a 3/2 ).

Distribucin no homognea por interferencias entre los rayos secundarios.

Fenmeno de Dispersin
Haz de luz incidente Energa emitida

En la Dispersin parte de la radiacin es emitida por el analito sin cambios en su energa (o ).

Rojo del atardecer Dispersin de largas de la luz visible por partculas de humo, niebla.

Azul del cielo Dispersin de cortas de la luz visible por los gases del aire

El tamao de la partcula es ms importante en Nefelometra que en Turbidimetra. Nefelometra: es deseable que las partculas sean pequeas para que se produzca dispersin simtrica lo que optimiza la intensidad del rayo observado a 90. Partculas ms grandes desvan en ngulo recto una fraccin ms pequea de luz. En estos caso se puede medir en ngulos menores ya que las mayores intensidades estn hacia adelante.

Turbidimetra: este problema es menor porque lo que se mide es la radiacin total eliminada, independientemente del mecanismo por el que fue desviada.

Variables que afectan a las medidas

La cantidad de radiacin eliminada o desviada del haz primario depende de:

Nmero de partculas. Tamao y forma de las partculas. Relacin entre ndices de refraccin de las partculas y del medio en el que estn suspendidas. Longitud de onda de la radiacin incidente.

 Nmero de partculas
Mayor nmero de partculas, mayor es la dispersin, y menor es la transmisin.
En turbidimetra, la transmitancia no depende de la concentracin

(masa por unidad de volumen), sino del nmero de partculas que

obstruyen el paso de luz por unidad de volumen y del rea de su seccin transversal.

Ejemplo: Clculo del rea de obstruccin a la radiacin visible

que produce 1g. de un slido en suspensin de d= 1,50 g/cc para partculas supuestamente esfricas de radio:

a) 10-5 cm , finamente dividida.

b) 10-3 cm, ms grueso.

Conclusin: El material ms finamente dividido (radio menor) obstruye ms el paso de la luz por unidad de volumen, por lo que

partculas de radio muy pequeo NO se usan en Turbidimetra.

(la Pt es mnima o nula).

a) Una partcula finamente dividida:

Volumen de todas las partculas:

No de partculas totales:

El rea de una partcula sera:

El rea para toda la suspensin:

b) Partcula ms gruesa

 Tamao y forma de las partculas

Variables que influyen en el tamao y la forma de la partcula durante la formacin de una suspensin: concentracin de los reactivos, temperatura, pH, orden de agregado de reactivos, forma y velocidad de agitacin, estabilidad de la suspensin, presencia de otros materiales inertes, tiempo de crecimiento de la partcula.

Soluciones de igual concentracin de slidos en suspensin pero de diferente composicin pueden no dispersar la misma cantidad de luz.
Muestras y patrones requieren ser preparados en las mismas condiciones para que tengan una distribucin comparable de partculas. A veces se aaden agentes tensioactivos para estabilizar el estado coloidal y evitar formacin de partculas grandes o precipitacin. (glicerina, goma arbiga, etc). Para Nefelo el tamao de la partcula es ms importante que para Turbidi.

 ndices de refraccin de las partculas y del

medio dispersante

Para que haya dispersin los ndices de refraccin de la partcula y del medio deben ser distintos.

En algunos casos es conveniente cambiar el solvente para que la

diferencia entre los ndices de refraccin sea ms grande.

Longitud de onda de la radiacin

La es un factor ms crtico en Turbidimetra ya que en este mtodo es necesario reducir a un mnimo la absorcin. Al medir la T de una suspensin no es posible distinguir entre la radiacin eliminada por absorcin de la consumida por dispersin y es por esto importante elegir una a la que la muestra presente mnima absorcin.

En Nefelometra la incidente no es un problema excepto si induce fluorescencia.

INSTRUMENTACIN
Esquema de un TURBIDMETRO

Pueden usarse espectrofotmetros

Esquema de un NEFELMETRO

Nefelmetro marca BIOGEN: Fuente de luz laser rojo ngulo de deteccin variable

TURBIDMETROS
FUENTE: luz blanca (lmpara de wolframio) con un buen sistema monocromador para reducir al mnimo la absorcin. SMC: prisma o redes CUBETAS: cilndricas pero es preferible cubetas de caras planas DETECTORES: fototubos + fotomultiplicador

NEFELMETROS
FUENTE: luz lser He-Ne, halgenas y de Xe.

Turbidimetra

(similar a ley de Beer)

S= TURBIDANCIA k = TURBIDICIDAD

= turbidicidad= 2,303 .k

(depende del tamao y forma de la partcula, , ndices de refraccin de las partculas en suspensin y del medio). b= CAMINO PTICO

Expresin vlida nicamente para partculas pequeas que presentan solamente dispersin Rayleigh.

Para que la medida sea exacta la potencia transmitida (Pt) no debe

ser similar a la potencia incidente (Po ) , por lo que la suspensin no debe ser demasiado diluida.
Existen desviaciones al igual que en la Ley de Beer.

En la prctica se construye una recta de calibracin en la que se representa S en funcin de concentraciones conocidas de material dispersante.

Principio de la turbidimetra

Nefelometra
Relacin emprica entre la potencia de luz dispersada y concentracin:

donde :

C es la concentracin
Pd: potencia de la radiacin dispersada Po: potencia de la radiacin incidente Ks es una constante del sistema determinada empricamente (de la recta de calibracin); puede englobar Po.
En la prctica se construye la recta de calibracin bajo condiciones rigurosamente controladas. Se suele representar el log (Pd/Po) vs. concentracin.

COMPARACIN
Turbidimetra Concentraciones altas. Menor importancia el tamao de la partculas. Ms crtica la eleccin de la long. de onda (se debe evitar absorcin). Unidad: A o T. Nefelometra Concentraciones bajas. Importante el tamao de las partculas. (pequea para disp. Rayleigh) Menos crtica la eleccin de . Unidad: NTU o FTU.

Unidades de Turbiedad
La unidad de turbiedad (TU) fue definida "como la obstruccin ptica de la luz causada por una parte por milln de slice en agua destilada.

NTU, proporciona una referencia a la tcnica de medicin nefelomtrica.

1 unidad nefelomtrica de turbidez (NTU) = 1 ppm de formazina 1 unidad nefelomtrica de turbided (NTU) = 7,5 ppm de Si02

FTU: unidad de turbidez de la formazina. Es idntica al NTU.

Patrn : Formazina
Suspensin polimrica estable

Hexametilentetramina

Formazina

Aplicaciones
En laboratorios de control ambiental:
Se utilizan estas tcnicas en el anlisis de la calidad qumica del agua y de bebidas, para determinar la claridad. Para el control de los procesos de tratamiento, aguas residuales, cosmticos, lubricantes, etc. Determinacin de sulfatos, carbonatos, cloruros,calcio, zinc, etc. Control de aire donde se determinan polvo y humos.

Aplicaciones
En laboratorios de anlisis clnicos:
Control de crecimiento bacteriano en un medio nutriente lquido. Mtodos basados en reacciones inmunolgicas mediante la formacin de complejos antgeno-anticuerpo solos o inmunocomplejos unidos a micropartculas. Ejemplos: Determinacin de protena C reactiva, transferrina, protena S antignica libre, etc.

Aplicaciones
En Farmacia:

Determinacin de productos farmacuticos como aminocidos, vitaminas, antibiticos, nicotina, etc.

Importancia de la turbiedad

La turbiedad de un lquido es importante por muchas razones dependiendo de su uso.

Adems del atractivo esttico del agua clara, una baja turbiedad es importante en el
agua potable para minimizar los agentes patgenos contenidos en ella. La turbiedad del agua puede ser causada por organismos dainos, por partculas que los alimentan o por partculas que pueden protegerlos en los procesos de desinfeccin. La ley exige que los depsitos de agua mantengan una turbiedad uniformemente baja en su producto final de consumo. En otro tipo de lquidos, la turbiedad puede ser causada por partculas perjudiciales para su uso final. Puede usarse la turbiedad como control de calidad para supervisar la eficacia del proceso de tratamiento.

Aplicaciones de la Turbidimetra (T) y de la Nefelometra (N) segn el analito

Analito Mtodo Suspensiones Reactivo Interferencia

SO42Se

ToN T

BaSO4 Se

BaCl2 SnCl2

Pb Te

Te
Ag K Ca2+ F-

T
ToN T

Te
AgCl K2 NaCo(NO2)6

NaH2PO2
NaCl Na3Co(NO2)6

Se
-SO42-