UAGRM FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS-ZOOTECNIA

BIOTECNOLOGIA TRANSFERENCIA DE EMBRIONES

INTEGRANTES: Blanca Luz Miranda Joaqun lvarez Vaca

Domingo molina Querema Ernesto Gary Prado F.

DOCENTE:

DR. Carlos Guzmn

TRANSFERENCIA DE EMBRIONES

Qu es una Transferencia de Embriones? Es una tcnica para el mejoramiento gentico del ganado, consiste en provocar que una vaca o vaquilla "donadora", mediante un tratamiento hormonal e inseminacin con un toro probado con un alto valor gentico, produzca varios embriones que siete das despus le son extrados para ser transferidos a otras hembras receptoras, que previamente fueron sincronizadas con el calor de la "donadora". La receptora no transmite ninguna caracterstica gentica a la cra y slo sirve para mantenerla hasta el parto y durante la lactancia.

Por qu se Realiza la Transferencia de Embriones? En condiciones normales, cada vaca produce una sola cra al ao, lo cual significa que cuando mucho producir 6 a 8 becerros durante su vida. A travs de la inseminacin artificial se pueden obtener miles de cras de un toro; con la transferencia de embriones se han llegado a tener ms de cien cras de una vaca durante su vida productiva, lo cual facilita el mejoramiento gentico, con el consecuente incremento de la produccin de carne y/o leche

ETAPAS DE LA TARNSFERENCIA DE EMBRIONES La tcnica de la Transferencia de Embriones incluye varias etapas, desde la seleccin de donadoras hasta la transferencia del embrin. Las principales etapas relacionadas son: a. Induccin de la superovulacin (donadora) b. Sincronizacin del ciclo estral (receptoras) c. Recoleccin de los embriones (donadora) d. Clasificacin de los embriones e. Almacenamiento por corto plazo y cultivo f. Criopreservacin g. Transferencia de los embriones (receptoras) En la actualidad han sido factibles muchas otras tcnicas relacionadas con la TE como el sexado, la micromanipulacin, la fertilizacin in vitro y la donacin.

VACAS DONADORAS El valor de la donadora puede ser definido de acuerdo a diferentes criterios segn los beneficiarios. Sin embargo, en el caso de la aplicacin prctica de la tcnica para el mejoramiento gentico del ganado, debemos escoger a las vacas ms productivas como donadoras. Adems, estas vacas, deben de cumplir con los siguientes requisitos:
a. No presentar enfermedades hereditarias b. Tener excelente historial reproductivo y salud c. Alto valor en el mercado d. Ciclos estrales regulares e. No tener enfermedades que afecten la fertilidad f. No ser demasiado viejas.

VACAS RECEPTORAS Bsicamente deben reunir las caractersticas de sanidad y control reproductivo al igual que las donadoras, estos animales pueden ser de cruzas comerciales o de raza distinta a la donadora. Se refieren vacas con una conformacin de media a grande, que tengan buen instinto materno (que hayan parido con anterioridad), y que tengan un diagnostico previo de no preez.

HEMBRA SELECCIONADAS COMO DONADORA Y RECEPTORA PARA EL PROGRAMA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONARIA POR EL GRUPO DE REPRODUCCION BOVINA

Sincronizacin Estral Donadora/Receptora

Se ha demostrado que para transferir con xito embriones debe existir una adecuada sincrona entre el calor de la donadora y el de la receptora, el embrin requiere un medio ambiente uterino propicio para poder continuar se desarrollo y convertirse posteriormente en un becerro vivo, que es el producto final del proceso. Para el proceso de sincronizacion se trabajo con los siguientes protocolos: Donadora: Dib-gestavec-benzoato de estradiol-folltropin-sincrocio Receptora: Dib-benzoato de estradiol- folligon-sincrocio

SINCRONIZACIN DE CELOS EN DONANTES:

Una forma de sincronizar el celo en las donantes es mediante la administracin de PGF2a. Otra forma es prolongar la fase Luteal de manera artificial mediante la administracin de progesterona o progestgenos, esta opcin es la ms utilizada actualmente dado que la aplicacin de estrgenos al colocar los dispositivos o implantes, controla la dinmica folicular posibilitando comenzar el tratamiento superovulatorio en cualquier momento del ciclo estral. En cambio, cuando se inyecta PGF2a puede ocurrir que: - Todas las donantes presenten celo inducido o natural en los prximos 5 das. Algunas donantes no presenten celo. En ese caso, al administrar una segunda dosis de PGF2a 11das despus, todas estarn en fase Luteal y por lo tanto en condiciones en responder

Programa de transferencia embrionaria donde la sincronizacin de celos en donantes y receptoras se lleva a cabo con PGF2a y la induccin a la superovulacion con FSH

SINCRONIZACIN DE CELOS EN RECEPTORAS: La transferencia de embriones puede efectuarse indistintamente sobre celo natural o inducido. En ambos casos, para obtener buenos resultados de preez, el celo de las receptoras debera tener una sincronizacin no mayor a 48h con el de la donante, resultando ideal que no sea mayor a 24h. Cuando se efecta la administracin de una sola dosis de PGF2a a hembras seleccionadas mediante palpacin transrectal por poseer un cuerpo lteo es necesario reservar un nmero mayor de receptoras por donante porque dicha prctica tiene una eficacia que vara entre el 71% y el 96% para lograr mayor precisin puede utilizarse ultrasonografa. Se considera que el promedio de embriones transferibles por cada donante es alrededor de 5, se sincronizan 8 receceptoras por donante dado que algunas deben ser descartadas antes de efectuar la transferencia por razones diversas: quistes ovricos, celos anovulatorios, imposibilidad de cateterizar el crvix, etc.

La sincronizacin de las receptoras puede efectuarse tambin utilizando dispositivos o implantes con progesterona o progestgenos. Detectar celos en las receptoras resulta una complejidad desde el punto de vista prctico. Para ello, al momento de la colocacin de los dispositivos intravaginales, se les administra progesterona y benzoato de estradiol para controlar la ovulacin. Luego de la transferencia, en las receptoras se controla el no retorno. A los 14 das postransferencia puede extraerse una muestra de sangre para realizar un diagnstico temprano de gestacin, basado en la determinacin de progesterona en plasma.

Programa de transferencia embrionaria donde la sincronizacin de celos en las donantes se lleva a cabo con dispositivos intravaginales o con implantes subcutneos conteniendo progesterona o progestgenos y la induccin a la superovulacin con FSH

PALPACION PARA DETERMINAR EL ESTADO DEL APARATO REPRODCTORDE LA HEMBRA BOVINA E IMPLANTE DEL DIB

CORDON PARA HALAR EN EL MOMENTO DEL RETIRO

AC Accin del DIB: la progesterona a partir de la colocacin del dispositivo es importante sobre la dinmica folicular ovrica, provoca la regresin del folculo dominante y acelera el recambio de las ondas foliculares, esto cese de la secrecin de productos foliculares (estrgeno e inhibina) produce el aumento de FSH que va ser responsable del comienzo de la siguiente onda folicular. ACCION DEL BENZOATO: Provoca una nueva onda folicular, la aplicacin del benzoato de estradiol a la extraccin del progestgeno induce un pico preovulatorio de LH a travs del feed back positivo del estradiol sobre el GnRH Y LH lo que resulta una alta sincrona de ovulaciones.

GESTAVEC: solucin estril de uso parenteral contiene progesterona, hormona luteinica y sy aplicacin

APLICACIN DEL BENZOATO

APLICACIN BIB A LA RECEPTORA

DIAS DESPUES SE RETIRO DIB Y SE OBSERVO EL CELO EN LAS DOS HEMBRAS Deteccin de Estros UN aspecto de vital importancia para obtener buenos resultados en los programas de I.A. y transferencia de embriones es la deteccin de calores es observar, identificar e interpretar los signos externos de celo manifestados por las hembras. Probablemente la razn ms importante por la que fracasan los programas reproductivos es la inadecuada deteccin de los estros. La eficacia de este depende del tiempo y la frecuencia que se dedique.

VENTAJAS QUE TIENE LA TRANSFERENCIA DE EMBRIONES: Permite hacer una rigurosa seleccin por el lado materno logrando un progreso gentico acelerado. Se pueden obtener cras de novillas que an no alcanzan la edad y peso para cargarse, ya que ser la receptora quien se encargue de mantener la preez y parir la cra. Es posible obtener becerros de vacas de alta calidad que por enfermedad o edad avanzada ya no son capaces de producir por s mismas una cra. Con la ayuda de la biparticin de embriones se pueden obtener partos gemelares y aumentar la cosecha de becerros, sin el riesgo de obtener hembras estriles ya que ambas cras, por proceder del mismo embrin, sern del mismo sexo. Es una excelente ayuda para evaluar la capacidad fertilizadora de los sementales, as como para determinar si son portadores de algunos defectos hereditarios. A travs de congelamiento de embriones y de la fertilizacin en el laboratorio se pueden tener cras de donadoras que ya murieron.

DESVENTAJAS EN ESTE PROCEDIMIENTO: Normalmente se requiere de una fuerte inversin inicial debido al alto costo de las hormonas, equipo y mano de obra, as como de la alimentacin de donadoras y receptoras antes y despus de la transferencia. El procedimiento est constituido por infinidad de detalles que deben realizarse a la perfeccin para lograr buenos resultados, por lo que se debe contar con personal altamente capacitado para llevarlo a cabo. La principal desventaja es la imposibilidad para predecir los resultados, ya que hay mucha variacin en la produccin de embriones por cada donadora; adems de que muy fcilmente una pequea falla en el proceso reduce drsticamente el porcentaje de gestacin.

INSEMINACION .A las hembras donadoras se le insemina de 2-3 veces con semen con alta calidad gentica.

Retiro de la pajilla del termo para descongelarla

Paso de la pajilla al termo descongelador a una temperatura de 37C

ARMADA DE LA PISTOLA DE INSEMINAR

INSEMINACION. RECOLECCIN DE EMBRIONES BOVINOS: Son obtenidos del tero por medio no quirrgicos. Su recoleccin y transferencia con xito dependen de varios factores: en primer lugar de la vitalidad de estos para sobrevivir y llegar a trmino despus de ser recolectados del tracto genital, evaluados morfolgicamente y transferidos al tero una hembra receptora, con cambios de medio y temperatura. En segundo lugar, depende de que la tcnica de obtencin no ponga en peligro la integridad del tracto genital, a fin de poder repetirla tantas veces como sea deseable y conveniente.

A los 7 das despus de la inseminacin artificial de las donadoras se recolectan los embriones por medio de un lavado uterino. La mayora de los embriones se encuentran en la punta de los cuernos uterinos conservando una cubierta protectora (Zona Pelcida), que facilita su manipulacin. Inmediatamente despus se intensifican, evalan y clasifican los embriones para posteriormente transferidos a las hembras receptoras.

Los pasos para desarrollar esta prctica, una vez hayan sidos superovuladas e inseminadas las hembras, son: Palpacin y Ecografa para estimar nmero de cuerpos lteos. Anestesia epidural. Higiene de la vulva y zonas adyacentes. Secado. Introduccin de un brazo por va rectal.

Introduccin de la sonda Foley va vaginal. Pasamos vagina, cervix, cuerpo y llegamos al cuerno. Retiramos un poco el estilete. Inflamos el baln con medio de lavado (PBS). Sacamos el estilete. Liberamos medio y lavamos el cuerno.

MATERIALES Mangas de palpacin; Guantes de ltex; Lactato de Ringer; PBS (Medio de lavado); Sondas Foley; Estiletes; Medios de conduccin; Filtros (Minitube); Cajas de Petri; Alcohol; Jeringas; Lidocana (Sin epinefrina).

PROCEDIMIENTO Palpamos los ovarios por va rectal para comprobar la respuesta al tratamiento de superovulacin. Luego de la palpacin se puede hacer uso del ecgrafo. Si la respuesta fue positiva procedemos a pasar la sonda Foley y a lavar los cuernos. Una vez hayamos lavado los dos cuernos llevamos el filtro al laboratorio improvisado en la finca para comenzar su busqueda y clasificacin. Se buscan los embriones y estructuras infertilizadas con magnificacin 15x. Una vez encontrados se separan los ovocitos infertilizados y los embriones degenerados de los buenos o viables. Los embriones viables se llevan a otra caje de Petri con medio PBS y una vez haya terminado la busqueda y clasificacin se lavan 10 veces. Si los embriones van a ser transferidos en fresco se empajillan en medio PBS y si van a ser congelados se empajillan en Etilenglicol (EG). En este caso vamos a preparar los embriones para congelarlos.

PALPACION DE LOS OVARIOS Y LA RESPUESTA DE ESTOS AL TRATAMIENTO DE SUPEROVULACION

APLICACIN DE LIDOCAINA

DIAGNOSTICAR POR ECOGRAFIA

VALORACION MORFOLOGICAS DE EMBRIONES EN FUNCION: Correlacin edad-da de recogida Regularidad de la forma Compactacin de los blastmeros Tamao de los blastmeros Color y textura Presencia de clula extruidas Regularidad de la zona pelucida Presencia de vesculas y picnosis SE TRANSFIEREN Mejores embriones (grados 1-2) Edad embrion acorde con dia de ciclo receptora Se desechan: Embriones mala calidad Retrasados

CONGELACION DE EMBRIONES VENTAJAS Conservacin por tiempo indefinido Transferencia en momento adecuado Herramienta til para animales en peligro de extincin INCONVENIENTES GASTOS elevados de equipo y personal Solo aptos de embriones de buena calidad Daos por congelacin (10%) TRANSFERENCIA DE EMBRIONES 1 Quirrgica: Anestesia general (no muy utilizada) Anestesia local( incisin flanco y acceso cuerno, pero difcil llegara cuernos y estresante para el animal)

2 NO Quirrgico: Anestesia local epidural (la ms utilizada) Lavado y sujecin de la cola Palpacin transrectal del Cl. Introduccin de pistola de Inseminacin embrionaria a travs de crvix Deposicin de los embriones en cuernos uterinos ipsilateral a ovarios con Cl. 2. No Quirrgico anestesia local: Ventajas: Tcnica rpida en 1min. Desventajas: Paso catter por crvix (en novillas) Cansancio del brazo Lesin de la mucosa endometrio Fallos en la gestacin