2 Repaso de clases anteriores Destino de la glucosa? Piruvato Gluclisis
Destino del piruvato? Anaerobios vas fermentativas Aerobios CO 2 + H 2 0 + energa
Respiracin celular
Liberacin de la energa de CHOs, AA y Ac grasos mediante reacciones bioqumicas
Fases
A- La oxidacin de cidos grasos, glucosa y algunos aminocidos produce Acetil-CoA B- El Acetil-CoA se oxida a CO 2 en una va cclica con produccin de coenzimas reducidas y energa C- Oxidacin de las coenzimas en la cadena de transferencia de electrones y generacin de ATP 3 El cliclo de Krebs transcurre en la matriz mitocondrial 4 Entrada de Piruvato a la Mitocondria 5 Conversion de Piruvato en Acetil-CoA Complejo Piruvato Deshidrogenasa
6 Coenzimas del complejo PDH 7 Mecanismo de reaccin NAD + NADH 8 Historia El ciclo de Krebs recibe su nombre en honor a su descubridor Sir Hans Krebs, quien propuso los elementos clave de esta va en 1937.
La historia comienza a principios de la dcada de los 30s con el descubrimiento de que al agregar succinato, fumarato y malato a msculos machacados incrementa la velocidad del consumo de Oxgeno.
El oxaloacetato se incorpor a la lista de cidos dicarboxlicos cuando se descubri que se poda formar en condiciones aerbicas a partir del piruvato. En 1935 A. Szent-Gyrgyi propuso que ciertos pares de cidos dicarboxilicos eran interconvertidos por la accin de deshidrogenasas y que este proceso estaba relacionado con la respiracin.
Carl Martius y Franz Knoop mostraron que el cido ctrico es convertido en alfa- cetoglutarato por medio del isocitrato. Se supo tambin que el alfa-cetoglutarato puede ser oxidado a succinato.
La formacin del citrato era la pieza faltante para poder armar completamente el rompecabezas metablico.
El descubrimiento que resolvi este rompecabezas y unific el metabolismo fue hecho en 1937 por Sir Hans Krebs y W.A. Johnson: ellos mostraron que el citrato es derivado del piruvato y del oxaloacetato completando lo que se conoce como el ciclo del cido ctrico. 9 10 Reacciones del Ciclo de Krebs 11
1 - Formacin de Citrato 12 2 - Formacin de Isocitrato va cis-Aconitato La aconitasa contiene un centro hierro azufre que acta como centro de fijacin de sustratos y centro cataltico H 2 O
13 3 - Oxidacin del Isocitrato a Alfacetoglutarato y CO 2 La isocitrato deshidrogenasa descarboxilacion oxidativa isocitrato hasta cetoglutarato. El Mn +2 interacciona grupo carbonilo del oxalsuccinico hasta descarboxilacion da cetoglutarato. 14 4 Oxidacin del Alfacetoglutarato a Succinil CoA y CO 2 El NAD + acta aceptor electrones y la CoA transportador grupo succinilo. La
cetoglutarato similar piruvato deshidrogenasa estructura y funcin. 15 5 - Conversin de Succinil-CoA en Succinato
El succinil CoA tiene tioester con energa libre hidrlisis altamente negativa. Promover sntesis enlace fosfoanhidrido del GTP o ATP. nucleosido difosfato quinasa GTP + ADP ---------------- GDP + ATP 16 6 - Oxidacin de Succinato a Fumarato Q QH2 Eucariotas succinato deshidrogenasa esta membrana mitocondrial; procariotas membrana citoplasmtica. La enzima contiene agrupaciones ferro- sulfuradas + FAD. El malonato inhibidor competitivo succinato deshidrogenasa. 17 7 - Hidratacin del Fumarato y produccin de Malato La enzima altamente estereoespecifico cataliza hidratacin doble enlace en trans fumarato no doble enlace cis malato 18 8 - Oxidacin de Malato y regeneracin del Oxalacetato 19 Ciclo de Krebs, visin global QH2 http://www.sigmaaldrich.com/Area_of_Interest/Life_Science/Metabolomics/Key_Resources/Metabolic_Pathways/TCA_Cycle.html
20 Balance del Ciclo de Krebs Acetil-CoA + 3 NAD + + Q + GDP(o ADP) + Pi + 2 H 2 O
2 CO 2 + CoASH + 3 NADH + QH 2 + GTP (o ATP) + 2 H + 21 Ganancia energtica a partir de una molcula de Glucosa 22 Regulacin del Ciclo de Krebs
Complejo Piruvato deshidrogenasa Pir, CoASH, NAD + Acetil-CoA, NADH, CO 2 + +
Regulacin Covalente Regulacin Alostrica
- - 23 Regulacin del Ciclo de Krebs
Regulacin alostrica de enzimas claves
Citrato sintasa Inhibidores: NADH, Succinil-CoA, Citrato, ATP Activadores: ADP
Isocitrato deshidrogenasa Inhibidores: ATP Activadores: Ca +2 (msculo), ADP
Alfacetoglutarato deshidrogenasa Inhibidores: Succinil-CoA, NADH Activadores: Ca +2 (msculo)
Regulador clave: relacin mitocondrial de [NAD+] / [ NADH] 24 Ciclo de Krebs, conclusiones globales En eucariotes transcurre en la mitocondria. Va central del metabolismo aerobio: es la va oxidativa final en el catabolismo de los carbohidratos, cidos grasos y aminocidos. La accin acoplada del ciclo del cido ctrico y la cadena de transporte de electrones son responsables de la mayora de la energa producida. Fuente importante de intermediarios de vas biosintticas.