Adaptation of the Spodoptera

exiguaSe301 insect cell lineto grow in

serum-free suspendedculture.
Comparisonof SeMNPV productivity in
serum-freeand serum-containing
media.
IA. Beas-Catena & A. Snchez-Mirn &
F. Garca-Camacho & A. Contreras-Gmez &
E. Molina-Grima
Introduccin
Las clulas de insecto se han utilizado para producir baculovirus
como un agente de control de plagas durante muchos aos .


Por lo tanto , la mayora de las lineas clulares de insectos se
cultivan en una de las modificaciones de medio de Grace tales
como TC100 o IPL - 41 , suplementado con suero de vertebrados
( principalmente suero bovino fetal ) a 5-10 % ( v / v ).


Sin embargo , el uso de suero conlleva a numerosos problemas,
incluyendo alto coste , riesgo de micoplasma o prin
contaminacin , baja reproducibilidad de lote a lote , composicin
mal definida , y dificultades en el procesamiento aguas abajo.


Estos problemas han llevado al desarrollo libre de suero y medios
de cultivo de clulas de insecto.; tales medios como Ex-Cell 401, Ex-
Cell 405, Ex-Cell 420, expreso Cinco, y SF900 -II , ya estn disponibles
comercialmente y son ampliamente utilizado para el cultivo de
clulas de insecto
Lepidpteros Spodoptera
exigua
El gusano soldado,
conocido en Espaa
como la rosquilla verde, S.
exigua, es una especie
polfaga originaria del
sureste asitico que
actualmente se
encuentra distribuida por
todas las regiones
subtropicales y templadas
del mundo y es
especialmente
abundante en Amrica
Central y del Norte, frica,
Australia, y el sur de Asia y
Europa. En el sur de
Espaa, S.

Qu es baculovirus?
Los baculovirus son virus ADN de doble cadena en
forma de bastoncillos que se encuentran
principalmente en los insectos.

El baculovirus ms comn usado para estudios de
expresin es Autographa californica virus de la
polihedrosis nuclear mltiple ( Ac MNPV), que
depende de la especie de
lepidpteros Spodoptera frugiperda y Trichoplusia
ni como insectos de acogida.

Ac partculas MNPV rodean de una matriz
protectora que consiste en la protena polihedrina,
que permite la supervivencia en el medio ambiente
y la propagacin eficiente a nuevos huspedes.

A partir de una secuencia de
ADN, ADNc o virus recombinante.

Clonacin en vectores de
expresin disponibles
comercialmente ( etiquetas de
afinidad). La veracidad del a
construcion, demostrado por
anlisis de digestivo, restriccin y
secuenciacin.

La co-transfeccin con ADN de
AcNPV.

La placa purificada de virus
recombinante.

Expansin y verificacin por PCR
de virus recombinantes.

Baculovirus expansion and titer
production of 1L high-titer stock.

Time course and MOI study to
optimize protein expression.

http://www2.bioc.
cam.ac.uk/baculo
virus/info/Baculo_vi
rus_system.php