BACILI GRAM NEGATIVI

ESCHERICHIA COLI
SALMONELLA
SCHGELLA
VIBRIONUL HOLERIC
ESCHERICHIA COLI
Fam. Enterobacteriaceae, gen Escherichia, specia E. Coli
TAXONOMIE
HABITAT: E.Coli include tulpini saprofite prezente in
microbiota intestinala,tulpini conditionat patogene si
tulpini patogene frecvent implicate in patologia
infectioasa
CARACTERE MORFOLOGICE
Bacili Gram negativi, cu polimorfism accentuat, lungime
2-3 microni, nesporulati, necapsulati (exceptie speciile
cu atg. K), mobili cu cili peritrichi (unele imobile)

E.coli-Frotiu colorat
Gram
Imagine ME
ESCHERICHIA COLI
CARACTERE DE CULTUR
Medii: bulion glucozat, geloz simpl, Istrate
Meitert, Levine, Mc Conkey, Drigalski

Mediu bulion
glucozat
Mediu Drigalski
Fermentarea
glucozei cu
gaz
E. COLI CARACTERE DE CULTUR
Mediul geloz simpl
Mediul geloz snge Mediul Levine
Mediul Mc Conkey
E.COLI- Caractere de cultura
Geloz EMB (Eozina Metilen Blue)
Mediul MacConkey
ESCHERICHIA COLI
CARACTERE BIOCHIMICE
sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi
fermenteaz glucoza cu producere de gaz
fermenteaz lactoza i zaharoza
produc indol
nu folosesc citratul ca surs de carbon (Simmons negativ)
nu produc ureaz
nu produc hidrogen sulfurat



E.COLI CARACTERE BIOCHIMICE
Mediul TSI Mediul MIU
Mediul
Simmons
(citrat)
-
+
Galerii API
TSI: G+, L+, Z+, H2S - ; MIU: U-, I+, M+ ; Uree: - ; Simmons: -
ESCHERICHIA COLI
STRUCTURA ANTIGENIC
O (somatic) antigens: S-R
variation
H (flagellar) antigens: H-O
variation
K (capsular) antigens
Vi (virulence) antigens
E. COLI
Virulen
Adezine:
Numite i factori de colonizare
Pili sau fimbrii
Factori ne-fimbriali: intimina
Exist 21 tipuri de adezine
Anticorpii anti-adezine pot preveni colonizarea
Capsula
Enterochelina permite legarea fierului
Proteine ale membranei implicate n ataare i iniierea endocitozei
Toxinogenez:
Toxina de tip ST produs de EAggEC cauzeaz diareea apoas.
Hemolysins lizeaz hematiile i leucocitele prevenind fagocitoza
Endotoxina
Exist serotipuri patogene:
ETEC - E. coli EnteroToxigen
EIEC - E. coli EnteroInvaziv
EPEC - E. coli EnteroPatogen
EHEC - E. coli EnteroHemoragic
EAggEC E. coli EnteroAgregant
DAEC E. coli Difuz Aderent
ESCHERICHIA COLI - PATOGENIE
Tipuri patogene de E. coli
ESCHERICHIA COLI
ASPECTE CLINICE
1. Infecii enterale (cauzate de serotipurile patogene
ETEC, EIEC, EPEC, EHEC, EAggEC): diareea malign a
nou nscutului, boala diareic de tip dizenteriform,
enterocolitele adulilor (diareea turitilor).
2. Infecii ale tractului urinar (ITU): cistite, pielonefrite
3. Infecii genitale
4. Infecii respiratorii
5. Septicemii cu punct de plecare intestinal
6. Peritonite
7. Meningite neonatale



E. coli - mecanism de actiune al enterotoxinei LT

14
ESCHERICHIA COLI - Epidemiologie
E. COLI INFECTII DE TRACT URINAR
E. coli,
serotipurile
uropatogene,
reprezint
principala cauz
de infectii de
tract urinar care
pot evolua spre
cistit acut i
pielonefrite.


E.COLI PROFILAXIE - TRATAMENT
Profilaxie:
Nespecific:
Specific: este n curs de testare un vaccin cu receptori pentru
fier (proteine chelatoare de fier) care stimuleaz producia de
anticorpi ce vor mpiedica legarea fierului de ctre bacterii. Se
poate efectua vaccinare cu autovaccin.
Tratament:
E. coli este de regul sensibil la o varietate de ageni
antimicrobieni, ns se nregistreaz i tulpini rezistente.
Din acest motiv este esenial efectuarea antibiogramei.
Tratamentul pacienilor cu infecii produse de E. coli
enterohemoragic nu este recomandat, deoarece prin liza
bacteriilor se poate elibera enterotoxine Shiga-like i declana
sindrom hemolitic uremic cu insuficien renal acut.
Terapia cu bacteriofagi anti-Escherichia coli.



SHIGELLA
TAXONOMIE
Fam. Enterobacteriaceae, gen Shigella, specii S.
dysenteriae (shigae), S. flexneri, S. boydii, S.
sonnei
CARACTERE MORFOLOGICE
Bacili Gram negativi, imobili, lungime 1-3
microni, nesporulati, necapsulati

SHIGELLA
STRUCTURA ANTIGENIC
Antigenul glucido-lipido-polipeptidic
(endotoxina termostabil) = atg. O
Unele tulpini posed antigenul de nveli
K
Pe baza structurii antigenice se mpart n
4 subgrupuri: A, B, C, D
SHIGELLA CARACTERE DE CULTUR
SHIGELLA CARACTERE DE CULTUR
Mediul
MacConkey
Mediul geloz
XLD (xiloz, lisin,
dezoxicolat)
Mediul S-S
Mediul geloz cu
rou de Congo
Mediul geloz
Luria
SHIGELLA CARACTERE BIOCHIMICE
sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi
fermenteaz glucoza fra gaz
nu fermenteaz lactoza (excepie Sh. sonnei)
nu folosesc citratul ca surs de carbon (Simmons negativ)
nu produc ureaz
reduc nitraii la nitrii
nu produc hidrogen sulfurat
Mediu TSI
(G+, L-, Z-, H2S-)
Mediu MIU
(M-, U-, I+/-)
Mediu Simmons
SHIGELLA CARACTERE BIOCHIMICE
Ureaza-
tsi
SHIGELLA - PATOGENIE
CARACTERE DE PATOGENITATE
Factori de aderen adezine
Proteinele ics A,B (Intercellular spread)
proteinele ipa B, C, D induc endocitarea
bacteriei intracitoplasmatic
Antigenul somatic O (endotoxina)
Exotoxina produs de S. dysenteriae, eliberat
prin bacterioliz, cu efect citotoxic asupra
endoteliului capilar i efect neurotoxic. Exotoxina
se evideniaz in vivo prin testul Sereny
S. flexnerii, serovarul 2a, elaboreaz colicine cu
rol n autoselectare i colonizare intestinal

SHIGELLA ASPECTE CLINICE
ASPECTE CLINICE
1. Dizenteria acut bacilar cu transmitere fecal oral.
Este o toxiinfecie care debuteaz brusc, dup cteva zile de incubaie.
Se manifest prin scaune numeroase, moi i muco-sanghinolente, nsoite
de colici abdominale i tenesme rectale. Starea general se altereaz,
putnd aprea i tulburri hemodinamice (lipotimie, colaps). Uneori, prin
pierdere de ap i electrolii, se produce o acumulare de produi azotai
neproteici (azotemie extrarenal). Se descriu i forme de dizenterie n care
scaunele muco-sanghinolente lipsesc, boala manifestndu-se prin scaune
diareice, fr snge. La copii, simptomele sunt mai grave, aprnd febra,
vrsturile abundente, cu stare de delir.



SHIGELLA ASPECTE CLINICE
2. Dizenteria cronic.
Apare ca urmare a unei dizenterii acute insuficient tratate sau
printr-o infecie cu o tulpin de Shigella rezistent la
chimioterapie. Clinic, boala se poate manifesta cu semne
necaracteristice de enterocolit sau pot exista purttori
aparent sntoi, diagnosticai doar cu ajutorul
coproculturilor pozitive pentru Shigella.




SHIGELLA EPIDEMIOLOGIE-PROFILAXIE
Dizenteria bacilar este o boal digestiv infecioas.
Sursa de infecie este reprezentat de omul bolnav de
dizenterie acut sau cronic.
Poarta de intrare este digestiv, infecia fcndu-se prin
consumarea alimentelor contaminate, mini murdare,
obiecte infectate (boala minilor murdare). Contagiunea
hidric este mai frecvent vara, mutele avnd un rol
nsemnat n vehicularea Shigellelor.
Cauzele favorizante ale bolii sunt reprezentate de: infecii
intercurente, alte boli digestive, efort, oboseal etc. Boala
apare la orice vrs, dar este mai frecvent la copiii sub 5
ani. La noi n ar predomin: Sh. flexneri 2a i S.sonnei
(stabilite prin lizotipare).
Profilaxia general prevede: depistarea i tratarea cazurilor;
controlul fotilor bolnavi prin cel puin 3 coproculturi,
dezinfectarea obiectelor contaminate de bolnavi, igien
alimentar riguroas, dezmutizare, educaia sanitar.
Profilaxia specific se bazeaz pe aplicarea vaccinului viu
T32 preparat cu o tulpin de Sh. flexneri 2a nevirulent, cu
administrare per oral.




SHIGELLA TRATAMENT

Tratament antibacterian:
Se folosesc sulfamide, streptomicin, tetraciclin,
ampicilin, cloramfenicol.
Tulpinile rezistente sunt din ce n ce mai frecvente, fiind
necesar efectuarea antibiogramei
Regim igieno-dietetic.





SALMONELLA
TAXONOMIE
Fam. Enterobacteriaceae
gen Salmonella
specii
S. enterica, cu subspeciile S. enterica, S.
salamae, S. arizonae, S. diarizonae, S.
houtenae, S. indica
S. bongori
serovaruri: S. typhi, S. paratyphi, S. enteritidis, S.
typhimurium

SALMONELLA
CARACTERE MORFOLOGICE
Bacili Gram negativi, mobili, lungime 2-4
microni, cili peritrichi, nesporulati,
necapsulati
CARACTERE DE CULTUR
Medii: Istrate Meitert, Drigalski, Mc
Conkey, S-S (Salmonella-Shigella) ,
selenit acid de sodiu, Wilson-Blair


SALMONELLA - MORFOLOGIE
SALMONELLA
STRUCTURA ANTIGENIC
Antigenul glucido-lipido-polipeptidic
(endotoxina termostabil) = atg. O
Antigenul flagelar H
Unele tulpini posed antigenul de nveli
Vi
Antigenul M, asemntor cu Vi, prezent
la tulpinile mucoide
SALMONELLA-IDENTIFICARE SEROLOGICA
SCHEMA KAUFFMANN-WHITE
Clasificarea taxonomic a salmonelelor dup schema Kauffmann-White
SALMONELLA CARACTERE DE CULTUR
Mediul Hectoen enteric
agar
Mediul Mac Conkey Mediul CLED
(Cystine-Lactose-Electrolyte
Deficient)

Mediul MLCB agar
(mannitol lysine crystal violet
brilliant green)
Mediul Istrate Meitert

Mediul Drigalski

SALMONELLA CARACTERE DE CULTUR I
BIOCHIMICE
Mediul S-S
Mediul geloz
lactozat
Mediul TSI
TSI: G+, L-, Z- ,
H
2
S+
SIM: H
2
S+, I-, M+
Uree: -
Simmons: +
SALMONELLA
CARACTERE BIOCHIMICE
fermenteaz glucoza cu gaz
nu fermenteaz lactoza i zaharoza
folosesc citratul ca surs de carbon n
majoritate
nu produc ureaz, indol, fenil-alanin
dezaminaz
decarboxileaz lizina
unele serovaruri produc hidrogen sulfurat



SALMONELLA CARACTERE BIOCHIMICE
Testul Serovaruri
Typhi Paratyphi Choleraesuis Gallinaru
m
Pullorum Celelalte
serovaruri
Producere
de gaz din
glucoz
- + + - + +
Folosirea
citratului
ca surs de
carbon
(Simmons)
- - d + - +
Producere
de H
2
S
(48
ore)
- - - - +
Producere
de lizin-
decarboxil
az
+ - + + + +
Producere
de ornitin
decarboxil
az
- + + - + +
Mobilitate
+ + + - - +
SALMONELLA - EPIDEMIOLOGIE
Transmitere pe cale digestiv odat cu alimentele (carne, lapte, ou,
ap) datorit condiiilor precare igieno-sanitare sau igieno-veterinare
privind pregtirea acestora.
Apa potabil poate fi contaminat direct de om sau de animalele
bolnave sau de apele reziduale insuficient purificate. Un rol important l
au i vectorii (mutele, roztoarele).

Factori favorizani:
intensificarea comerului, turismului i al cltorilor la mari distane,
migraiile populaionale,
industrializarea alimentaiei i a creterii animalelor de consum (porci,
psri) n mari colectiviti consumatoare de hran cu adaosuri proteice
deseori contaminate (fin furajer de carne, oase, snge),
alimentaia colectiv (cantine),
deficiene de igien comunal alimentar,
vrstele extreme (copii, btrni),
hipoaciditatea sau anaciditatea gastric,
dereglri la nivelul microbiocenozei intestinale n urma tratamentelor cu
antibiotice,
diminuarea concentraiei de IgAs etc.
SALMONELLA ASPECTE CLINICE
1) Salmoneloze sistemice (febrele enterice), reprezentate de febra
tifoid i febrele paratifoide.
Se declaneaz odat cu ptrunderea pe cale digestiv a salmonelelor.
De la nivelul intestinului, penetreaz mucoasa intestinal, trecnd n
submucoas. Ajungnd n formaiunile limfoide (ganglioni mezenterici,
plci Payer), se produce o multiplicare intens, dup care trec n canalul
toracic, n snge, declannd bacteriemia. La nivelul intestinului se
produc modificri de permeabilitate i leziuni ulcerative ale plcilor
Peyer. O parte din bacilii distrui de sistemul reticulo-histiocitar,
elibereaz endotoxine cu efecte: neurotrop, piretogen, leucopenizant.
Simptomatologia clinic este urmtoarea:
febr 40C
stare tific, datorat neutropismului endotoxinei
constipaie, meteorism abdominal
splenomegalie
pete lenticulare pe tegumente
angina Dugnet
leucopenie cu neutropenie
Salmonelele sunt eliminate prin: bil, materii fecale, urin. Dintre
complicaiile care pot aprea: peritonita, tulburrile funcionale: hepatice,
pulmonare, renale.
SALMONELLA ASPECTE CLINICE
2) Salmoneloze enterice (salmoneloze minore)
Reprezint forma comun endemo-epidemic a sindromului diareic
bacterian. Gastro-enterita acut se manifest prin: diaree, vrsturi, febr 38-
40
o
C, colici. Simptomele apar la 6-48 ore de la prnzul infectant i sunt mai
accentuate la btrni i sugari.
Toxiinfeciile alimentare apar prin ingestia unui aliment bogat n salmonele.
Se manifest clinic prin:
sindrom digestiv diaree apoas
sindrom cardio-vascular insuficien circulatorie
sindrom urinar oligurie cu sediment urinar patologic.
Sunt implicate n etiologie: S. agona, S. panam, S. Heidelbery, S. typhimurium.

3) Septicemiile salmonelozice sunt de fapt complicaii ale formelor enterice,
generalizate pe fondul unei agresiuni puternice la organisme imunodeficiente
(copii, vrstnici, boli cronice, boli maligne, tratamente imunosupresive, infecia
cu HIV etc.), care nregistreaz o rat nalt de mortalitate. Se pot produce
localizri secundare cu manifestri: bronho-pulmonare, cardio-vasculare, genito-
urinare, articulare etc. Sunt implicate n etiologie: S. choleraesuis, S.
typhimurium, S. enteritidis.

SALMONELLA EPIDEMIOLOGIE-PROFILAXIE
Salmonelele se transmit pe cale digestiv odat cu apa i alimentele
contaminate (ou de ra, creme, fric, conserve, mezeluri, brnzeturi
fermentate, zarzavaturi stropite cu ap poluat cu fecale, fructe nesplate, ap
potabil poluat cu rezuduuri umane sau animale care conin salmonelle). O alt
surs de contaminare este reprezentat de purttorii aparent sntoi,
majoritatea foti bolnavi de infecie cu salmonella, dar nesterilizai din punct de
vedere bacteriologic.
Profilaxia general (nespecific) se refer la:
depistarea bolnavilor i a purttorilor de Salmonella, izolarea i tratarea lor
corect pn la vindecare bacteriologic (3 coproculturi negative, consecutive);
construirea de instalaii sanitare corespunztoare;
controlul periodic bacteriologic al apei potabile i industriale conform legislaiei
sanitare;
prepararea adecvat a alimentelor, pasteurizarea laptelui;
msuri de igien individual i colectiv;
controlul bacteriologic al rezervorului animal de carne (vite, porci etc.).
Profilaxia specific
Se realizeaz prin vaccinarea anti-tifoparatific (TAB) cu vaccin corpuscular
inactivat, administrat parenteral. Se preconizeaz vaccinarea per oral cu vaccin
viu atenuat care s stimuleze producerea local de IgAs specifice i eficiente.
SALMONELLA- EPIDEMIOLOGIE
SALMONELLA-TRATAMENT
Tratamentul corect al salmonelozelor se face conform rezultatelor
antibiogramei, n doze suficiente i cu control bacteriologic (3
coproculturi negative succesive).
Medicamente eficiente sunt: gentamicina, neomicina,
nitrofurantoinul, septrinul.
Exist tulpini de salmonelle rezistente la unele
antibiotice/chimioterapice, datorit mutaiilor genetice, prin
selecie de mutante rezistente i prin transfer de factor R.


VIBRIONUL HOLERIC
Ordinul: Vibrionales
Familia: Vibrionaceae
Genul: Vibrio
Specia: Vibrio cholerae (Vibrio comma)
Biovaruri: Cholerae i El Tor
3 serovaruri Ogawa, Inaba, Hikojima
HABITAT
Ap ape dulci (tranzitoriu), ape marine sau estmarine n
simbioz cu vertebratele i nevertebratele acestor
ecosisteme
Se gsesc n unii crabi comestibili (Vibrio El Tor, toxigen)

VIBRIONUL HOLERIC
Specii din genul Vibrio implicate n patologia uman
VIBRIO CHOLERAE Morfologie
Germeni incurbai cu form de virgul,
lungime 2-3 mm, Gram negativi, mobili,
prezint un cil polar, nesporulai, necapsulai.


Vibrion holeric
schem
Frotiu colorat
Gram
Vibrion holeric
Imagine ME
VIBRIO CHOLERAE Caractere de Cultur
Mediul lichid ap peptonat alcalin: tulbur
uniform mediul cu vl
Mediul TCBS (thiosulfate/citrate/bile salt/sucrose
agar): colonii galbene datorit fermentrii
zaharozei, fr hidrogen sulfurat
Mediul BSA (bile/salt/agar): colonii incolore ,
hipertransparente (picturi de rou) cu halou
specific opac
Mediul Mac Conkey: colonii lactozo-negative
Mediul geloz snge: colonii beta-hemolitice
VIBRIO CHOLERAE Caractere de Cultur
Mediu TCBS
(Tiosulfat Citrat Bil Sare
Sucroz
Geloz snge
VIBRIO CHOLERAE Caractere Biochimice

Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi
Prezint catalaz i oxidaz
Fermenteaz glucoza, zaharoza, fructoza, galactoza
Nu fermenteaza lactoza (speciile diareigene)
Producerea de acetoin din glucoz (r. Voges Proskauer ) este
negativ pt biotipul clasic i pozitiv pentru biotipul El Tor
Nu produc hidrogen sulfurat
Produc indol
Nu produc ureaz
Folosesc citratul ca surs de carbon


VIBRIO CHOLERAE - Patogenie
Vibrionii colonizeaz lumenul intestinal i determin
afeciunea prin virulen i toxinogenez.

Virulena este dat de enzimele litice elaborate

Toxinogeneza: vibrionii posed endotoxina (antigenul
O) i elibereaz exotoxina holerigen

Exotoxina deregleaz pompa electrolitic Na/K de
absorbie intestinal (se elimin prin scaun ioni Cl, K,
HCO3, i inhib reabsorbia ionului de Na). Rezult
diaree apoas cu azotemie extrarenal.


VIBRIO CHOLERAE - Patogenie
Poriunea pentameric se leag
de suprafaa enterocitelor
Dup legare subunitatea A se
detaeaz i intr n celul prin
endocitoz.
n celul subunitatea A
ribozileaz subunitatea Gs a
proteinei G, ceea stimuleaz
producia de AMPc.
Producia de AMPc duce la
secreia n lumenul intestinal de
ap, Na, K, Cl i HCO3.


Mecanismul de aciune al toxinei
LT.
VIBRIO CHOLERAE Aspecte Clinice
Formele clinice variaz de la diaree uoar la diaree sever cu
potenial letal.
Incubaia dureaz 1-3 zile
Semnul specific este diareea masiva, apoas, ce conine urme de
mucus, denumit ap de orez.
Diareea poate ajunge la 20 litri pe zi, concentratia vibrionilor fiind
de 10 milioane / ml.
Pot apare vomismente, colici abdominale, febr, crampe
musculare
Dac nu se nlocuiesc pierderile hidro-electrolitice scade volumul
i presiunea sanguin, crete vscozitatea sngelui cu apariia
insuficienei renale i colaps cardiovascular.
n cazurile letale, moartea survine n cteva zile, rata de deces
fiind de 30-50 % pentru boala netratat i 1 % pentru cazurile
tratate prin rehidratare oral sau intravenoas.
VIBRIO CHOLERAE
Epidemiologie-Profilaxie. Tratament
Boala este endemic, poate evolua epidemic n anumite zone (India,
Thailanda, Iran, Japonia, ri ale Orientului apropiat).
Infecia se produce pe cale digestiv prin consum de ap i alimente
contaminate. Rezervorul de vibrioni este reprezentat de bolnavi i
purttori aparent sntoi (care vin din ri endemice).
Profilaxia nespecific se realizeaz prin: depistarea, izolarea i
tratarea bolnavilor, cu externarea acestora dup 3 coproculturi
negative succesive, aplicarea msurilor de igien comun i
individual.
Profilaxia specific se realizeaz cu ajutorul vaccinurilor antiholerice
inactivate corpusculare. Ea se realizeaz la anumite categorii de
persoane (cele care fac cltorii n zone endemice). Durata eficienei
vaccinrii este de maxim 6 luni.
Tratamentul este antibacterian (tetraciclin, cloramfenicol,
sulfamide) i rehidratare.