Cintica Enzimtica

Diseo de biorreactores
Escuela de procesos y energa
Facultad de minas
1
Objetivo: ecuaciones de velocidad de reaccin enzimtica
Enzima
Las enzimas son protenas elaboradas por las clulas
(tambin contienen grupos prostticos) que las hacen
catalticamente activas


Principal diferencia entre el catalizador qumico y una
enzima?
3
4
ENZIMAS
Propiedades

Capacidad cataltica
(actividad Enzimtica):

Se ubica en el sitio activo
(nmero pequeo
de aminocidos)
Enzima
5
E+S ES EP E+P
6
ENZIMAS
Propiedades

Capacidad cataltica:
El sustrato concuerda perfectamente con el sitio
activo, aunque a veces el sitio activo toma la
forma del sustrato, se forma el complejo
Sustrato-enzima y luego los productos.
7
ENZIMAS
Propiedades

Cofactores

Coenzimas
Cofactor + enzima :
Haloenzima

8
ENZIMAS
Propiedades
Cofactores
pueden ser iones metlicos, siendo parte estructural de la enzima o
participando en la reaccin.



ENZIMAS
9
Clasificacin segn su capacidad de ser
reguladas o no, las enzimas se clasifican en:

1. Alostricas o regulables

2. Isostricas
ENZIMAS
10
Clasificacin

1. Alostricas o regulables

Regulacin:
Activacin alostrica: Enzima aumenta afinidad
por el sustrato y velocidad de reaccin.
Inhibicin alostrica: Disminucin de la velocidad
de reaccin y afinidad por sustrato.
ENZIMAS
11
Clasificacin

2. Isostricas

No son reguladas por molculas diferentes a
su sustrato o productos de la reaccin que
estn catalizando.
ENZIMAS
12
Caractersticas

Catalizadores ms eficientes: aumento de la
velocidad de reaccin del orden de 10
6
a 10
12

Alta especificidad: Catalizan una sola reaccin o
un grupo de reacciones similares

Necesitan de condiciones suaves: temperaturas <
100C y pH neutros
ENZIMAS
13
Caractersticas

Amplio intervalo de reacciones: Catalizan un
nmero de reacciones amplio

Actividad sujeta a regulacin: Existen mecanismos
naturales que regulan la actividad de la enzima
14
ENZIMAS
Propiedades

Factores pueden alterar la estabilidad de la enzima:
Fsicos (Calor, radiacin, congelacin).

Qumicos (pH, oxidaciones, reducciones, solventes,
degradacin enzimtica).
15
ENZIMAS
Propiedades

Especificidad:
Se presentan dos situaciones:
1. Sustrato posee enlaces que pueden ser atacados
por el centro activo de la enzima.

2. Sustrato posee grupos funcionales que se unen a
la enzima en el sitio activo.
16
ENZIMAS
Propiedades

Especificidad absoluta
nicamente catalizan una reaccin particular de un
sustrato particular, no de sustratos parecidos

Especificidad estereoqumica
Especificas frente a una forma estereoismera del
sustrato (L/D, cis/trans)
17
ENZIMAS
Propiedades

Especificidad de grupos
Actan sobre molculas semejantes con mismos grupos
funcionales

Especificidad de enlaces
Atacan a un tipo de enlace qumico particular sin importar los
alrededores
Clases de enzimas
1. Oxidoreductasas AH
2
+ B + E A + BH
2
+ E
2. Transferasas AB + C + E AC + B + E
3. Hidrolasas AB + H2O + E AH + BOH + E
4. Isomerasas A + E iso-A + E
5. Liasas AB + E A + B + E
6. Ligasas A + B + E AB + E
18
Enzima
19
20
ENZIMAS
Propiedades

Tipos de mecanismos
Enzima sin requerimientos de cofactor

E E
S P
21
ENZIMAS
Propiedades

Tipos de mecanismos
Enzima con requerimientos de cofactores ligados
(catalticos).

E
E-
CoE
S
P
CoE
22
ENZIMAS
Propiedades

Tipos de mecanismos
Enzima con requerimientos de cofactores
disociables (estequiomtricos)

E
E-CoE
S
P
CoE
E
CoE
Cintica de Michaelis - Menten
41

= =

+

E+S ES EP E+P

= =
2

+

Representacin Lineweaver-Burk
1

+
1

= =

+

Representacin Eadie - Hofstee

= =

+

Representacin Langmuir

= =

+

Inhibicin Enzimtica
Existen dos tipos de inhibicin:
1. Inhibicin irreversible
2. Inhibicin reversible
La inhibicin reversible se puede dar por tres
mecanismos.
Inhibicin Enzimtica
1. Inhibicin Competitiva


2. Inhibicin no Competitiva


3. Inhibicin Anticompetitiva
46
+
+ +
+ +
+
+ +
+
+ +

1 +

1 +

+ 1 +

= =

+

Cintica Alostrica
47
+

+
Cintica de Hill:
=

= =

+

Desactivacin enzimtica
La desactivacin se da naturalmente por efectos del pH,
fuerzas inicas, mecnicas y presencia de sustancias extraas
48

Integrando

=
2

=
2

Sustratos Mltiples
Mecanismos con formacin de complejo ternario
Mecanismo aleatorio.




Mecanismo Ordenado.
49
+ +
+ +
+ +
+ + + +
Sustratos Mltiples
Mecanismos sin formacin de complejo ternario.
50
+

+ +
Ecuacin General (funciona para todos los casos)

= =

+

Mecanismo Briggs - Haldane
Aproximacin de Michaelis Menten: la primera reaccin est
en equilibrio qumico.
Aproximacin de Briggs Haldane: La velocidad de
acumulacin del complejo est en pseudoestado estacionario
51
E+S ES E+P

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