Analyses des Urines

Bandelettes Urinaires
INTRODUCTION

Les plaintes urinaires font partie des motifs de
consultations les plus frquents en mdecine de premier
recours et les analyses d'urines sont des examens
largement utiliss dans la pratique quotidienne.

Nanmoins, malgr le faible cot de la bandelette urinaire
et sa facilit de ralisation, son utilisation dans un
dpistage de masse dans une population saine n'est pas
recommande car le rapport cot-efficacit d'une telle
stratgie est mauvais


DFINITION

La bandelette urinaire est une mthode d'analyse
biologique instantane des urines qui sont mises en
contact avec des ractifs spcifiques.

La bandelette urinaire (BU) est une tige de plastique sur
laquelle sont placs des ractifs qui ragissent aux
diffrents composants prsents dans l'urine.










INDICATIONS
Surveillance ou suspicion d'un trouble biologique.
Suspicion d'une infection urinaire.
Il existe des bandelettes 1 ou 2 paramtres
(gnralement pour rechercher la protinurie et la
glycosurie), mais aussi des bandelettes 5, 7 et mme 10
paramtres :
glycosurie , protinurie ,ctonurie, bilirubinurie
,urobilinognurie ,nitriturie, ph urinaire, densit urinaire,
leucocyturie, hmaturie
il sagit de technique semi quantitatifs, ils sont exprims :
soit en ngatif .
soit en positif.
Soit en chelle de valeurs
PR-ANALYTIQUE

LES BANDELETTES DOIVENT TRE :
Conserves au sec une temprature infrieure 30
0
C et
jamais au rfrigrateur,
utilises avant la date de premption indique sur
lemballage,
ne jamais tre rutilises ou coupes.

LE FLACON CONTENANT LES BANDELETTES DOIT TRE :
Referm immdiatement aprs usage avec le bouchon



MTHODE DE PRLVEMENT:
Toilette pralable des organes gnitaux ext.
Rcolter l'urine du milieu du jet.
Rcipient propre et sec(oxydants faux positif: protine sang,
glucose)

heure de prlvement:
1e ou 2e urine du matin
- aprs la miction, traiter lurine au plus vite (dans les 2 heures)







PHASE ANALYTIQUE
Mlanger et homogniser les urines avec un petit
agitateur en verre
sortir la bandelette de son tui sans toucher les zones
ractives.
Plonger la bandelette et la retirer immdiatement
tapoter la tranche de la bandelette contre le rcipient, afin
d'liminer l'urine excdentaire.
Attendre le temps prconis par le fabriquant
(gnralement entre 30 secondes et 2 minutes)
comparer la bandelette avec la gamme colorimtrique
indique sur lemballage
noter les rsultats puis jeter la bandelette dans la poubelle
incinrer
REMARQUE
Les ractions chimiques sont trs sensibles et peuvent
engendrer des faux positifs :
des mdicaments, un apport alimentaire important en
nitrites ou fortement color (betterave rouge),
des quantits importantes de vitamine C,
des traces dantiseptiques




MODE DUTILISATION DES BANDELETTES URINAIRES

On utilise de pr f rence des urines fraichement mises
non centrifugs mais homogniss pralablement.
Ne pas dposer la bandelette sur la paillasse et viter
de toucher les zones ractives lors de la manipulation.
Immerger brivement la bandelette (1 seconde
maximum) dans lurine en une seule fois en prenant
soin dhumecter toutes les zones ractives. Il ne faut pas
laisser tremper.
Egoutter la bandelette en passant sa tranche sur le
bord du rcipient pour supprimer lexcs durine.
Tenir la bandelette horizontalement pour empecher toute
interfrence entre les r actifs des plages voisines





MODES DE LECTURE
- On compare la couleur de
la zone ractive avec la gamme
colorimtrique figurant sur
l tiquette du flacon, aux temps
indiqu s
- on tient la bandelette trs
prs de lchelle colorimtrique,
toujours horizontalement.
Il faut donc respecter
exactement les temps de lecture.
Toute coloration apparaissant
aprs 2 minutes na aucune valeur
diagnostique.
LES DIFFERENTES REACTIONS ET LEURS LIMITES

1. Protinurie:
Physiologiquement, son dbit est infrieur 150 mg/jour, ce qui
correspond en moyenne 80 mg/jour dont de 0 30 mg/jour
dalbumine (microalbuminurie physiologique) soit environ 20 mg/l.
Usuellement non dtecte par les bandelettes ractives : ngative ou
traces.
Principe du test :
le bleu de bromophnol est un indicateur colorqui change de
coloration ph constant,, en prsence de protines.
La zone ractive contient un mlange de cet indicateur et de solution
tampon.
Lindicateur vire du jaune au vert clair puis au vert fonc en prsence
de protines par liaison avec les groupements amins des
protines.
Specificite:
lalbumine, plus riche en groupements amines, r agit mieux avec
lindicateur coloreque les globulines, mucoproteines et proteines de
bence-jones
Limites de dtection
la limite de dtection du test est de 15-30 mg/dl de protines.
Limites du test
de faux rsultats positifs peuvent apparatre sur des urines fortement
basiques (ph 9).
Linterprtation des rsultats est galement problmatique sur des
urines turbides.
Ne pas utiliser de rcipients de recueil contenant des traces de
substances oxydantes (eau de javel par exemple)



2. Hematurie
Le seuil pathologique communment retenu est de 10
hematies/mm3
on trouve trs souvent du sang dans les urines des femmes en
priode de menstruation.

Principe du test :
la raction est bas sur les proprit s peroxydasiques de
lhemoglobine et de la myoglobine.
Celles-ci catalysent loxydation de lindicateur color Cumne
hydroperoxyde par un hydroperoxyde organique en
derivcolorbleu-vert. Ceci se traduit par un virage au vert de la
zone ractive initialement jaune.



Limites de dtection: 10 rythrocytes/GL.
Le test est plus sensible en prsence dhmoglobine libre ou de
myoglobine quen prsence drythrocytes intacts.
La prsence de spots verts sur la zone ractive
indique la prsence drythrocytes intacts dans lurine.
Limites du test :
Une densit spcifique leve ou un taux lev de protines peut
diminuer la ractivit du test
Des concentrations dacide ascorbique suprieur 30 mg/dl
peuvent entraner des faux rsultats ngatifs
Ne pas utiliser de rcipients de recueil contenant des traces de
substances oxydantes (eau de javel par exemple).



3-nitriturie
La prsence de nitrites constitue le tmoin indirect de
la prsence de germes dans les urines
Au contact du ph acide de la zone
ractive,
principe du teste:
les nitrites urinaires ragissent avec lacide para-
arsanilique pour former un compos
diazonium. Ce compos se mlange son tour au
ttrahydro-1,2,3,4 benzo(h) quinolinol-3
pour former un colorant azoique. Lintensit de la
coloration rose-rouge est une mesure de la
concentration en nitrites
Spcificit:
ce test est spcifique des nitrites.
Seuil de dtection :
il est ajust une numration bactrienne de 10
germes/ml, ce qui correspond au seuil
pathologique





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4. Leucocyturie
La prsence accrue de leucocytes dans les urines
est un symptome important des affections
inflammatoires rnales et des voies urinaires. Elle
se dtecte donc lors dune agression
microbienne mais aussi dans dautres phnomnes
inflammatoires, immunologiques par
exemple.
Physiologiquement, on peut avoir dans les urines
jusqua 10 leucocytes/mm3

Principe du test:
Mise en vidence de lactivit des estrases
granulocytaires.

un ester indoxylique est hydrolyspar lest rase existant
dans les granules des polynuclaires
neutrophiles qui prolifrent lors de linflammation.
Lindoxyle libr ragit avec un sel de
diazonium pour donner un drivazoi que violet.
Spcificit :
le test sera positif en prsence soit de leucocytes
intacts, soit des enzymes libr es par des
leucocytes lyss.
Seuil de dtection :
il est de 10 leucocytes/mm3, soit la leucocyturie
physiologique.
Limites de la mthode et causes derreurs :
- il existe un risque de faux-ngatif en cas de forte
glycosurie (>30g/L) ou de forte protinurie
(>3g/L).
- Une densit leve peut galement entrainer des
rsultats faussement ngatifs




6-glucose
principe chimique
le glucose oxydase catalyse loxydation du glucose
pour former un peroxyde dhydrogne. Le peroxyde
dhydrogne ainsi form oxyde un chromogne situ
sur la zone ractive par laction de la peroxydase.
Valeurs attendues
une faible concentration de glucose (proche de 30
mg/dl) est normalement considre comme normale.
Le glucose est normalement absent de lurine. Il est
nanmoins limin en faible quantit par le rein. Une
concentration de 50 mg/dl ou plus peut tre considre
comme anormale surtout si elle est rpte.
Limites de dtection
le seuil de dtection de la bandelette est de 50 mg de
glucose /dl le test est hautement spcifique du glucose.
La zone ractive ne ragit pas avec le lactose, le
galactose, le fructose ou des mtabolites rducteurs
limites du test
des taux levs de densit (>1.020) avec un taux lev
de ph et de lacide ascorbique (concentration >
40mg/dl) peuvent entraner des faux ngatifs sur des
urines faiblement concentres en glucose. Ne pas
utiliser de rcipients de recueil contenant des traces de
substances oxydantes (eau de javel par exemple).

7-PH
principe chimique
systme avec double indicateur. Le rouge de mthyle
et le bleu de bromothymol sont utiliss pour gnrer un
changement de coloration dorange au vert et bleu sur
une chelle de 5.0 9.0.

Valeurs attendues
le ph urinaire varie habituellement 5 9. Le ph urinaire
est un indicateur important de certaines situations
mtaboliques lies au fonctionnement du rein et des
systmes gastro-intestinal et respiratoire.
Limites de dtection
le test mesure des valeurs de ph situ entre 5-9 avec
une prcision dune unit.
Limites du test
une quantit excessive durine sur la bandelette du
une mauvaise manipulation, donne un rsultat de ph
acide en prsence dune urine neutre ou alcaline. Ce
phnomne sappelle le run-over .
la mesure du ph doit tre ralise sur une urine
frachement mise car une prolifration bactrienne
entrane une alcalinisation de lurine.


8-Corps ctoniques :
le test repose sur le principe de la raction de lgal. La
raction de lacide
acto-actique et de lactone avec le sodium
nitroprusside en milieu alcalin forme un complexe
de couleur violette.

La sensibilit:
de lacide acto-actique est plus prononce que celle
de lactone. Des valeurs de 10 mg dacide actique/dL
durine ou 50 mg dactone/dL durine sont
dtectes


9-densit (SG)
principe chimique
les lments ioniques prsents dans lurine librent des
protons qui vont baisser le ph et entraner un
changement de couleur en prsence de bleu de
bromothymol qui vire du bleu-vert au jaune-vert

Limites de dtection
le test permet la dtermination de densits comprises
entre 1.000 et 1.030.
10-bilirubine:
Mise en vidence dun sel de diazonium avec la
bilirubine