10 Ano de escolaridade Professor Magalhes

Ponto 1. Em 1987, Pfeffer, botnico alemo, confirmava, em resultado dos seus estudos, a existncia em redor da clula de uma membrana que funcionaria como barreira passagem de gua e solutos e para a qual Naglli e Crammer em 1855, haviam j sugerido o nome de Membrana Plasmtica.

Overton, em 1899, trabalhando com a alga unicelular Chara -, descobrira que as

substancias lipossolveis entravam para a clula muito mais facilmente do que substancias hidrossolveis.

1. Procure explicar em que medida os resultados obtidos por Overton: 1.1. vieram fornecer dados relativamente composio qumica da

membrana plasmtica;
1.2. apoiam a ideia de Pfeffer sobre a funo da membrana plasmtica;

Respostas possveis Ponto 1

1.1.
Permeabilidade distinta para clulas lipossolveis e para clulas hidrossolveis
clulas lipossolveis (entram mais facilmente na clula) clulas hidrossolveis (difcil entrada na clula)

1.2.

A existncia de uma permeabilidade distinta entre as substncias consideradas, confere um efeito de barreira membrana plasmtica, pois nem todas as substncias atravessam a membrana (e penetram na clula) da mesma forma.

Ponto 2. Em 1925, Groter e Grendel verificaram que os lpidos, extrados da membrana plasmtica de eritrcitos, eram fosfolpidos. Tambm verificaram que os fosfolpidos, quando colocados numa interface ar-gua, ocupavam uma rea dupla da rea total da superfcie intacta dos eritrcitos.

1. Com base nos conhecimentos que j possui sobre a estrutura qumica dos
fosfolpidos, procure justificar a forma como os fosfolpidos se dispem numa interface ar-gua.

2. Que novo contributo para a compreenso da estrutura da membrana plasmtica tero fornecido os resultados obtidos por Gorter e Grandel?

Respostas possveis Ponto 2

Figura 1- Modelo proposto por Gorter e Grendel - bicamada constituda por fosfolpidos (1925).

1. Fosfolpido

2.
Bicamada de fosfolpidos

Extremidade polar (hidroflica)

Extremidade apolar (hidrofbica)

fornecida a informao de que a membrana plasmtica possui uma boa coeso estrutural, uma vez que constituda por fosfolpidos. Como se sabe, os lpidos so insolveis em gua, desta forma, em meio aquoso, os mesmos tendem a formar uma agregado de molculas rgidas com o objetivo de diminuir a superfcie de contato (interface) lpidos/gua. Tenso superfcial ser alta.

Ponto 3. No sendo solveis em gua, e devido elevada atrao mtua das suas molculas, os lpidos, quando colocados em meio aquoso, tendem a formar um agregado de molculas rgidas que possibilitam reduzir ao mnimo a superfcie de contacto (interface) lpidos/gua. Este fenmeno a expresso daquilo que se chama tenso

superficial que, nos casos das camadas lipdicas, , assim, muito elevada.
Em 1935, Danielli e Harvey mediram a tenso superficial ao nvel da membrana plasmtica das clulas e obtiveram valores muito mais baixos do que os registados para agregados de molculas lipdicas artificias colocadas em contato com a agua. Com base nestes dados, Danielli e Harvey propuseram um modelo no qual consideravam que para alem da bicamada lipdica, a membrana plasmtica conteria tambm protenas colocadas do lado externo da referida bicamada (figura 2).

Figura 2- Modelo de Danielli e Harvey (1935)

Figura 1 - Modelo proposto por Gorter e Grendel - bicamada constituda por fosfolpidos (1925).

Figura 3 - Modelo de Danielli e Harvey bicamada fosfolipdica revestida por duas pelculas proteicas (1935).

1. Em que medida o modelo de Danielli e Harvey (1935) est de acordo com as evidencias qumicas obtidas em 1925 por Groter e Grendel? 2. A partir dos resultados obtidos por Danielli e Harvey (1935), qual o novo

contributo para entender a estrutura da membrana plasmtica?

Respostas possveis Ponto 3

1.
Permeabilidade distinta para clulas lipossolveis e para clulas hidrossolveis
clulas lipossolveis (entram mais facilmente na clula) clulas hidrossolveis (difcil entrada na clula) A existncia de uma permeabilidade distinta entre as substncias consideradas, confere um efeito de barreira membrana plasmtica, pois nem todas as substncias atravessam a membrana (e penetram na clula) da mesma forma.

2. Valores muito mais baixos do que os registados para agregados de molculas lipdicas artificias colocadas em contato com a agua; valores devem-se existncia de protenas no lado exterior da bicamada

Ponto 4. Danielli e Dawson viriam, pouco mais tarde, a reformular o modelo de Danielli e Harvey, pois constataram que se existissem protenas s de um lado da membrana resultariam diferenas da tenso superficial que a desintegraria. Danielli e Dawson propuseram ento o modelo representados na figura 3.

Camada proteica Bicamada de fosfolpidos

Figura 3 - -Modelo de Davson e Danielli bicamada fosfolipdica revestida por duas pelculas proteicas (1935).

1. Se a membrana apresentasse uma estrutura anloga proposta por Danielli e Dawson, como se poderia explicar a entrada ou a sada da clula de: 1.1. lpidos e substancias lipossolveis? 1.2. gua e substancias hidrossolveis?

2. Sugira algumas alteraes que seriam de introduzir ao modelo da fig. 3, de modo a contemplar possveis objees por si colocadas na resposta questo anterior.

Respostas possveis Ponto 4

1.1.
lpidos e substancias lipossolveis

1.2.
gua e substncias hidrossolveis
no poderiam atravessar a membrana

2. Teria que existir um canal/poro na membrana hidroflico (constitudo por protenas) para permitir a passagem da gua e substncias hidrossolveis.

Ponto 5.
Em 1958, Danielli reformulava, novamente, o seu modelo, desta vez para lhe introduzir poros (fig 4).

Figura 4 - Modelo de Davson e Danielli - bicamada fosfolipdica com poros revestidos por protenas (1958).

Em 1959, Robertson, recorrendo ao Microscpico Eletrnico (ME), conseguiu obter imagens da membrana plasmtica anlogas da microfotografia (fig 5)

Figura 5

1. Descreva o aspeto apresentado pela membrana quando observada ao ME. 2. Explique em que medida as observaes de Robertson vieram apoiar ou por em causa o modelo da estrutura da membrana proposto por Danielli e Dawson.

Respostas possveis Ponto 5

1.
Membrana celular com 3 camadas
duas bandas escuras (zona proteica) uma banda clara (zona fosfolipdica)

2.
Apoiam o modelo da estrutura da membrana proposto por Danielli e Dawson, pois as observaes confirmam que as membranas tm uma estrutura trilaminar concorcordante.

Ponto 6. Como resultados dos seus trabalhos, Robertson, postulou o conceito de unidade de membrana - todas as membranas biolgicas teriam basicamente a mesma estrutura trilaminar concordante com o modelo de Danielli e Davson. Tudo

indicava assim que, finalmente, o problema de compreender a estrutura da membrana plasmtica estava solucionada.

Mas, logo, em 1963, Sjstrand verifica que as interaes lpido/protena no se faziam entre a cabea polar dos fosfolpidos e as protenas.

Um pouco mais tarde outros cientistas mostraram que: - 60% a 70% das cabeas polares dos fosfolpidos podiam ser retiradas da membrana sem perda de protenas;

- As protenas da membrana seriam de dois tipos: protenas hidroflicas (ligadas

fracamente a membrana) e protenas hidrfobicas (fortemente ligadas a membrana)

1. Em que medida se pode afirmar, com base nestes ltimos dado, que as protenas no se dispem formando uma camada continua de cada lado da membrana? 2. Procure indicar qual ser, ento, a localizao na membrana, relativamente

aos fosfolpidos, das protenas:

2.1. hidroflicas 2.2. hidrfobas

Respostas possveis Ponto 6

2.1. 1.
Por que 60% a 70% das cabeas polares dos fosfolpidos podem ser retiradas da membrana sem perda de protenas, ento as protenas no podem formar uma camada contnua (tanto num lado da membrana como no outro lado da membrana).

Protenas Hidroflicas
Zona da periferia da membrana (pelas suas capacidades polares, tal como as cabeas polares dos fosfolpidos

Protenas anfipticas com uma parte Hidrfobica e outra hidroflica

A zona hidrfobica interage com a Zona interior da membrana (pelas suas capacidades apolares atravessa o interior da membrana interagindo com as zonas hidrofbicas dos fosfolpidos) Zonas hidrofilicas que contatam respetivamente com o exterior e o interior da clula

2.2.

Em consequncia das novas pequisas, outros dados foram surgindo, os quais no eram conciliveis com o modelo adotado. Anlises diversas levaram a admitir que as protenas no deveriam formar uma camada contnua sobre os fosfolpidos. Por outro lado, verificou-se que era possvel separar com facilidade certas protenas, enquanto outras no eram facilmente destacveis. Surgiu ento, em 1972, o modelo de Singer e Nicholson que mantm a ideia de bicamada fosfolipdica, mas em que organizao das protenas diferente.

O modelo de Singer e Nicholson usualmente designado por modelo de mosaico fluido, visto que a superfcie se assemelha a um conjunto de pequenas peas e devido ao movimento individual de molculas que constituem a membrana

Ponto 7

A tcnica de criofractura permitiu verificar que as protenas intrinsecas, e provavelmente as extrinsecas, ocupam posies diferentes na membrana, conforme o estado das clulas na altura em que so preparadas para observao. Este facto parecia indiciar que as protenas da membrana possuiam alguma mobilidde.

Em 1970, Frye e Edidim com o objectivo de analisar o comportamento das

protenas na membrana plasmtica, realizaram uma experincia de que apresentamos apenas as caracteristicas gerais.

EXPERINCIA

Fundiram uma clula de homem com uma de rato. Antes da fuso dos dois tipos de clulas, marcaram as protenas de cada tipo de clula com anticorpos, marcados por sua vez com uma substancia flurescente. A flurescncia dos anticorpos que se ligavam s protenas da membrana das clulas de rato era diferente da dos anticorpos que marcavam as protenas das clulas humanas.

A figura de baixo pretende esquematizar a experincia.

Figura 1. Experincia e resultados experimentais obtidos por Frye e Edidim.

1. Descreve os resultados obtidos com a realizao desta experincia. 2. Interpreta os resultados obtidos. 3. Explica em que medida as observaes de Frye e Edidin vieram

alterar o modelo de membrana aceite neste momento.

Respostas possveis Ponto 7

1.
Inicialmente as protenas localizavam-se no interior das suas clulas Aps uma hora, verifica-se uma mistura das protenas das 2 clulas

2.
Pelos resultados obtidos, verifica-se pelos anticorpos correspondentes das clulas em questo, que as protnas se misturam. Isto quer dizer que as protenas se movem.

3. Com estas observaes foi contrariada a ideia, at ento aceite, de que a membrana celular era uma estrutura esttica e que as protenas no se movimentavam. As protenas movimentam-se ao longo da membrana celular.

Frye e Edidin verificaram que as protenas membranares de clulas humanas e de rato, inicialmente se situavam, cada uma, num dos hemisfrios da clula hbrida. Ao fim de uma hora as protenas dos dois tipos de clulas j se tinham deslocado e misturado entre si por toda a superfcie da membrana, conforme se pde verificar pela localizao dos respetivos anticorpos. Estes investigadores constataram, que a membrana no uma estrutura esttica mas, que as protenas podem difundir-se lateralmente na matriz lipdica.

Outros investigadores verificaram que as protenas s muito raramente se deslocam

de uma camada lipdica para outra na membrana.

Outras experincias vieram demostrar que tambm os lpidos presentes na membrana no se apresentavam estticos, mas podem apresentar movimentos de difuso lateral

semelhantes aos das protenas e movimentos do tipo "flip-flop" esquematizados na

figura de baixo.

rpido

lento