MIP 5213 Virologia Bsica e Clnica

Profa. Cludia Maria Oliveira Simes

Departamento de Cincias Farmacuticas/CCS
UNIVERSIDADE FEDERAL DE
SANTA CATARINA
Introduo

Infeces virais
Problema de sade mundial
Morbidade e mortalidade
Famlia Herpesviridae
+ de 100 tipos de vrus
Caracterizados com base na estrutura do vrion
Latim herpes, grego herpein = to creep
( = rastejar, rptil, se movimentar como as
cobras, sorrateiramente)


Histrico

460/377 a.C. mdico grego Hipcrates, herpes
484/425 a.C. historiador grego Herdoto,
herpes febrilis
129/204 a.C. farmacutico e mdico grego
Galeno, excretinas herpticas
1919, Lowenstein natureza infecciosa das
leses: humanos coelhos
1968: Nahmias e Dowdle: 2 tipos de HSV


Vrus herpticos humanos
NOME COMUM DESIGNAO SIGLA SUBFAMLIA
Herpes Simplex Vrus tipo 1 Herpesvrus humano 1 HSV-1
Herpes Simplex Vrus tipo 2 Herpesvrus humano 2 HSV-2
Vrus da Varicela-Zoster Herpesvrus humano 3 VZV
Vrus Epstein-Barr Herpesvrus humano 4 EBV
Citomegalovrus Herpesvrus humano 5 CMV
Vrus Herpes Humano tipo 6 Herpesvrus humano 6 HHV-6
Vrus Herpes Humano tipo 7 Herpesvrus humano 7 HHV-7
Vrus Herpes Humano tipo 8 Herpesvrus humano 8 HHV-8
Fonte: SANTOS; SILVA; PEREIRA JNIOR (2000)
Classificao
Alfa-herpesvrus
citoltico (lise das clulas
infectadas)
crescimento lento
infeces latentes em clulas
neurais (nervos sensoriais)
HSV-1, HSV-2 e VZV
Classificao


Beta-herpesvrus


citomeglicos (aumento
das clulas infectadas)
crescimento lento
infeces latentes nas
glndulas secretrias e
nos rins
CMV, HHV-6 e HHV-7
Classificao


Gama-herpesvrus
infectam clulas linfides
infeces latentes em
clulas linfides
VEB e HHV-8
Estrutura
120 a 300 nm
Genoma DNA de fita dupla
Capsdeo - simetria icosadrica
Tegumento com protenas e enzimas virais
Envelope lipoproteco com espculas de
glicoprotenas
Herpes viruses
Envelope
Nucleocapsid
GENOMA
HSV-1 - REPLICAO
FONTE: Fields Virology 4 ed. (2001)
FASE IMEDIATA
2-4h PS-INFECO
ICP0 ICP4 ICP22
ICP27 ICP47
FASE PRECOCE
5-7h PS-INFECO
DNA POLIMERASE VIRAL
REPLICAO DNA VIRAL
FASE TARDIA
PROTENAS
ESTRUTURAIS DO VRUS
gD
Mecanismo de Latncia dos
HSV- 1 e HSV-2


Aps a infeco ltica nas
clulas (mucosa ou epiderme
primoinfeco), os vrus
penetram pelas terminaes
nervosas axnio gnglio
sensorial

HSV-1: latncia nos gnglios
do nervo trigmio

HSV-2: latncia nos gnglios
sacrais prximo a coluna
Mecanismo de Latncia

Unlike love, herpes is forever!!!!
HSV-1 e HSV-2:
PATOGENIA E PATOLOGIAS

PORTA DE ENTRADA



REPLICAO LOCAL


Disseminao hematognica ou neurognica



mucosas, rgos genitais e escoriaes da pele
propagao
INFECO PRIMRIA
Manifestaes Clnicas (alguns exemplos)
Recuperao da infeco primria
Gengivoestomatite herptica
Ceratoconjutivite herptica
Meningoencefalite herptica
Herpes neonatal


O vrus entra em estado de latncia,
podendo ser reativado Infeco secundria
INFECO PRIMRIA
IP pode tb. ser
assintomtica!
MANIFESTAES CLNICAS
1. Doena orofarngea ou gengivoestomatite
herptica

A doena sintomtica ocorre mais frequentemente em
crianas (1-5 anos) e afeta a mucosa bucal e gengival
A doena clnica tem durao de 2-3 sem. - HSV-1
Sintomas: febre, faringite, leses vesiculares e
ulcerativas, edema, gengivoestomatite, linfadenopatia
submandibular, anorexia, mal-estar, etc.
A doena recorrente localiza-se na borda dos lbios, com
dor no incio e desaparece em 4-5 dias, com recidivas.
HERPES ORO-FARNGEO
MANIFESTAES CLNICAS
2. Ceratoconjuntivite

A infeco inicial por HSV-1 pode
ocorrer nos olhos, produzindo
ceratoconjuntivite grave.
Leses oculares recorrentes so comuns
(lcera de crnea e vesculas nas
plpebras) podem levar
cegueira
MANIFESTAES CLNICAS
3. Herpes Genital (HG)

Habitualmente causada por HSV-2, mas tambm
por HSV-1
Infeces genitais primrias podem ser graves e
durar cerca de 3 semanas
Leses vesculo-ulcerativas no pnis ou no colo
uterino, vulva, vagina e perneo
HG pode estar associado febre, mal-estar,
disria e linfadenopatia inguinal
HERPES GENITAL
MANIFESTAES CLNICAS
4. Infeces Cutneas

A pele intacta resistente aos HSV
Contaminao ocorre via escoriaes
So quase sempre graves e potencialmente
fatais quando ocorrem em indivduos com
distrbios cutneos, como eczema ou
queimaduras, que permitem a extensa
replicao e disseminao do vrus.

HERPES CUTNEA
MANIFESTAES CLNICAS
5. Encefalites

Leso do lobo temporal
Presena de pleiocitose (>>>>>linfcitos
no lquido cefalorraquidiano)
Diagnstico definitivo - isolamento do
vrus por bipsia ou post-mortem
Alta taxa de mortalidade ou deixa
sequelas neurolgicas residuais

MANIFESTAES CLNICAS
6. Herpes Neonatal
A infeco por HSV pode ser adquirida in utero,
durante o parto normal ou aps o nascimento

1 em 5.000 partos por ano
Recm-nascidos: baixa imunidade - doena grave
Taxa de mortalidade da doena no tratada = 50%
Leses: olhos, pele e boca; encefalite; e doena
disseminada em mltiplos rgos.
+ comum (75%), opo pela cesariana
HERPES NEONATAL

Infeces em indivduos
imunocomprometidos

Alto risco de infeces graves

Pacientes HIV+/AIDS
Pacientes com alto grau de desnutrio
Pacientes submetidos a tratamento antineoplsico

Na maioria dos casos, a doena reflete a reativao de infeco
latente por HSV.

Manifestaes clnicas do HSV-1 so
muito caractersticas, tal como o herpes
labial recorrente.





DIAGNSTICO LABORATORIAL

Manifestaes clnicas do HSV-2 so muito
caractersticas, tal como o herpes genital.





Usualmente, confirmao laboratorial
no requerida!



Outras manifestaes no to claras
necessitam de confirmao laboratorial!

Exs. leses atpicas, vesculas no visveis
(encefalite herptica, ceratoconjuntivite, herpes
genital confinado ao crvix, traqueobronquite,
doena disseminada (HIV +), etc.)

Amostras clnicas: fluido vesical, fluido
cerebroespinhal, esfregaos do trato genital,
garganta, olhos, reto, pele, mucosas,
lavados do trato respiratrio, etc.



Isolamento em cultura de clulas gold
standard - mtodo de escolha se o material for
coletado precocemente, colocado num meio
adequado para transporte, mantido em gelo e
transferido rapidamente para o laboratrio




Fibroblastos humanos ou clulas VERO so
permissivas infeco pelo HSV

Efeito citoptico aparece em 2 a 7 dias
caracterstico em cachos de uva
Diagnstico confirmatrio em 24h por
imunofluorescncia









Diferenciao entre HSV-1 e HSV-2: no relevante para
o tratamento - somente em casos de estudos
epidemiolgicos

Uso de anticorpos monoclonais especficos, kits
disponveis no mercado distino entre os dois tipos
Rapidez crucial em
situaes onde o paciente
necessita se beneficiar logo do
tratamento
Por ex., teste de escolha para
o diagnstico da encefalite
herptica deve ser rpido,
mas difcil- uso do PCR para
amplificar o DNA do HSV no
fluido cerebroespinhal
conveniente, por ser muito
mais rpido e mais sensvel do
que o isolamento viral em
cultura de clulas.
A bipsia cerebral muito
invasiva e no mais usada!

Diagnsticos mais rpidos: deteco dos
antgenos de HSV em clulas de leses deteco
por imunofluorescncia ou por deteco
colorimtrica com imunoperoxidase

Ensaios imunoenzimticos ou radioimunoensaios
tambm podem ser usados para detectar IgM anti-
HSV em fluido cerebroespinhal

Sorologia s usada atualmente para estudos
epidemiolgicos - Kits especficos para diferenciar
os 2 tipos

EPIDEMIOLOGIA
Homem: nico hospedeiro
Distribuio mundial
Transmisso por contato com secrees infectadas
90% das primo infeces so inaparentes (assintomticas)
SBD (2011): 94% populao infectada pelo HSV-1

HSV-1
provvel que seja o vrus mais constantemente encontrado em
humanos (>>>metade da populao +)
HSV-1: contato com saliva - primeiro contato de 6 meses a 3 anos
Estabelece um estado de portador por toda a vida !

HSV-2
Contato sexual, ou quando a me infectada passa para o feto pelo
parto, transplacentria
DST: 500.000 novos casos por ano
Abortos espontneos em mes com 20 semanas de gestao
HHV-3
Vrus da Varicela-
Zoster
(VZV)

Vrus da Varicela-Zoster
Famlia Herpesviridae
Subfamlia: Alphaherpesvirinae
Gnero: Varicellovirus
Latncia - neurnios

Causa: varicela ou catapora
&
herpes zoster ou cobreiro


Patognese
Porta de entrada: vias respiratrias, raramente
- conjuntiva ou pele
Multiplicao do vrus no local de
contaminao
Disseminao hematognica e linftica -
fgado e bao
Viremia secundria (aps 11-13 dias)
disseminando-se por todo o corpo e pele -
exantema vesculo-pustular drmico, febre e
sintomas sistmicos Varicela (= CATAPORA)
Varicela ou catapora

Patognese
Aps infeco primria - permanece
latente
Pode haver reativao em adultos
(traumas fsicos ou psquicos) ou em
pacientes com imunidade comprometida

O vrus migra das vias neurais para a pele
- erupo vesicular - Herpes zoster (=
cobreiro)
Podem causar leso nervosa, diminuio
da viso, paralisia, e dor intensa.
Herpes zoster
Epidemiologia e preveno
A transmisso por via respiratria ou pelo
contato com vesculas cutneas
Os pacientes so contagiosos antes e durante
os sintomas
Leses so fonte de vrus para indivduos no
imunizados
Varicela - surtos epidmicos - inverno e incio
primavera
Varicela - gestante feto (1 a 4 semanas antes
nascimento) - catapora grave ou fatal

HHV-4
Vrus Epstein-
Barr
- VEB -
Vrus Epstein - Barr
Famlia Herpesviridae
Subfamlia: Gamaherpesvirinae
Gnero: Lymphocriptovirus
Latncia - linfcitos B
Vrus oncognico
Causa:
Mononucleose infecciosa
Neoplasia de origem linfide: linfoma de
Burkitt (carcinoma nasofarngeo)
Quadros cutneos
Pacientes HIV+ /AIDS - leucoplasia oral pilosa

Epidemiologia
+ de 90% dos indivduos infectados -
eliminam o vrus durante toda a vida
Populaes carentes, infncia
Transmisso: saliva sobre dedos ou fmites
Populaes economicamente diferenciadas:
incio da idade adulta, rota usual : beijo
Ocorre no outono, inverno e primavera
No existe tratamento nem formas de
controle da doena.
Infeco produz imunidade por toda vida

Patognese Mononucleose
infecciosa
Porta de entrada: orofaringe - saliva
Infeco das clulas epiteliais da orofaringe
e das glndulas salivares
Disseminao para sistema linftico - cl. B
Disseminao por viremia ou pelos
linfcitos infectados - fgado e bao
Produo de Ac IgM contra Ag do capsdeo
viral (poucos meses) e AC IgC (toda a vida)


Rash cutneo e
alteraes hematolgicas
(infeco aguda)
Faringite
Fadiga
Febre
Edema
linfonodos
Mononucleose
causa:
HHV-5
Citomegalovrus
- CMV -


Vrus espcie-especfico, homem, 1 nico tipo antignico
Genoma 50% >> HSV, ECP caracterstico: grandes clulas com incluses
citoplasmticas e nucleares
Inativao: calor (56 C, 30min), pH cido, ter, luz UV, cong/descong
Infeco por CMV (isolamento, deteco de presena) COMUM!!
Doena por CMV (evidncia histolgica, sndrome caracterstica, excluso
de outras etiologias, presena da infeco por CMV) MENOS FREQUENTE!!!

CMV causa:
Infeco congnita e perinatal (IC menos comum, mas +++ grave que a IP)
Infeco em adultos imunocompetentes
Infeco em indivduos imunodeprimidos


Famlia Herpesviridae
Subfamlia: Betaherpesvirinae
Gnero: Citomegalovirus




Infeco congnita (IC)
Infeco na gravidez: principal causa de anormalidades congnitas em
recm-nascidos
IC: morte do embrio ou do feto, criana pode nascer com SCDCC
(Sndrome Clssica da Doena Citomeglica Congnita = Doena de
Incluso Citomeglica Tpica)
SCDCC: beb prematuro, ictercia, hepatoesplenomegalia, prpura
trombocitopnica, anemia hemoltica, pneumonite, leso do SNC, retinite,
atrofia tica, microcefalia, retardo mental ou motor
2-4 anos : surdez, QI abaixo do normal, epilepsia e problemas
comportamentais e motores

Infeco perinatal (IP)

Mulheres infectadas antes da gravidez excretam CMV em secrees do
colo uterino (ltimo trimestre) parto infectam bebs
IP comum e frequentemente inaparente!



Infeco em adolescentes e adultos jovens imunocompetentes
Infeco assintomtica ou causa sndrome semelhante da
mononucleose causada pelo VEB (febre, mal-estar generalizado, mialgia,
adeno- e esplenomegalia, erupes cutneas)
Contaminao: beijo, contato sexual e transfuso sangue
Sintomas + brandos
Infeco em indivduos imunodeprimidos
HIV+/AIDS, transplantados, bebs prematuros
Maioria dos rgos so afetados DOENA GRAVE
Manifestaes: pneumonia, hepatite, retinite, artrite,
miocardite, infeco GI, e doenas SNC (encefalite,
Sndrome Guillain Barr - transtorno neurolgico, no qual o sistema
inmunolgico ataca o sistema nervoso perifrico, que pode aparecer depois de uma infeco viral,
uma ciruga ou um traumatismo, tal como reao a uma vacina).

AIDS:Retinite por CMV
HHV-6: Herpes vrus humano 6
1986 descoberta
1992 - 2 variantes subgrupos A e B, 99% casos tipo B
HHV-6 ubiquitrio, IP antes de 2 anos persistncia
viral eliminao saliva
Crianas: infeco primria assintomtica ou pode
causar o exantema sbito (rosola infantil): febre alta, 3
dias, queda abrupta, erupo cutnea macular,
resoluo espontnea em 2- 48h (otite, disfunes TG e
TR, dores corporais)


Famlia Herpesviridae
Subfamlia: Betaherpesvirinae
Gnero: Roseolovirus
HHV-6
Adultos: infeco primria - sndrome mononucleose
like, linfadenopatia persistente, hepatite fulminante,
desordens auto-imunes, esclerose mltipla, sndrome da
fadiga crnica, infeco generalizada

Imunodeprimidos: (1) por HIV+/AIDS ou (2) por induo de
frmacos imunossupressores: infeco ou reativao
provocam manifestaes severas, tais como:
(1) aumento abrupto da carga viral HIV e HHV-6 nos
linfonodos e sangue infeco ativa SNC, pneumonia, retinite
mau prognstico
(2) pneumonia, encefalite, hepatite, febre e erupes pele,
supresso da medula rejeio total enxerto e morte.

HHV-6
ESCLEROSE MULTIPLA E NEUROTROPISMO

Perodo curto de recorrncia e de remisso da doena,
deteriorao progressiva e crnica do crebro paralisia e
morte
Caracterstica neuropatolgica: perda de mielina e gliose
na massa branca do crebro
Doena tipo auto-imune
Estudos epidemiolgicos: Fator desencadeante um agente
infeccioso!
Vrus desmielinizantes: sarampo, HIV-1
HHV-6 (bastante provvel)



HHV-6
SNDROME DA FADIGA CRNICA (SFC)

CDC: fadiga inexplicada, no ligada ao esforo
contnuo, que no aliviada pelo descanso, e resulta
em reduo significativa dos nveis de atividade
fsica e mental
Presena de replicao ativa do HHV-6 no SNC de
pacientes com SFC potencial agente causador !!
HHV-7: Herpes vrus humano 7

1990, causa infeco produtiva em clulas T CD4+
No est ainda bem claro o envolvimento do HHV-7 em doenas
humanas
IP: exantema sbito (HHV-6 / HHV-7)
Reativao: pitirase rsea
HHV-7+: crianas at 3 anos
Crianas mais velhas: causa exantema sbito (HHV-6)
EUA: adultos soropositividade 95%


Famlia Herpesviridae
Subfamlia: Betaherpesvirinae
Gnero: Roseolovirus
HHV-8
Herpes vrus humano 8
Famlia Herpesviridae
Subfamlia:
Gamaherpesvirinae
Gnero: Rhadinovirus
ASSOCIAO DO HHV-8 COM
DISTRBIOS NEOPLSICOS
- Oncovrus -
Sarcoma Kaposi (SK): mdico grego 1871
- SK: homens homo-/bi HIV+
- SK africano: 10% tumores , agressivo aps
infeco HIV
- SK clssico: pacientes idosos do oeste
mediterrneo, brando
- SK ps-transplante: terapia imunossupressora

Leso: mltiplas manchas, nodulares ou planares,
extremidades, mucosa e vsceras





EVIDENCIAS DA ASSOCIAO ENTRE A
INFECO POR HHV-8 E
SARCOMA DE KAPOSI
HHV-8 pode ser encontrado em todas as
formas epidemiolgicas do SK
HHV-8 + : 5060 % pacientes AIDS/SK
Presena de Ac para HHV-8 em pacientes
com SK em reas endmicas e no
endmicas
BIBLIOGRAFIA
SANTOS, N.S.O.; ROMANOS, M.T.V.; WIGG, M.D. (Org.)
I ntroduo Virologia Humana. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 2002. 254p.

LUPI, O.; DA SILVA, A.G.; PEREIRA JR., A.C. (Org.)
Herpes: clnica, diagnstico e tratamento. Rio de Janeiro:
MEDSI, 2000. 278p.

http://virus.stanford.edu/vweb.html

HSV-1 - REPLICAO
FONTE: Fields Virology 4 ed. (2001)
FASE IMEDIATA
2-4h PS-INFECO
ICP0 ICP4 ICP22
ICP27 ICP47
FASE PRECOCE
5-7h PS-INFECO
DNA POLIMERASE VIRAL
REPLICAO DNA VIRAL
FASE TARDIA
PROTENAS
ESTRUTURAIS DO VRUS
gD
Linfcitos T atpicos - clulas de
Downey
H, em geral mais de 50% de linfcitos,
entre os quais 10% ou + so descritos como
"atpicos. Estas clulas correspondem a
linfcitos T CD8+ supressores/citotxicos
ativados e surgem no s na mononucleose,
como tambm em outras infeces virais
(rubola, caxumba, hepatite) e nas outras
causas da sndrome adenomeglica, como
toxoplasmose aguda, citomegalovirose,
primo-infeco pelo HIV, doena de Chagas
aguda, e alergia a frmacos. O que chama a
ateno na mononucleose pelo VEB o seu
grande nmero.