Falla Ovrica

Apoptosis y Ovario
Implicaciones en la Funcin Ovrica

Dr. Sergio A. Alvernia G.

Tipos de Muerte celular

Necrosis.
-La causa de muerte produce directamente el deceso celular. secundaria a isquemia aguda o dao traumtico. Desencadena un proceso inflamatorio.

Apoptosis.
Muerte celular programada. -La causa de muerte activa una cascada de eventos bioqumicos y moleculares, que son los que producen el deceso celular. -Parte del proceso fisiolgico normal aunque una apoptosis aberrante puede encontrarse en algunas enfermedades. No desencadena un proceso inflamatorio.

Friedlander RM. N Engl J Med 2003; 348: 1365-1375

Apoptosis
Historia
1885: Flemming Degeneracin celular del ovario en conejas. CROMATOLISIS: - Condensacin de la cromatina. - Fragmentacin nuclear. Fenmeno biolgico: Muerte celular programada = APOPTOSIS.
Apoptosis en el ovario: Implicaciones en la atresia folicular.
Flemming W. Archiv Anat Physiol 1885: 221-244 Kerr JFR, Wyllie AH, Currie AR. Br J Cancer 1972; 26: 239-257 Tilly JL, Kowalski KI, Johnson AL. Endocrinology 1991; 2799-2801 Hughes FM, Gorospe WC. Endocrinology 1991; 2415-2422

1972: Kerr, Wyllie

1991: Tilly-Hughes

Apoptosis
Caspasas
Funcin: Proteasas. Cysteine-dependent, Aspartate-specific proteasas. Existen como precursores latentes: Procaspasas Caspasas (forma activa)

Prodominio N-terminal

p10

p20

14 caspasas se han identificado. - Apoptsis Caspasas 2,3,6,7,8,9,10. - Activacin citoquinas Caspasas 1,4,5,11,12,13,14
caspasa 1 = Interleukina-1
Friedlander RM. N Engl J Med 2003; 348: 1365-1375

Apoptosis
Clasificacin Caspasas Mecanismo de Activacin
CARD DED
Sitio especfico de unin molculas proapoptticas Ej: Procaspasa 8 DED FADD

upstream caspasas iniciadoras: Prodominio N-terminal largo. - CARD (Caspase-Recruiting-Domain): Procaspasas 1,2,4,5,9,11,12,13. - DED (Death-Efector-Domain): Procaspasas 8 y 10. downstream caspasas ejecutadoras: Prodominio N-terminal corto. Procaspasas 3,6,7,14.
Friedlander RM. N Engl J Med 2003; 348: 1365-1375

Apoptosis Familia Bcl-2

MITOCONDRIA BH3-onlydomain
Protenas proapoptticas
Bid Bad Bim Bik/Nbk Blk Hrk Bnip3 Nix NOXA PUMA Bcl-Gs

Protenas antiapoptticas

BH3-multidomain

Bax Bak Bok/Mtd Bcl-rambo

Bcl-2 Bcl-xL Bcl-w Mcl-1 A1/Bfl1 Bcl-B

Apoptosis
Factores Mitocondriales Proapoptticos
Activacin protenas proapoptticas BH3-only-domain Familia Bcl-2

Ensamblaje protenas proapoptticas Multi-domain Familia Bcl-2 Actan como poros en la membrana mitocondrial.

LIBERACION PROTEINAS MITOCONDRIALES Citocromo c. Smac/DIABLO. AIF (Apoptosis-Inducing-Factor). Endonucleasa G.

Tilly JL. Nature Reviews/Mol Cel Biol 2001; 2: 838-848 Pru JK, Tilly JL. Cell Death and Differentiation 2002; 9: 95-98 Pru JK, Tilly JL. Mol Endocrinol 2001; 15(6): 845-853 Budd RC. J Clin Invest 2002; 109: 437-442

Fas-ligando
Receptor Fas

Mecanismos de Activacin

Apoptosis

Estmulo Apoptosis Ej: TNF-

Dao DNA

p53
DD DD

BH3-only
Mitocondria

FADD
Procaspasa 8 Caspasa 8

DED

Bax Bad

Microporos Bak

Bid
FADD = Fas Adapter Protein DD = Mutual Death Domain

tBid

AIF Endonucleasa G Citocromo c Smac/DIABLO

Apoptosis
Interaccin Mitocondria-Caspasas

Caspasa 9

Caspasa 3

Caspasa 6

Caspasa 7

RUPTURA: Laminina A Actina Gelsolina Fodrina

Degradacin DNA

Muerte celular
Budd RC. J Clin Invest 2002; 109: 437-442 Friedlander RM. N Engl J Med 2003; 348: 1365-1375

Apoptosis Mecanismos de Activacin

Hidrlisis esfingomielina MEMBRANA CELULAR SMasa (Esfingomielinasa) Sntesis de novo Ceramida Sintetasa

Estmulo apoptosis

Ceramida
Metabolismo

Esfingosina

Disfuncin mitocondrial

Stress Kinasas: C-Jun-amino-terminal p38

Estmulo Receptor FAS

S1P (Esfingosina 1- fosfato)

Apoptosis
Morita Y, y cols. Nature Med 2000; 6: 1109-1114

Dao DNA

Apoptosis

Induccin de respuesta p53

p53
Sistema Supresor de tumor

Activacin cascada genes efectores p53

Mdm2

p21

GADD45

BAX

CDK

Unin-Bloqueo PCNA

Cit.c, Apaf-1, Casp

Detencin ciclo celular

GADD= Growth Arrest and DNA Damage Inducible Protein CDK= Cyclin Dependent Kinase PCNA= Proliferating Cell Nuclear Antigen

APOPTOSIS

Hussein M. Human Reproduction Update 2005; 11; 162-178

Apoptosis
Eventos bioqumicos y moleculares

Tilly JL. Nature Reviews/Mol cell Biol 2001; 2: 838-848 Hussein MR. Human Reproduction Update 2005; 11: 162-178

Control Apoptosis

Homeostasis

Caspasas
Apoptosoma Apaf-1 Cit-c Caspasa -9

Integridad mitocondrial

Bax

Bcl-2

PLASTICIDAD GENMICA Gentica (herencia/mutaciones) Epigentica (metilacin/acetilacin) Endgena (hormonas/citoquinas) Exgena (qumicos/radiacin)

Pru JK, Tilly JL. Cell Death and Differentiation 2002; 9: 95-98

Apoptosis
Implicaciones en la Fisiologa Ovrica
Atresia folicular prenatal. Atresia folicular postnatal. Ovulacin (muerte celular epitelio superficie ovrica). Luteolsis (regresin - muerte celular cuerpo lteo).

Morita Y, Tilly JL. Dev Biol 1999; 213: 1-17 Murdoch WJ. Biol Signals Recept 2000; 9:102-114 Carambula SF, Matikainen. Endocrinology 2002; 143: 1495-1501

Apoptosis y Funcin Ovrica

Atresia folicular prenatal y postnatal

# OOCITOS
in Utero: Gestacin: 16 20 ss. Nacimiento

6 7 millones
1 2 millones 300000

Pubertad Ovulacion Edad Reproductiva

400
Menopausia

Faddy MJ, Gosden RG, Gougeon A. Hum Reprod 1992; 7: 1342-1346

Apoptosis
Implicaciones en la Patologa Ovrica
Menopausia prematura. - Disgenesia gonadal. - Enfermedades autoinmunes. - Falla ovrica post-quimioterapia o post-radioterapia. - Falla ovrica secundaria a tabaquismo. Reproduccin asistida. - Disminucin fertilidad pacientes > 40 aos. Disfuncin mitocondrial Transferencia ooplsmica.
Morita Y, Tilly JL. Dev Biol 1999; 213: 1-17 Pru KJ, Tilly JL. Mol Endocrinol 2001; 15(6): 845-853 Tilly JL. Nature Reviews/Mol cell Biol 2001; 2: 838-848

Apoptosis
Atresia Folicular
HIPTESIS MUERTE OOCITOS
Muerte por defecto intrnseco. Atresia folicular prenatal. Disgenesia Gonadal. Muerte por Negligencia. - Competencia por Factores de crecimiento. Atresia Folicular postnatal. Muerte por autosacrificio. - Interaccin celular.
Tilly JL. Nature Reviews/Mol cell Biol 2001; 2: 838-848 Hussein MR. Human Reproduction Update 2005; 11: 162-178

Apoptosis
Atresia Folicular
Muerte por defecto Intrnseco

Atresia folicular prenatal Disgenesia Gonadal

Tilly JL. Nature Reviews/Mol cell Biol 2001; 2: 838-848 Hussein MR. Human Reproduction Update 2005; 11: 162-178

Apoptosis
Atresia Folicular
Muerte por Negligencia

Atresia folicular postnatal.

Tilly JL. Nature Reviews/Mol cell Biol 2001; 2: 838-848 Hussein MR. Human Reproduction Update 2005; 11: 162-178

Apoptosis
Atresia Folicular
Muerte por Autosacrificio

Seleccin oocitos ms aptos. Transporte mitocondrial DNA mitocondrial.

Tilly JL. Nature Reviews/Mol cell Biol 2001; 2: 838-848 Hussein MR. Human Reproduction Update 2005; 11: 162-178

Apoptosis
Falla Ovrica post-quimioterapia o post-radioterapia
Factor de Supervivencia Survivin ?

Fosfatidil-Inositol-3-Kinasa

S1P

c-Akt
Mitocondria

Ceramida

Bad Bax

Apoptosis

Stress Radioterapia Quimioterapia

S1P = Esfingosina-1-Fosfato

Tilly JL. Nature Reviews/Mol Cel Biol 2001; 2: 838-848 Pru JK, Tilly JL. Cell Death and Differentiation 2002; 9: 95-98 Pru JK, Tilly JL. Mol Endocrinol 2001; 15(6): 845-853

Apoptosis
Falla Ovrica post-quimioterapia

Perez GI, Knudson CM, Leykin L. Nature Med 1997; 3: 1228-1332 Morita Y, y cols. Nature Med 2000; 6: 1109-1114

Apoptosis
Falla Ovrica secundaria a tabaquismo Arnt Ncleo PAH
Ligando Natural ?
NNNGCGTGNNNN NNNCGCAGNNNN Mitocondria

Ahr
Arnt

Transcripcin

DNA
RNAm

Apoptosis

Bax

PAH = Polycyclic Aromatic Hydrocarbons Ahr = Aromatic hydrocarbon receptor

Tilly JL. Nature Reviews/Mol Cel Biol 2001; 2: 838-848 Pru JK, Tilly JL. Cell Death and Differentiation 2002; 9: 95-98 Pocar P, Klonisch T, Hombach-Klonisch S. Reproduction 2005; 129: 379-389

Apoptosis
Falla Ovrica secundaria a tabaquismo

Matikainen T, Moriyama T, Morita J. Endocrinology 2002; 143(2): 615-620

Apoptosis y Funcin Ovrica

Folculo primario Folculo secundario Folculo terciario Clulas de la granulosa

Apoptosis clulas de la granulosa

Folculo Dominante Ovulacin

Atresia folicular

Folculo atrsico temprano Folculo atrsico tardo

Matsuda-Minehata F, Inoue N, Goto Y, Manabe N. J Reprod Dev 2006; 52: 695-705

Interaccin Apoptosis Vs. Proliferacin

FLIP = Fas inhibitory FLICE Inhibitory Protein

Budd RC. J Clin Invest 2002; 109: 437-442

Interaccin Apoptosis Vs. Proliferacin

Matsuda-Minehata F, Inoue N, Goto Y, Manabe N. J Reprod Dev 2006; 52: 695-705

Apoptosis y Funcin Ovrica

Regulacin Clulas de la Granulosa

Folculo dominante

Folculo atrsico

Matsuda-Minehata F, Inoue N, Goto Y, Manabe N. J Reprod Dev 2006; 52: 695-705

Apoptosis y Funcin Ovrica

Inhibicin Apoptosis Clulas de la Granulosa

Sasson R, Amsterdam A. J Clin Endocrinol Metab 2002; 87: 3441-3451

Apoptosis y Cncer
MECANISMOS SUPRESORES DE TUMOR: Sistema p16INK4a Retinoblastoma protein (Rb).
Sistema ARF p53. Telomeros.

Apoptosis Envejecimiento Cncer

Sharpless NE, DePinho RA. J Clin Invest 2004; 113: 160-168

Gracias