TEMA: MTODOS CROMATOGRFICOS

SUBTEMA: 7.4 Mtodos de anlisis cualitativo. 7.4.1 Parmetros cromatogrficos. 7.4.1 Tiempos de retencin.

La cromatografa es un sistema de separacin dinmica, porque contnuamente se producen equilibrios entre los componentes de la mezcla a separar y las fases mvil y estacionaria. La fase estacionaria consiste en partculas, generalmente slidas, pequeas y con una superficie microporosa, de forma que presenta un amplio desarrollo superficial.

La fase mvil puede ser un lquido o un gas, y su funcin es transportar a los componentes de la mezcla a travs del

 Un

anlisis cromatogrfico puede dar una amplia informacin cualitativa si se escoge el sistema de deteccin adecuado para determinar y evaluar los analitos separados, as si se utiliza un detector que permita obtener un espectro de cada compuesto separado y a su vez contenga una base de datos que pueda realizar su comparacin con una biblioteca de espectros se podra, de una forma muy precisa, establecer la identidad

Anlisis Cualitativo instrumental: Las caractersticas fisicoqumicas del analito o de su producto de reaccin, son transformadas en seales medibles por instrumentos: pticos, electro analticos, trmicos, etc. que son utilizadas para su identificacin. La identificacin, depende de la comparacin de la seal, al someter al proceso analtico cualitativo a tres alcuotas de: a) Un estndar, que contiene al analito. b) Un blanco, que no contiene al analito y cuya matriz sea semejante a la de la muestra. c) Una muestra, que puede o no contener al analito. El potencial de la instrumentacin confiere al anlisis cualitativo instrumental un mayor campo de aplicacin.

Parmetros cromatogrficos:
Un parmetro es una cantidad que puede tener distintos valores y que caracteriza un proceso, una operacin o un resultado. Un ejemplo muy conocido en matemticas es el radio de un crculo. El radio puede cambiar de valor de un crculo a otro, pero siempre caracteriza al crculo. La parametrizacin de datos en cromatografa, como en otros mtodos, facilita la tabulacin y la comunicacin de dichos datos. Se puede parametrizar la forma, la posicin y la resolucin de las bandas de una cromatografa.

PARMETROS CARACTERSTICOS DE UN CROMATOGRAMA:

Tabla de parmetros cromatograficos experimentales

 Ecuaciones y parmetros.

Eficacia:
La separacin de los componentes depende del ancho de los picos y del espacio de tiempo (o volumen) entre los picos. Como consecuencia, se puede obtener una separacin eficaz de un par de componente, tanto con bandas estrechas como anchas. Sin embargo, si las bandas son anchas la separacin puedes llevar ms tiempo, como se ilustra en la figura; cuando todos los dems efectos son iguales, se prefiere bandas estrechas. La eficacia cromatografica (N) es el parmetro que cuantifica la presencia por las bandas estrechas. Esta propiedad puede obtenerse de las caractersticas de una banda individual, pero no todas las bandas individuales d un cromatograma poseen el mismo valor de eficacia.

Mejorar la resolucin. (a) Los dos componentes parcialmente resueltos pueden resolverse completamente; (b) afilando las zonas, (c) Separando las bandas, o ambos. Suponemos que la velocidad de flujo es la misma en los tres cromatogramas y que las muestras son idnticas. Las condiciones de (c) no son tan buenas como las de (b); se tarda mas tiempo en obtener una separacin de la misma calidad. Obsrvese que la sensibilidad de la escala vertical del cromatograma (b) ha disminuido. Si las escalas verticales fueran iguales en los tres casos, la altura de los picos de (b) seria considerable mayor que en (a) y en (c). A pesar de ello, las reas de los

Tiempo de Retencin y Tiempo Muerto:

Tiempo de Retencin El tiempo que transcurre despus de la inyeccin de la muestra para que el pico del analito alcance el detector se denomina tiempo de retencin y se le da el smbolo tR. (ver figura 1)

Tiempo Muerto Es el tiempo tM para que la especie no retenida alcance el

Resolucin:

La separacin relativa de dos bandas a menudo se refiere a su resolucin, Rs. La resolucin se define como:

Aqu, t1 y t2 se refieren a los tiempos de retencin (tR) de la primera y la segunda banda, y W1 y W2 son el ancho de dichas bandas. La figura 3 ilustra la separacin de dos bandas adyacentes como una funcin de sus valores de Rs y su tamao relativo. Se observa que la separacin mejora sistemticamente a mayores valores de Rs, y la separacin es generalmente mejor para dos bandas de igual tamao (y el mismo valor de Rs.). Esto es, mayores valores de Rs se requerirn normalmente para la separacin de las bandas desiguales. http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrfico s_6700.pdf

La resolucin depende de la retencin y selectividad de manera proporcional. A mayor selectividad y retencin k, mayor resolucin.

Volumen de retencin: El comportamiento de retencin refleja la distribucin del soluto entre la fase mvil y estacionaria. El volumen de fase mvil necesario para transportar la banda de soluto desde el punto de inyeccin a travs de la columna, hasta el detector (en el mximo del pico del soluto) se define como volumen de retencin, VR. Se puede obtener directamente del cromatograma multiplicando el tiempo de retencin correspondiente, tR, por el gasto o flujo volumtrico, Fc expresado como el volumen de fase mvil por unidad de tiempo:

VR = tR x Fc

La Fig. muestra la separacin de dos alquenos isomricos. En la cual podemos ver la altura de la inyeccin de la muestra y los tiempos de retencin de los alquenos.

El ensanchamiento de banda (H) El nmero de platos de una columna

(eficiencia, N) es una medida del ensanchamiento de la banda cromatogrfica. Cuando inyectamos un pequeo volumen de analito en una columna forma una banda estrecha en su inicio, pero a medida que el analito migra la banda se va ensanchando. La anchura de pico aumenta con la raz cuadrada de la longitud que la banda ha recorrido. Segn la ecuacin de Van Deemter:

donde:

http://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8246/7/T2cromagraf.pdf

A representa el trmino de caminos mltiples. Esto es porque las molculas no siguen nicamente un camino, hay multicanales, que se deben a la densidad de empacado de la fase estacionaria y afecta segn el tamao y forma de la partcula. B representa la difusin axial, la cual depende de la movilidad de las molculas en las fases. El soluto se difunde desde la zona central que es la ms concentrada hacia las regiones ms diluidas. En esto influye la velocidad v , pues a velocidades muy altas no se alcanza a difundir y predomina el trmino A. Para encontrar la velocidad ptima puede trazarse una curva de Van Deemter al graficar H en funcin de v. Por ltimo, C representa la resistencia a la transferencia de masa. Es necesario ste trmino porque en realidad los fenmenos que ocurren estn fuera del equilibrio.