GRAM ( - ) ENTEROBACTERIAS

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ENTEROBACTERIAS

BACILOS GRAM (-) CATALASA (+) OXIDASA (-) MOVILIDAD +/v FERMENTATIVOS AEROBIOS Y ANAEROBIOS FAC.

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HABITAT DE ENTEROBACTERIAS

Estas bacterias se encuentran diseminadas en la naturaleza. Ya que habitan en el canal intestinal de diferentes especies incluyendo al humano. Por lo tanto, estn en el agua de los ros, tierra, alimentos y en prcticamente todas las muestras ambientales.
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CONCEPTO DE ENTEROBACTERIAS Las enterobacterias son homogneas como familia, pero heterogneas como gneros y especies. Existen semejanzas en pruebas primarias lo que las agrupan como familia. Las pruebas secundarias diferencian gneros y especies

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MEDIOS DE CULTIVO
Las enterobacterias crecen en medios simples de laboratorio, aunque existen medios perfectamente definidos para su aislamiento. Para las muestras diarreicas se usan los medios diferenciales y selectivos de enrriquecimiento, para la sangre y LCR la metodologa es ms compleja.

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CONFIRMACION DE GENERO y ESPECIE

Las pruebas bioqumicas IMViC, TSI LIA, Malonatos, Ureasa, Ornitina, DNAasa, Fermentacin de CHOs y otras ayudan a la identificacin de genero y especie. La serologa es fundamental para la identificacin de serotipos de Escherichia, Salmonella, Yersinia y Shigella.

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COPROCULTIVO
Tcnica bacteriologica por medio de la cual se intentara el aislamiento e identificacin de bacterias patgenas y saprofitas a partir de una muestra de heces.

Debe tenerse presente que las enterobacterias pueden ser aisladas de sitios extraintestinal ( sangre, LCR, orina, liquido biliar, pleural, ascitis ).

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GNEROS
En la actualidad se reconocen ms de 20 gneros, de los cuales 5 (Escherichia, Salmonella, Shigella, Klebsiella y Yersinia) son considerados como patgenos primarios y los restantes se les designa como patgenos oportunistas.

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COLIFORMES

BACILOS LACTOSA (+) INDICADORES BIOLOGICOS DE LA CALIDAD DEL AGUA Y LOS ALIMENTOS SE VALORAN POR EL NMP/100 ml

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GENEROS Y LA LACTOSA

Lactosa (+) rpida Escherichia Enterobacter Klebsiella Lactosa (+) lenta Serratia Erwinia Edwarsiella

Hafnia Tatumella Kluyvera Lactosa (-) Salmonella Shigella Proteus

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ACTIVIDAD SOBRE LACTOSA

La lactosa se usa como un sustrato de importancia para la diferenciacin de los gneros de las enterobacterias, basado en su presencia en los medios de cultivo: Agar MacConkey, Agar verde brillante, EMB etc., Las colonias sern diferentes segn su actividad sobre este disacarido. Lo que depende del gen B-galactosidasa.

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OBJETIVOS. GENERAL:

Que el alumno aprenda a clasificar los diferentes gneros de la familia Enterobacteriaceae por medio de sus caractersticas bioqumicas y morfolgicas.
PARTICULARES:

1. Que se familiarice con la utilidad y aplicacin de los principales medios de cultivo para enterobacterias.
2. Que clasifique enterobacterias por morfologa microscpica, colonial, pruebas bioqumicas primarias y secundarias. 3. Que conozca la importancia de las pruebas de serotipificacin. 4. Que aprenda el manejo de tablas de identificacin.
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Diagrama de trabajo
Cepa bacteriana Sembrar en medios Diferenciales y selectivos

Gram

1 Bioqumicas primarias EMB MC SS XLD DC BRV SB 2 Bioqumicas secundarias Comparar la morfologa colonial en estos medios

1 OF, catalasa, oxidasa y motilidad

Identificacin con tablas

2 NO3, indol, MR-VP, citratos, TSI, malonatos, H2S urea, descarboxilacin de lisina, ornitina, arginina

Tipificacin serolgica

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MATERIAL

Medios de cultivo y bioqumicas: 1 placa de AST o BHI 1 placa de MacConkey (MC) 1 placa de Eosina Azul de Metileno (EMB) 1 placa de Sulfito Bismuto (SB) Reactivos: 1 placa de Xilosa Lisina Desoxicolato Peroxido de hidrogeno 30% (XLD) Tiras reactivas (oxidasa) 1 placa de Salmonella Shigella (SS) Aceite mineral 1 placa de Desoxicolato Citrato (DC) Reactivo de Kovack o Erlichs 1 placa de Bilis Rojo Violeta (BRV) Rojo de metilo 2 tubos de OF KOH 40% 1 tubo con Nitratos Alfa-naftol 1 tubo con SIM Alfa-naftilamina 1 tubo con MR VP Otros Ac. Sulfanilico 1 tubo con Citratos Mechero Colorantes de Gram 1 tubo con Urea Microscopio 1 tubo con Malonatos Asa bacteriolgica 1 tubo con TSI Agua destilada estril 1 tubo con MIO Cubre objetos 1 tubo con caldo arginina Portaobjetos 1 tubo con LIA
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Material Biolgico E. Coli Salmonella Proteus Klebsiella

Escherichia Coli

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Escherichia Coli

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Klebsiella pneumoniae

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Klebsiella pneumoniae

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Proteus mirabilis

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Proteus mirabilis

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Salmonella typhi

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Salmonella typhimurium

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