TINCION DE ZIEHL-NEELSEN

MICROBIOLOGIA GENERAL M en C. Graciela Gonzlez

3QM1

EQUIPO 2

GUARNEROS HERNANDEZ JORGE LUIS GARCIA FLORES MIGUEL ANGEL ZAMORA RUIZ MACARENA SEDILLO TORRES IXCHELL YUREIMY

 Tincin diferencial desarrollada inicialmente por Paul Ehrlich para poner en manifiesto la presencia de los bacilos causantes de la tuberculosis en muestras clnicas.

HISTORIA

Friedrich Neelsen

Franz Ziehl

FUNDAMENTO
Las paredes celulares de ciertos parsitos y bacterias contienen cidos grasos que les confieren la propiedad de resistir la decoloracin con alcohol-cido, despus de la tincin con colorantes bsicos. cido-alcohol resistencia (AAR.)

Mycobacterium y Nocardia
Pared celular con un alto contenido de cidos grasos de cadena muy larga: Ceras cidos miclicos y nocrdicos respectivamente.

Se utiliza para diferenciar las bacterias denominadas cido alcohol resistente (BAAR) del no cido alcohol resistente (NAAR).
Las clulas cido-alcohol resistentes no se decoloran fcilmente con una solucin cido-alcohlica, permaneciendo de color rojo . Esto se debe al elevado contenido en lpidos de las paredes de estas clulas en particular, el cido miclico un grupo de lpidos hidroxlicos de cadena ramificada-parece ser el responsable de la propiedad de cido-alcohol resistencia.

M. tuberculosis. Cordones vistos por Microscopa Electrnica. Fuente: Dra. Marina Luquin. Universidad Autnoma de Barcelona

Tcnica de Ziehl-Neelsen
1.-Hacer un frotis con la cepa de prueba, dejar secar al aire y fijarlo al calor.
2.-Cubrir el portaobjetos con fucsina fenicada.
Fuscina fenicada

3.-Calentar suavemente con el mechero hasta la emisin de vapores (5 min.)

4.-Lavar con agua

5.-Decolorar exhaustivamente con alcohol-cido.

6.-Lavar con agua. 7.-Cubrir el frotis con azul de metileno durante un minuto 8.-Lavar con agua, escurrir, dejar secar. 9.-Observar con objetivo de inmersin.
Azul de metileno

Alcohol cido

Al calentar la preparacin hasta emisin de vapores se favorece la fusin de las ceras y aumenta la energa cintica de las molculas facilitando la penetracin del colorante a la clula.

Al suspender el calentamiento y lavar con agua fra se provoca la solidificacin de las ceras.

El proceso de decoloracin es muy enrgico por lo tanto cualquier bacteria que no contenga abundantes lpidos perder el colorante primario y tomar el colorante de contraste

RESULTADOS
Bacilos cido alcohol resistentes (BAAR Zn+ ) No cido alcohol resistentes ( NAAR Zn- )

INFORME
Morfologa microscpica Microorganismos Mycobacterium phlei Sthaphylococcus aureus Forma Bacilar Cocos Agrupacin Aislada Estafilar (racimos) Acido-alcohol resistencia Zn + BAAR Zn o NAAR

Mycobacterium tuberculosis

Nocardia sp.

Cryptosporidium sp.

Baciloscopia
Es la tcnica de eleccin para el diagnstico rpido y el control del tratamiento de la tuberculosis pulmonar. Es simple, econmica y eficiente para detectar los casos infecciosos. Por eso es la herramienta fundamental de un diagnostico presuntivo de la tuberculosis

BACILOSCOPIA RESULTADOS

Para que la baciloscopia sea positiva es preciso que la muestra tenga como mnimo, entre 5 .000 y 10 .000 bacilos por mililitro de muestra .

Baciloscopia Positiva

Baciloscopia Negativa

COMO REPORTAR RESULTADOS

BIBLIOGRAFIA
http://www.tbrieder.org/publications/books_spanish/orange_guid e_sp.pdf Murray R. Patrick, Microbiologa Clnica. Espaa Madrid 5ed : Elsevier , 2006 Prats, Guillem, Microbiologa Clnica. Buenos Aires; Madrid: Mdica Panamericana 2005. Romero Cabello Ral, Microbiologa y parasitologa humana: bases etiolgicas de las enfermedades infecciosas y parasitarias. 3ed, Mxico: Editorial Mdica Panamericana, 2007.