La cromatografa se define como la separacin de una mezcla de dos o ms compuestos por distribucin entre dos fases, una de las

cuales es estacionaria y la otra una fase mvil. Varios tipos de cromatografa son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: slidoJiquido (capa fina, papel o columna), liquido,liquido y gases-liquido ( fase vapor ). Todas las tcnicas cromatogrficas dependen de la distribucin de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase mvil, llamada tambin activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relacin con la otra, denominada fase estacionaria. La fase mvil puede ser un lquido o un gas y la estacionaria puede ser un slido o un lquido.

Cromatografia en capa fina En este caso se utiliza una placa recUbierta con fase estacionaria mantenendo un pequeo espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascender, por capilaridad, por la placa y arrastrar los componentes a lo largo de sta produciendo "manchas" de los componentes. En la cromatografa en capa fina (ccf), el grado de elucin de las sustancas depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado. El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte rgido, que pueden ser placas de vidrio, aluminio o polister. Los tamaos de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 10 x20 y 5x2 cm.

Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar la identificacin de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos,se requerirn otras tcnicas de revelado. Eluyentes ms comunes para cromatografa en capa fina. - ter de petrleo - cloruro de metileno - n-hexano - acetato de etilo - Ciclohexano - acetona -tolueno - iso-propanol - dietil-ter - etanol - t-butil-ter - metanol - Cloroformo - cido actico

Reveladores ms comunes para cromatografa en capa fina Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras pueden revelarse mediante: a) Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F25a F366), el nmero que aparece como subndice nos indica Ia longitud de onda de excitacin del indicador utilizado" b) La introduccin de la placa en vapores de yodo c) El roco con una solucin de agualH2SOa 1 :1 (dentro de un compartimiento especialmente protegido y bajo una campana de extraccin de gases). Despus calentar intensamente, por ejemplo, con un mechero. hasta carbonizar los compuestos.

Adsorbentes ms comunes para cromatografa en capa fina. a) Gel de slice (se utiliza en el 80% de las separaciones) b) Oxido de Aluminio Almina (cida, neutra bsica) c) Celulosa (Nativa o micro-cristalina) d) Poliamidas Para la seleccin del adsorbente deber tomar las sguientes consideraciones: a) Polaridad b) Tamao de partcula c) Dimetro d) Area Superficial e) Homogeneidad fl Pureza

Factores que influyen en una separacin por cromatografa de capa fina. a) Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben ms en la fase estacionaria. b) La cromatografa debe llevarse a cabo en un rea sin corrientes de aire. c) Limpieza de las placas. Muchas placas estn contaminadas con grasa o agentes plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequea escala, stas deben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y despus dejar secar completamente antes de aplicar la muestra. d) Pureza de los disolventes.