ENZIMAS

BASES MOLECULARES DE SU
MECANISMO DE ACCIN
Dr. Valmore Bermdez Pirela, MD, MgSc, MPH, PhD
Universidad del Zulia
Facultad de Medicina
Escuela de Medicina - Ctedra de Bioqumica
Centro de Investigaciones Endocrino - Metablicas
Algo de Historia sobre las Enzimas
Queso, Pan y Vino
Que tienen en comn?
lustracin sobre el queso
en Tacuinum Sanitatis,
libro rabe del siglo XI que
describe los beneficios de
hierbas y alimentos
Escenas de elaboracin de
pan en la Tumba de
Ramss III. Valle de los
Reyes. Egipto.
Elaboracin del vino en el
Antiguo Egipto. Tumba de
Najt, en el Valle de los
nobles.
Historia: Experimentos sobre la digestin
Estudios de Ren-Antoine Ferchault de Raumur sobre la actividad de
los jugos digestivos
El fsico francs Ren-Antoine Ferchault de Raumur tena curiosidad
por lo que ocurra con los alimentos cuando descendan por el tubo
digestivo. Para saberlo, aliment a un cuervo con trozos de comida en
una cpsula de metal pinchada y cerrada. Como el ave excret una
cpsula vaca, Raumur se dio cuenta que el alimento en el tubo
digestivo no se procesa mecnicamente, sino que es disuelto por una
determinada sustancia.
Lzzaro Spallanzani Investig el proceso de digestin mediante
experimentos realizados en su propio cuerpo que casi le cuestan la
vida.
Basndose en los resultados obtenidos con animales, del francs
Raumur, Spallanzani ingiri esponjas y pequeas bolsitas de tela
rellenas de pan o carne. Al cabo de una horas vomit y analiz el
contenido del estmago: los alimentos se haban disgregado a pesar
de no haber estado en contacto con las paredes del estmago. dedujo
que la sustancia digestiva en la digestin era el jugo gstrico.
Utilizando el recogido por las esponjas, demostr que el alimento se
desintegra de la misma manera fuera del cuerpo.
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Las enzimas son compuestos qumicos orgnicos
de naturaleza proteica que aceleran la velocidad
de una reaccin qumica termodinmicamente
posible.
Qu es una enzima?
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Las enzimas aceleran la velocidad de una
reaccin qumica por que se comportan como
catalizadores orgnicos (biocatalizadores). La
catlisis es el proceso mediante el cual se acelera
la velocidad de una reaccin qumica.

Cuando se hace referencia a que la reaccin debe
ser termodinmicamente posible, se destaca el
hecho que en el sistema donde ocurre la reaccin
qumica existe suficiente energa til (energa de
activacin) para realizar el trabajo que implica
convertir el sustrato en producto.
Qu significa este concepto?
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La termodinmica es la rama de la fsica que
estudia los fenmenos energticos y los
intercambios de energa entre la materia.
Qu es la termodinmica?
La termodinmica naci como consecuencia del
estudio de las mquinas de vapor, pero durante el
siglo 20 se observ que poda aplicarse a los
sistemas orgnicos.
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Qu significa energa til suficiente
dentro del sistema para realizar un
trabajo?
Estado inicial
Estado final
S
P
Si dejamos caer una bola,
evidentemente ir hacia abajo sin
ninguna ayuda. El trabajo en este
sistema, est representado por el
movimiento que hace la bola desde el
estado inicial (S) hasta el estado final
(P). Para realizar este trabajo, hace
falta cierta cantidad de energa til
dentro del sistema. Ntese que en ste
sistema hay suficiente energa til que
permite la caida de la bola.
La energa til en este sistema est
representada por la energa gravitatoria
que ejerce una atraccin de la bola
hacia abajo.
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Qu pasara si saliramos al espacio,
fuera de la atraccin gravitatoria de la
tierra?
Estado inicial
Estado final
S
P
Evidentemente, la bola no caera.No existe suficiente energa til en
el sistema en forma de energa gravitatoria para realizar el trabajo, es
decir, que la bola caiga hacia la tierra (la bola esta fuera del campo
gravitarorio de la tierra).
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Si hay suficiente energa en el
sistema.
Estado inicial
Estado final
S
P
Se dice que la reaccin acontecer de
forma espontnea.
Es decir, que S se convertir en P sin
ninguna otra ayuda que la energa til
del sistema.
Caida espontnea
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Consideremos ahora el caso inverso
Estado final
Estado inicial
S
P
Habr energa suficiente en el sistema
Para que se realice el trabajo que se
plantea en la grfica?
Es decir, que la bola suba
espontneamente hacia la mano?
Evidentemente, NO
No hay energa libre suficiente, en forma
de energa ANTI-gravitatoria para hacer
que la bola suba hasta la mano
espontneamente.
Esto quiere decir, que esta reaccin en
este sistema, es una reaccin irreversible.
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En conclusin:
Una reaccin es termodinmicamente posible cuando
hay suficiente energa libre ( til) para realizarla.
Cuando la reaccin es termodinmicamente posible, est
implcito el hecho que esta reaccin ser espontnea.
Si en el sistema hay suficiente energa til, la reaccin
puede ser reversible, es decir, que el producto puede
volverse a convertir en sustrato.
Si en el sistema no hay suficiente energa til despus de
la conversin del sustrato a producto, la reaccin ser
irreversible.
S P
S P
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Volvamos a la termodinmica:
Las leyes.
Primera ley de la termodinmica o ley de la
conservacin de la energa:

La energa no se crea ni se destruye solo se transforma
(de una forma de energa a otra)

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Primera ley de la termodinmica o ley de la
conservacin de la energa:

La energa no se crea ni se destruye solo se transforma
(de una forma de energa a otra)

Esta ley presenta de forma implcita dos ideas:
1. Si la energa nunca se cre y no puede ni destruirse ni acabarse, se
deduce que la cantidad de energa total del universo es constante.
Esto quiere decir, que el contenido energtico del universo no ha
cambiado desde que fue creado (desde el Big Bang) hasta nuestros
das, esto es, desde hace unos 15.000.000.000 de aos.
2. A pesar que el contenido energtico del universo es constante, entre
un momento y otro acontecen transformaciones de una forma de
energa a otra. Para mantener estable la energa total, es de prever
que durante las transformaciones de una forma a otra de energa,
algunas aumentarn, lo que ser compensado con la disminucin
de otras formas de energa.

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La energa no se crea ni se destruye(siempre ha sido y
ser la misma cantidad)
Esquemticamente este proceso puede representarse de la siguiente manera:
Contenido energtico
total del universo
en el momento de
su creacin
Contenido energtico
total del universo
en la actualidad
15.000.000.000 de aos
Obsrvese que la cantidad de energa total
en el universo antes y despus de mucho tiempo, es la misma
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Solo se transforma.en otras formas energticas
manteniendo el contenido total inalterable..
Esquemticamente este proceso puede representarse de la siguiente manera:
Durante los primeros instantes
del universo, todo era luz y calor..
en esencia, solo energa calrica y lumnica
En la actualidad la distribucin y tipos de
energa son diferentes ( y ms diversos) a
las observadas al inicio de la creacin del
universo
15.000.000.000 de aos
Obsrvese que la cantidad de energa total
en el universo antes y despus de mucho tiempo, es la misma
50 %
lumnica
50 %
calrica
20 %
calrica
25 %
cintica
20 %
lumnica
25 %
potencial
20 %
otras
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Segunda ley de la termodinmica.
La entropa de todos los procesos del universo (y del
universo mismo) tiende siempre a incrementarse hasta
alcanzar el equilibrio, el cual representa el estado de
mximo desorden.
Esto quiere decir que cualquier sistema dentro del universo, e incluso, todo el
universo tiende a desordenarse espontneamente, buscando as el equilibrio.
El desorden se va incrementando en la medida que la energa til (que se
encarga de mantener organizado un sistema) va disminuyendo.
La cada de la energa til, tal como lo expresa la primera ley de termodinmica
es seguida por el incremento de otras formas energticas que no son tiles
para realizar un trabajo determinado en el sistema.
Si consideramos que el sistema usa la energa til para mantenerse
organizado, la disminucin de sta ocasionar desorden..Cuando el
desorden sea mximo se habr establecido el equlibrio. Por lo tanto, los
sistemas orgnicos estn adaptados para mantener la energa til en niveles
ptimos para mantenerse ORGANIZADOS
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Segunda ley de la termodinmica.
La lucha del orden contra el desorden(donde
inevitablemente siempre gana el desorden)
El orden, implica alto grado de energa tilpero esta energa se utiliza para
mantenernos organizados. De esta forma, como la energa til tiende a
disminuir cuando se realiza el trabajo llamado organizarnos debemos
producir todos los das ms energa til para reponer la invertida.
Y as, la vida de cualquier ser vivo transcurre en una lucha contra la segunda
ley de termodinmica..Nos alimentamos para extraer de los alimentos la
energa potencial presente en los enlaces qumicos y guiarla hacia los enlaces
de alta energa del ATP.
Luego, al hidrolizar los enlaces de alta energa del ATP se liberan cantidades
inmensas de energa libre que pueden utilizarse para realizar un trabajo,
representado por las innumerables reacciones qumicas que requieren esa
energa para poder llevarse a cabo.
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Segunda ley de la termodinmica.
La lucha del orden contra el desorden(donde
inevitablemente siempre gana el desorden, que en
nosotros recibe el nombre de muerte)
Lamentablemente, despus de algn tiempo de luchar contra la segunda ley,
todos los seres vivos experimentan la llamada muerte.
Todas las clulas se desorganizan: las membranas se rompen, las
mitocondrias y otros organelos se disgregan y todo el contenido celular se
combina con el entornoLos lpidos se peroxidan, las protenas se
hidrolizan a sus aminocidos y los carbohidratos se oxidan.se establece un
equlibrio entre el interior de la clula y su exterior. Este hecho es
extremadamente anmalo, pues lo que abunda dentro de la clula usualmente
es escaso en el medio ambiente.

La salud implica alto grado de orden y un gran desequilibrio con el medio
externo.

La muerte implica un alto grado de desorden y un equilibrio perfecto con el
medio. Ya no existe suficiente energa libre para mantener un alto grado de
organizacin.
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La vida y la muerte..Segn la termodinmica
Este proceso puede representarse esquemticamente de la siguiente manera:
La vida, implica un alto grado de orden
que solo puede lograrse con altas dosis
de energa til. Esta energa til debe
mantenerse estable en el tiempo. De esta
forma estamos adaptados para tener un
Metabolismo que genere altas cantidades
de energa til en forma de ATP.
La muerte implica el desorden mximo. El
individuo no puede transformar de forma
eficiente la energa que le ofrece Su entorno,
as que progresivamente acumula menos
energa til hasta un punto en el que no
puede mantenerse ordenado.
Muerte
Bajo
grado
de
energa
no utilizable
70 80
aos
60
aos
30 - 40
aos
Alto
grado
de
energa
til
Niez
alto
grado
de
energa
no utilizable
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Bases termodinmicas del mecanismo de accin
de las enzimas
Para que un sustrato A se transforme en el producto B debe existir cierta
cantidad de energa libre (til) en el sistema que se pueda realizar este trabajo
qumico:
A B
Alta cantidad
de energa
libre
Baja cantidad
de energa
libre
y todos los procesos qumicos transcurren desde un punto de alta energa libre
hasta uno de baja energa libre. Obsrvese como la flecha, que indica el
sentido de la reaccin, tiene un solo sentidoEsto es, que la reaccin es
irreversible. El compuesto B no puede tranformarse en el compuesto A porque
hay muy poca energa libre para realizar este trabajo.
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Bases termodinmicas del mecanismo de accin
de las enzimas
Ntese tambin que la conversin de A en B es un proceso espontneo,
debido a que la cantidad de energa libre es suficiente para realizar los
cambios qumicos que caracterizan la reaccin. Al final puede apreciarse una
cada en la energa libre. Como la energa libre no se pierde, es obvio que se
ha transformado en otras formas energticas, quiz potencial dentro de la
molcula B
A B
No hace falta aadir calor al sistema, ni ninguna otra forma de energa
Pero el hecho de que ocurra la reaccin, no nos da informacin alguna de la
velocidad con la que sta acontece.
En los seres vivos es importante que muchas reacciones ocurran
adecuadamente..pero tambin es importante que ocurran rpidamente.
Alta cantidad
de energa
libre
Baja cantidad
de energa
libre
A 100
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Cmo podemos aumentar la velocidad de una
reaccin qumica?
En lneas generales se puede aumentar la velocidad de la reaccin de dos
maneras:

1. Incrementando la cantidad de energa libre para realizar el trabajo, hecho
que incrementa la pendiente entre el estado inicial y el final. Esto puede
hacerse con calor.
A B
Incremento en
la cantidad
de energa
libre
Baja cantidad
de energa
libre
A
Mayor velocidad
por incremento de
la pendiente (vase la pendiente
en la diapositiva anterior)
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Cmo podemos aumentar la velocidad de una
reaccin qumica?
En lneas generales se puede aumentar la velocidad de la reaccin de dos
maneras:

2. Manteniendo la cantidad de energa til constante, la nica manera de
aumentar la velocidad de la reaccin es utilizando de forma ms eficiente la
energa til del sistema. Esto puede hacerse gracias al uso de una ENZIMA
A B
Alta cantidad
de energa
libre
Baja cantidad
de energa
libre
A
0
100
ENZIMA
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Cmo una enzima puede optimizar el uso de la energa
libre en el sistema para as aumentar la velocidad de una
reaccin?.... Considere estos dos sistemas
A
A
B B
Cantidad de
Energa til: 100 Kcal
Cantidad de
Energa til: 100 Kcal
Sistema 1 Sistema 2
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En ambos sistemas, la cantidad de energa til para realizar el trabajo
es la misma. Sin embargo, es obvio que el individuo del sistema 1
emplear menos energa que el individuo del sistema 2 para realizar el
trabajo.
A
A
B B
Cantidad de
Energa til: 100 Kcal
Energa utilizada para realizar
el trabajo: slo 10 Kcal.
Cantidad de
Energa til: 100 Kcal
Energa utilizada para realizar
el trabajo: 100 Kcal

Sistema 1 Sistema 2
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En ambos sistemas, la cantidad de energa til para realizar el trabajo
es la misma. Sin embargo, es obvio que el individuo del sistema 1
emplear menos energa que el individuo del sistema 2 para realizar el
trabajo.
A
B
Cantidad de
Energa til: 100 Kcal
Energa utilizada para realizar
el trabajo: 100 Kcal

Sistema 2
100
100
0
Energa
til: 100 Kcal
Energa
utilizada: 100 Kcal
Total
Conclusin: solo se puede
Tirar una piedra con la
cantidad de energa
disponible
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En ambos sistemas, la cantidad de energa til para realizar el trabajo es la
misma. Sin embargo, es obvio que el individuo del sistema 1 emplear menos
energa que el individuo del sistema 2 para realizar el trabajo.
Cantidad de
Energa til: 100 Kcal
Energa utilizada para realizar
el trabajo: 10 Kcal
100
10
90
Energa
til: 100 Kcal
Energa
utilizada: 10 Kcal
Total
Conclusin: se pueden tirar nueve piedras
ms con la cantidad de energa sobrante
A
B
Sistema 1
B
B
B B
B
B
B
B
La palanca en este sistema
es equivalente a la enzima
en un sistema qumico. Un
elemento que permite el
ahorro energtico y el uso
del excedente para realizar
Ms trabajo
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1. Son compuestos termolbiles.

2. Son reciclables, por lo que..

3. Se necesitan en baja cantidad.

4. Su actividad, es decir, la velocidad de la
catlisis puede regularse.

Cuales son las principales
caractersticas de una enzima?
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5. Tienen una gran afinidad por un solo sustrato o
por un grupo de sustratos emparentados
estructuralmente.

6. Tienen una gran especificidad por un solo
sustrato o por un grupo de sustratos
emparentados estructuralmente.

Cuales son las principales
caractersticas de una enzima?
E + S
Complejo ES
E + P
Cual es la principal
caracterstica de las
enzimas?
Indudablemente
La Regulabilidad de
su actividad
Que es regulabilidad?
La velocidad de una reaccin catalizada
por una enzima puede incrementarse o
disminuirse gracias a:
Alteracin tridimensional del sitio cataltico
Aumentando o disminuyendo la cantidad de
enzima
Regulacin de la catlisis
enzimtica
Disminucin/incremento
de la eficacia
Aumento/disminucin
De la concentracin
Estos mecanismos implican el
cambio de la CONFORMACIN
TRIDIMENSIONAL del sitio
cataltico, haciendo que este
permita o no la entrada del
sustrato.

Son mecanismos de regulacin
RPIDA, porque operan sobre la
enzima que ya ha sido sintetizada
Estos mecanismos implican el
aumento o la disminucin en la
velocidad de sntesis de una
enzima.

Son mecanismos de regulacin
LENTOS, ya que dependen de la
SNTESIS DE NUEVA PROTEINA:
ADN ARNm Ribosoma
Sntesis Proteica.

Regulacin de la catlisis
enzimtica
Disminucin/incremento
de la eficacia
Aumento/disminucin
De la concentracin
Alosterismo
Modificacin Covalente
Feed Back Negativo
Zimgenos
Complejos
multienzimticos
Compartamentalizacin
Induccin y Represin

Alosterismo
Enzima
OFF
Enzima
ON
Enzima-sustrato
Modulador
Alostrico
Positivo
Cambio
Conformacional 3D
Favorable
Del sitio cataltico
Sitio cataltico
Con
conformacin 3D
desfavorable
Modificacin covalente
Enzima
Off
Sustrato
Enzima
On
Sustrato
Enzima off
Sustrato
+NH
3
PO
4
Enzima On
Sustrato
+NH
3
PO
4
Modificacin covalente
Enzima
Sustrato
Enzima
Sustrato
PO
4
ATP ADP
PO
4
Cinasa Cinasa
Sistema de
encendido
Sistema de
Apagado
Feedback Negativo
Es un mecanismo de regulacin enzimtica en
la cual el PRODUCTO inhibe la actividad
enzimtica
Complejos multienzimticos
Complejos multienzimticos
Zimgenos
Alimento: Glucosa Alimento: Lactosa (Glucosa-Galactosa)
Degradacin
Energa
Glu
Glu Gal
Glu
Glu
Glu
Gal
Gal
Degradacin
Energa
Permeasa
Beta-galactosidasa
Opern Lac Inactivo
(Repremido)
Opern Lac Activo
(Inducido)
Lactosa
Induccin y represin, El opern Lac
Induccin y represin del Opern Lac en
Condiciones de glucosa abundante
Induccin del opern Lac en condiciones
De Abundancia de Lactosa

Cintica enzimtica
Es la rama de la enzimologa que estudia la
velocidad de las reacciones catalizadas por las
enzimas as como los factores (externos) que
influyen sobre dicha velocidad

La velocidad de una reaccin es la cantidad de
sustrato transformado en producto por unidad
de tiempo
Cintica enzimtica
Los factores MAS ESTUDIADOS que modifican la
velocidad de una reaccin catalizada por
enzimas son:
1. La concentracin de la Enzima
2. La temperatura
3. El pH
4. El aumento progresivo de la concentracin
del sustrato
5. La presencia o no de inhibidores
Cintica enzimtica: temperatura
Actividad
Mxima
Temperatura
ptima
Cintica enzimtica: Efecto del pH
Cintica enzimtica:
Aumento de la concentracin del sustrato
Cintica enzimtica:
Presencia de inhibidores
Cintica enzimtica:
Presencia de inhibidores
Cintica enzimtica:
Presencia de inhibidores
cantinflear.
1. intr. Cuba y Mx. Hablar de forma
disparatada e incongruente y sin decir
nada.
Gracias por vuestra atencin