Regulao Gnica em Procariotos

Anderson Fernandes Souza

Recapitulando
Quatro tipos de expresso gnica:
Temporal, constitutiva, tecido-especfica e tempo
de expresso;
Quatro Nveis de regulao:
Transcricional, ps-transcricional, traducional e
ps-traducional;
Relembrando conceitos da aula
anterior
GENE REGULADOR: GENE QUE REGULA
EXPRESSO DE OUTROS GENES;

GENE ESTRUTURAL: GENES QUE CODIFICAM
PARA PROTENAS ESTRUTURAIS;

PROMOTOR: SEQUNCIA QUE ATIVA A
EXPRESSO DE UMA UNIDADE
TRANSCRICIONAL.

Novos conceitos
PROTENA ALOSTRICA: protena que pode se
alterar devido ligao com pequenas molculas
em stios distintos do stio-alvo.
EFETOR ALOSTRICO: molcula capaz de
modificar a conformao de protenas por ligao
a um stio especfico.
PROTENA ATIVADORA CATABLICA (CAP):
protena ativada por AMP cclico. O complexo
cAMP-CAP liga-se s regies do promotor de
bactrias e estimula a transcrio no operon
pertinente.
MONOFOSFATO CCLICO DE ADENOSINA:
molcula mensageira que catalisa vrias
reaes intracelulares. O mesmo que AMP
cclico (cAMP).
REPRESSO: capacidade de impedir a sntese
de certas enzimas quando seus produtos
esto presentes; genericamente, refere-se
inibio da transcrio (ou traduo) pela
ligao de uma protena repressora a um stio
especfico do DNA (ou do mRNA).


REPRESSO CATABLICA: sistema coordenado
que determina preferncia por glicose,
inibindo a expresso de operons que
codificam enzimas de rotas metablicas
alternativas. Assim, quando Escherichia coli
encontra, por exemplo, glicose e lactose
simultaneamente no meio, ela d preferncia
glicose e reprime o uso da lactose.

RNA POLIMERASE: polimerase que catalisa a
sntese de RNA a partir de uma fita molde de
DNA.
E por fim...
OPERON: O CONJUNTO FORMADO PELO
PROMOTOR, PELAS SEQUNCIAS
REGULATRIAS E PELOS GENES.

Expresso gnica em procariotos
Franois Jacob & Jacques
Monod Genetic
regulatory mechanisms in
the synthesis of proteins J
Mol Biol 3:318-356, 1961 -
Modelo Operon
Metabolismo da lactose
em Escherichia coli
1965 Prmio Nobel
OPERON LAC
Lactose
OPERON ARA
Arabinose
OPERON TRP
Triptofano
Os 3 so similares em estrutura e regulao,
possuindo algumas particularidades.
Estrutura do operon
Estrutura do operon
Molculas efetoras controlam a habilidade de
ligao ao DNA das protenas ativadoras ou
repressoras.
Operon indutvel
Operon desligado
na ausncia de
molcula efetora
(indutor)

Operon repressvel
Operon ligado
na ausncia de
molcula efetora
(co-repressor)

Regulao Positiva e Negativa
Operon Lac
Lactose/Alolactose induz a expresso de genes
que codificam enzimas de degradao desse
substrato.
Operon Lac
Protenas sintetizadas pelo operon lac:
1. -galactosidase (gene z) enzima que cataliza a
hidrlise da lactose em galactose e glicose;
2. galactosdeo permease (gene y) transporte de
lactose atravs da membrana celular da bactria;
3. tiogalactosdeo transacetilase (gene a) parece
ter um papel na eliminao de compostos que
tambm podem ser transportados pela permease.
p = promotor
gene i = codifica o repressor
o = operador
Stryer, 5a. ed. p. 893.
Operon Lac: Regulao Negativa
Regulao da Expresso
Lactose ausente

1. Repressor lac ligado ao DNA
2. Transcrio reprimida
Lactose presente

1. Lactose/Alolactose ligada ao
repressor lac
2. Repressor lac desligado do DNA
3. Transcrio ocorre
Represso catablica

Glicose, quando disponvel como fonte de energia, utilizada
preferencialmente a outros acares por E. coli; a glicose leva
a um maior rendimento de ATP por unidade de energia gasta.

Operons para catabolismo de outros acares (como lactose,
arabinose e galactose) so reprimidos na presena de glicose.

A represso catablica resulta da reduo nos nveis de cAMP
na clula pela presena de glicose.

Na ausncia de glicose se forma o complexo cAMP-CAP.
Represso catablica
A concentrao intracelular de cAMP sensvel presena ou ausncia de glicose (
glicose cAMP).
O cAMP liga-se CAP e estimula a ligao ao stio CAP no DNA.

A CAP interage com a subunidade da RNA-pol., facilitando a ligao da enzima ao
promotor, ativando a transcrio (ativa o operon).
A ligao de CAP curva o DNA
significativamente, trazendo o complexo RNA
Polimerase + sigma (ligado ao promotor) em
contato com CAP devido a esta curvatura. Este
contato intensifica a transcrio.
Operon Ara


Na presena de arabinose (e ausncia de glicose), a protena AraC se
liga regio AraI;
a protena CAP, ligada a cAMP, se liga a um stio adjacente regio
AraI;
TRANSCRIO DE AraB, AraA e AraD

Controle positivo


Controle negativo



Na ausncia de arabinose (ou presena de glicose e arabinose), a
protena AraC se liga a ambas as regies araI e AraO, formando um
loop de DNA
IMPEDE A TRANSCRIO DO OPERON
Operon Trp
A bactria E. coli capaz de sintetizar os 20
aminocidos necessrios sntese de
protenas.
Os genes necessrios sntese de um dado
aminocido so geralmente agrupados em
um operon.
O operon trp de E. coli inclui cinco genes para
as enzimas necessrias converso do
corismato ao triptofano.
Regulao por atenuao
Ligao da protena
repressora ao operador
Atenuao da transcrio

A transcrio iniciada normalmente,
mas interrompida abruptamente, antes
que os genes do operon sejam
transcritos.
ATENUAO: um mecanismo que controla a
capacidade da RNA Polimerase de transcrever
atravs de um atenuador (terminador
intrnsico), localizado no incio de uma
unidade de transcrio.

Algum evento externo controla a formao da
estrutura secundria em grampo necessria
para a terminao intrnsica.
Mecanismo de atenuao
Formam uma estrutura em grampo
por pareamento de bases que age
como um terminador de transcrio
O pareamento de bases NO
permite a formao do atenuador
e a transcrio continua
Peptdeo lder
Determina se haver
pareamento de bases
entre as regies 2 e 3 ou 3
e 4
Alta concentrao de Trp - Atenuao
Baixa concentrao de Trp -
Transcrio
Algumas aplicaes
Bases para o entendimento da regulao
gnica em eucariotos;
TDNA recombinante - Gene reporter / X-Gal
Bactrias diazotrficas
Dissertao de Mestrado/ UFPR: Lysangela
Ronalte Alves
ENVOLVIMENTO DO GENE ntrY NO
METABOLISMO DE NITRATO EM H. seropedicae
Obrigado!