Tcnicas utilizadas en Biologa Molecular.

Son aquellas que usan mtodos y

tcnicas con cidos nuclicos
recombinantes para un propsito
determinado, que puede ser con
fines diagnsticos, de monitoreo o
de estimacin de riesgos y
pronstico.
Ademas se conocen as a todas las
tcnicas de laboratorio que se usan
para aislar ADN o extraerlo en alta
pureza, visualizarlo para ver su
estado, (clonacin de fragmentos en
bacterias u otros vectores como
virus y PCR), corte de una
determinada regin con enzimas de
restriccin para ver si por una
mutacin se gana o se pierde un
sitio de restriccin.








Tcnica de Deteccin de ADN Y ARN

Los cidos nucleicos como el ADN y el ARN, pueden ser localizados
mediante numerosos mtodos.

Reaccin de Feulgen: utiliza cido clorhdrico que hidroliza el ADN
formando aldehdos.

Colorantes fluorescentes: colorantes como el ioduro de propidio, se unen
al ADN y dan una fluorescencia proporcional a la cantidad de ADN
presente.

Colorantes bsicos: los colorantes bsicos como la hematoxilina, el azul
de toluidina, el violeta de cresilo se unen a los grupos fosfatos presentes
en el ADN y ARN.

Tcnica de Electroforesis:
La electroforesis es un mtodo de laboratorio en el que se utiliza una
corriente elctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas
segn su tamao y carga elctrica a travs de una matriz gelatinosa.





Hibridacin in situ:

Es una de las ltimas tcnicas
desarrolladas por la biologa
molecular. Es un mtodo que analiza
la distribucin de una secuencia
particular de nucletidos de ADN
(genes especficos) o ARN (ARN
mensajeros especficos).
Esta tcnica permite localizar un
ADN especfico o identificar la
expresin gentica por la
presencia de ARN mensajero en el
citoplasma celular.


Tcnica de Clonacin


La clonacin se basa en extraer de una
clula adulta el ncleo, el cual contiene
el material gentico, para introducirlo
en un vulo previamente enucleado, es
decir al que se le ha extrado el ncleo.
Se obtiene as un embrin
genticamente idntico al adulto del
que se obtuvo la clula de partida y que
se implanta en el tero de la madre
portadora, en cuyo vientre se
desarrollar el feto.La clonacin
reproductiva tiene por tanto el objetivo
de reproducir seres humanos
completos.


Tcnica de amplificacin de
cidos nucleicos
El principal objetivo de la tcnica de
amplificacin de cidos nucleicos, es
mejorar la sensibilidad de los test
basados en cidos nucleicos y
simplificarlos mediante el uso de la
automatizacin y la incorporacin de
sistemas de deteccin no radiactivos.
Esta tcnica es diversa por lo que se
hace necesario una clasificacin de las
mismas
sistemas de amplificacin de la
diana, que incluye la reaccin en
cadena de la polimerasa
Sistemas de amplificacin de la
sonda, que la reaccin en cadena de
la ligasa
Sistemas de amplificacin de la
seal, en los cuales la seal generada
por cada sonda es aumentada.


Tcnica para el Anlisis
del Genoma











El diagnstico gentico es una prueba
muy compleja. Dicho estudio sirve para
identificar la causa gentica, de una
determinada enfermedad en un
paciente.
Aplicacin de las Tcnicas
Son inmumerables las aplicaciones de estas tcnicas y quizs las ms
usadas hoy en dia, son la PCR seguida de una restriccin con enzimas y
deteccin de los fragmentos en un gel o seguidas de un gel de
poliacrilamida que tiene ms definicin para la separacin de
fragmentos de pocas bases de diferencias. Cuando se usa PCR y enzimas
de restriccin se denominan PCR/RFLP (derivado de variacin en la
longitud de los fragmentos de restriccin en ingles).

Esta tcnica puede usarse entre otras cosas para deteccin de alelos de
un gen normales y mutados (enfermedades hereditarias) o para
distinguir cepas bacterianas o virales o alelos ms favorables para una
caracterstica de inters productivo para luego aplicarlo a la seleccin.