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Fermentao
Bioqumica Anaerbica No envolve a cadeia respiratria Industrial Pode ocorrer aerobicamente Obteno de bioprodutos
Fermentao
Bioqumica Anaerbica No envolve a cadeia respiratria Industrial Pode ocorrer aerobicamente Obteno de bioprodutos
Tipos de fermentao
Fcil manejo Menor custo Maior concentrao de produtos formados e maior controle de contaminantes Economia de gua, energia e espao Uso de resduos agroindustriais
Melhor controle do processo (pH, temperatura, oxignio) Facilidade de escalonamento Alta umidade Fcil recuperao do produto formado Fabricao comercial Homogneo
Resduos Agroindustriais
Grande potencial: produtos de alto valor agregado Bagao de cana: um dos maiores subprodutos acumulados Resduo lignocelulsico: Celulose,(fora e flexibilidade) lignina (resistncia) e hemicelulose (elo qumico), ligados covalentemente
Sticklen, 2008
Celulose
Polmero orgnico mais abundante e maior componente da biomassa vegetal Ligaes glicosdicas -1,4
a) b)
c)
Fibrilas unidas por pontes de H Camadas adjacentes unidas por fora de Van der Walls Compacta
Rabelo, 2007.
Lignina
Unio das fibras Heteropolmero constitudo por unidades de fenilpropano Ligaes C-O-C que unem pequenas cadeias de hidrocarbonos: proteo fsica Fornece suporte estrutural
Rabelo, 2007.
Hemicelulose
Carboidratos polimricos Xilana, xiloglicana, glicomanana, galactoglicoman ana e arabinogalactana Vrias enzimas para degradao
Albano, 2012.
Enzimas celulolticas
Complexo de enzimas hidrolticas e oxidativas Catalisam a celulose em monmeros de D-glicose Pouco estudos com leveduras celulolticas
Trichoderma sp.
Aspergillus sp.
Fusarium sp.
Penicillium sp.
Celulases
Endoglucanases
Exoglucanases
-glucosidases
Sinergismo
Martins, 2005.
Outro destino para os resduos: rao animal Fungos, bactrias, algas: aditivos alimentares Cultivo direto em resduos Atraente fonte de: protena, aa, vitaminas, minerais, enzimas
Rhizopus sp.
Saccharomyces cerevisiae
Objetivo
Cultivar leveduras em bagao de cana-de-acar a fim de aumentar o teor de protenas e minerais do resduo, alm de produzir enzimas celulolticas, xilanolticas e amilolticas.
Metodologia
Repique
Padronizao do inculo
7 mL de H2O Retira-se 1 mL para contagem em Cmara de Neubauer X mL
Padronizao
Cmara de Neubauer
4x
Padronizao
Cmara de Neubauer
4x
Padronizao
Cmara de Neubauer
4x
Padronizao
n clulas/mL (Ci)= Mdia dos 5 quadrados x 25 x 104 x FD FD = total/amostra CiVi = CfVf Vi = x Cf = 106 Vf = 50 mL
Padronizao
n clulas/mL (Ci)= Mdia dos 5 quadrados x 25 x 104 x FD FD = total/amostra CiVi = CfVf Vi = x Cf = 106 Vf = 50 mL
Padronizao
n clulas/mL (Ci)= Mdia dos 5 quadrados x 25 x 104 x FD FD = total/amostra CiVi = CfVf Vi = x Cf = 106 Vf = 50 mL
Incubao em Shaker
Inoculao no fermentador
Procedimentos analticos
20 mL de amostra
Estacionri a Declnio
Log
Lag
Estacionri a Declnio
Log
Lag
Adaptao
Estacionri a Declnio
Log
Crescimento exponencial
Lag
Adaptao
Equilbrio
Estacionri a Declnio
Log
Crescimento exponencial
Lag
Adaptao
Equilbrio
Estacionri a Declnio
Esgotamento dos nutrientes
Log
Crescimento exponencial
Lag
Adaptao
Procedimentos analticos
So S
Quantificao de AR
c. 3,5-dinitrosaliclico
c. 3-amino-5-nitrosaliclico
0,5 mL DNS 5 min 100C 0,75 mL extrato 5 min banho de gelo +3,75 mL H2O Leitura a 540 nm
FPase
Mandels et al. (1976) Endo e exoglucanases Substrato papel filtro Whatman n 1 1 FPU: liberao de 1 mol de acar redutor/min/mL de enzima
0,016 g de papel picado 1 mL tampo acetato 0,2 M, pH 5,6 0,5 mL extrato 0,75 mL 50C, 60 min
DNS
CMCase
Ghose (1987) Endoglucanase Substrato: Carboximetilcelulose (CMC) 0,5 % (p/v), pH 5,6 U/mL: 1 mol de acar redutor liberado/min/mL de enzima
DNS
Xilanase
Brienzo et al. (2009) Substrato: xilana 0,5 % (p/v), pH 5,6 U/mL: 1 mol de acar redutor liberado/min/mL de enzima a partir da xilana
DNS
Amilase
Escaramboni (2014) Substrato: amido 0,5 % (p/v), pH 5,6 U/mL: 1 mol de acar redutor liberado/min/mL de enzima a partir do amido
10 minutos, 60C
DNS