Y EN EL DEPARTAMENTO DEL CESAR INTRODUCCIN Actividades ocupacionales y riesgo de enfermedades: pintores, empresas que trabajan con hidrocarburos, pesticidas, etc. Entidades de vigilancia: UEPA, IARC Cncer, tumores, malformaciones congnitas. Estructura qumica del cido desoxirribonucleico: cambios. Factores que inducen cambios. Diversos mtodos de estudio de biomonitoro. Diversos organismos. Biomonitoro en Colombia y en el departamento del Cesar.
OBJETIVO Presentar algunos aspectos relacionados con el biomonitoro humano y su aplicacin en Colombia y en el departamento del Cesar. Analizar posibles factores ambientales que se pueden estar comportando como agentes mutacarcinognicos. Fomentar el inters en la investigacin en la comunidad acadmica del departamento del Cesar. 4.000.000 LOS CAMBIOS EN LOS CIDOS NUCLEICOS GENERAN MUTACIONES: CNCER, TUMORES, MALFORMACIONES, ENTRE OTROS. EL MILAGRO DE LA VIDA!!!! Sndrome alcohlico fetal Mutaciones en genes del desarrollo Consecuencias de la exposicin a algunos medicamentos Mutaciones cromosmicas y agentes aneungenos. ANORMALIDADES CROMOSMICAS Y CNCER TIPOS DE ESTUDIO DE MUTACARCINOGNESIS Organismos de estudio Drosophilla melanosgaster Allium sepia C. elegans Mus musculus Homo sapiens Los biomarcadores se pueden definir como cualquier indicacin biolgica que demuestre que una exposicin a un contaminante ha tenido lugar.
1. Biomarcadores de exposicin: medida de los qumicos (incluyendo metabolitos) en fluidos corporales, tejidos, clulas o productos de interaccin entre qumicos y biomarcadores. (metabolitos en orina)
-2. Biomarcadores de efecto: son cambios morfolgicos, fisiolgicos y/o bioqumicos que han ocurrido como resultado de la exposicin a xenobiticos. (Daos cromosmicos y gnicos)
-3. Biomarcadores de susceptibilidad: cualquier factor usualmente intrnseco o gentico que puede resultar en una respuesta incrementada a la exposicin (Genes de susceptibilidad) MTODOS DE ESTUDIO Test de alteraciones cromosmicas. Test de micronucleos. Ensayo cometa. Ensayo de Ames. Intercambio de cromtides hermanas.
Ensayo cometa Prueba de microncleos Clulas Placas y lisis electroforsis Neutralizacin y tincin Observacin y anlisis: ID y DF 19 Cultivo de linfocitos Citocalacina B Choque hipotnico Tincin y recuento
Test de alteraciones cromosmicas Toma de muestras de sangre (heparina) Cultivo de linfocitos: medio, PHA, antibiticos, suero fetal bovino Cosecha: obtencin de linfocitos en mitosis: colcemid Solucin hipotnica KCl Fijacin: metanol-cido actico lavados Goteo tincin Anlisis microscpico Estudios en el departamento del Cesar Biomonitoro en poblaciones humanas expuestas a pesticidas (dos municipios). Grupo GENPOP y GIEM Universidad de Antioquia. 125 toneladas de pesticidas!!!! El Copey Francia 24 Problemtica ambiental 25 26 27 28 Objetivo general
Estudiar el posible efecto genotxico, a nivel de DNA nuclear de dos poblaciones humanas que residen en zonas de invasin (colonizacin humana), ubicadas en entierros de pesticidas en los municipios de El Copey y Codazzi (Departamento del Cesar).
Objetivos especficos.
Establecer la asociacin entre la exposicin a pesticidas presentes en asentamientos humanos en los municipios de El Copey y Codazzi, y los niveles de inestabilidad genmica.
Correlacionar el efecto de polimorfismos genticos relevantes al metabolismo de plaguicidas orgnicos, con los niveles de genotoxicidad en los grupos de personas expuestas seleccionadas en este estudio.
Cuantificar el nivel de dao nuclear en clulas individuales y poblaciones celulares de PBMC circulantes.
Correlacionar el efecto de polimorfismos genticos relevantes al metabolismo de plaguicidas orgnicos, con los niveles de genotoxicidad en los grupos de expuestos seleccionados.
Proponer estrategias sociales y de salud que permitan disminuir el riesgo a enfermedades crnicas y/o degenerativas como el cncer, epidemiolgicamente asociadas con la exposicin a genotxicos ambientales como los pesticidas orgnicos. OBJETIVOS ESPECFICOS Estudio de casos y controles: expuestos y no expuestos Aprobacin comit de Biotica Aplicacin de encuestas Toma de muestras: sangre (EDTA y Heparina, orina) Anlisis de polimorfismos Ensayo cometa Test de alteraciones cromosmicas Extraccin de ADN: salting Out Amplificacin de genes de susceptibilidad: PCR Corte con enzimas de restriccin Obtencin de linfocitos y conteo Electroforeesis Siembra de las clulas Lisis celular Electroforesis Observacin microscpica y anlsis Cultivo de linfocitos: RPMI, fitohemaglutinina, Suero fetal bovino Cosecha: colcemid Solucin hipotnica goteo Tincin y anlisis microscpico Resultados parciales: Estudios de Biomonitoro en Colombia Conclusiones En Colombia se hace biomonitoro en diversas especies. Dentro de los factores asociados a mutacarcinogenesis se encuentran los pesticidas. Los estudios de biomonitoro permiten tomar medidas de prevencin.