0 Bewertungen0% fanden dieses Dokument nützlich (0 Abstimmungen)
54 Ansichten55 Seiten
El documento describe el proceso de replicación del ADN. La replicación involucra la apertura de las dobles hélices de ADN por helicasas usando ATP, la prevención de la re-enrolladura de las cadenas por proteínas SSBP, y la síntesis de cada cadena como molde para la otra. La cadena molde en dirección 3'-5' permite la adición de nucleótidos en dirección 5'-3' por la ADN polimerasa, mientras que la otra cadena se sintetiza en fragmentos cortos llamados fragmentos de Okazaki debido a su dirección
El documento describe el proceso de replicación del ADN. La replicación involucra la apertura de las dobles hélices de ADN por helicasas usando ATP, la prevención de la re-enrolladura de las cadenas por proteínas SSBP, y la síntesis de cada cadena como molde para la otra. La cadena molde en dirección 3'-5' permite la adición de nucleótidos en dirección 5'-3' por la ADN polimerasa, mientras que la otra cadena se sintetiza en fragmentos cortos llamados fragmentos de Okazaki debido a su dirección
El documento describe el proceso de replicación del ADN. La replicación involucra la apertura de las dobles hélices de ADN por helicasas usando ATP, la prevención de la re-enrolladura de las cadenas por proteínas SSBP, y la síntesis de cada cadena como molde para la otra. La cadena molde en dirección 3'-5' permite la adición de nucleótidos en dirección 5'-3' por la ADN polimerasa, mientras que la otra cadena se sintetiza en fragmentos cortos llamados fragmentos de Okazaki debido a su dirección
Apertura de las dobles hlices por la helicasa usando ATP.
Las protenas SSBP evitan que estas se vuelvan a enrollar.
Cada cadena va a fungir como molde para la sintesis.
La cadena molde direccin 3 5, el ADN Polimerasa puede agregar nucletidos en direccin 5 3 sin inconvenientes.
Pero la hebra direccin 5 3 no puede replicarse de forma continua, por eso se llama retardada.
Iniciacin, elongacin, terminacin. Fase S: Es la fase en la cual se duplica por entero el material hereditarios Replicacin o duplicacin de ADN Ejemplificacin de un cariotipo Cromatide Cromatides hermanas ADN (Acido Desoxiribonucleico) Bicatenario Hlice Complementaria en el cdigo de los nucletidos Los nucletidos cumplen un patrn de unin. CADENAS: 3 5 5 3 (Complementaria) Desenrollar Las topoisomerasas son capaces de cortar y pegar ya sea una o dos de las hebras de azcar fosfato que forman el armazn o esqueleto del ADN. Esta rotura selectiva permite al ADN desenmaraarse y desenrollarse para permitir el acceso de otras enzimas a la infomacin contenida en su interior.
Abrir la hlice Da acceso a la enzima encargada de la replicacion (ADN Polimeraza) Protenas SSB que se unen a las cadenas molde. La apertura la produce la enzima helicasa, formando la horquilla de replicacion. Cebador: Fragmento de pocos nucletidos que se colocan al principio para que el ADN Polimerasa III pueda empezar a generar las cadenas (o Fragmentos de Okazaki), son generadas por la enzima Primasa y despus son removidas por el ADN Polimerasa I Se necesita un Cebador (Partidor o primer) porque la ADN Polimerasa III, enzima que cataliza la replicacin del ADN, no pueden empezar a sintetizar una nueva cadena de ADN de la nada, sino que solo pueden aadir nucletidos a una hebra preexistente. Su sntesis proviene de la ADN Primasa o ADN Polimerasa I. Estos cebadores son necesarios para que el ADN polimerasa III tenga un punto de partida (un grupo 3'-OH libre) en la sntesis 5'3' de la hebra molde y agregue los desoxinucletidos. Da acceso al ADN Polimerasa III. El ADN Polimerasa solo puede leer/sintetizar del extremo 3 5.
Emparejando los desoxirribonucletidos trifosfato (dNTP) con los desoxirribonucletidos complementarios Hebra Retardada. La hebra retardada es el DNA sintetizado donde la adicin de los nucletidos se efecta en el extremo opuesto al avance de la horquilla de replicacin. Este fragmento tiene su extremo 5' prximo al interior de la horquilla de replicacin, y se sintetiza en fragmentos cortos de Okazaki para rellenar el espacio creado por el DNA desenrollado
ADN Ligasa Es una ligasa: Tipo de enzimas que catalizan la unin de dos molculas, unida a la hidrlisis de un enlace pirofosfato (que suele ser rico en energa) que pertenece a una molcula de ATP o compuesto similar. ddNTP Los didesoxinucletidos (abreviados como ddNTP) son nucletidos que carecen de un grupo 3'-hidroxilo (-OH) en la desoxirribosa. Bidireccional y semiconservativa.
OriC (Origen de replicacion) N=Whatever
5' - GATCTNTTNTTTT 3 5' TT(A/T)T(A/C)CA(C/A)A 3
Complejo de reconocimiento de origen (ORC) secuencia de replicacin autnoma (ARS)
ADN ARNm Protenas Transfiere la informacin Sale del ncleo hacia el citosol Transcripcin
ADN ARN Molde Genes Actina Permite que se unan los factores de transcripcin Helicasa
Promotor. El promotor de un gen es la regin de ADN que controla la iniciacin de la transcripcin de dicho gen a ARN. TATA Box La caja TATA es una secuencia de ADN encontrada en la regin promotora de genes
FACTORES DE TRASCRIPCION Los factores de transcripcin pueden actuar reconociendo y unindose a secuencias concretas de ADN, unindose a otros factores, o unindose directamente a la ARN polimerasa.
-TFIID -TBP -TFIIB ARN Polimerasa II Es una enzima de eucariotas que cataliza la transcripcin del ADN a precursores de ARN mensajero, microARNs y otros tipos de cido ribonucleico. Lee de 3 5 rNTP -rATP -rGTP -rCTP -rUTP
Al finalizar la sntesis de ARNm, esta molcula ya se ha separado completamente del ADN (que recupera su forma original) y tambin de la ARN polimerasa, terminando la transcripcin. Secuencia de terminacin. La terminacin est sealizada por la informacin contenida en sitios de la secuencia del ADN que se est transcribiendo, por lo que la ARN polimerasa se detiene al transcribir algunas secuencias especiales del ADN Algunas secuencias de ADN carecen de la secuencia de terminacin, sino que poseen otra secuencia a la que se unen una serie de protenas reguladoras especficas de la terminacin de la transcripcin como rho.
Enhancer Sitios reguladores son secuencias de ADN Ante diversos estmulos puede aumentar o bajar la produccin de protena. Cambia la velocidad de transcripcin, por tanto acta como regulador MADURACION DEL ARNm
-Splicing o corte y empalme -Adicin de la caperuza (CAP) en el extremo 5 -Adicin de una cola poliA (Poliadeninas) Splicing (Cortar intrones, empalmar exones)
ARN y ADN contiene en su secuencias intercaladas de las cuales algunas codificaran informacin para las protenas, y otras que no codifican para eso Exon: Codifican para las protenas Intron: No codifican para las protenas. El Spliceosoma es un complejo formado por cinco ribonucleoprotenas nucleares pequeas (complejo formado por unas diez protenas ms una pequea molcula de ARN). El ARN de los snRNP es el encargado de reconocer el intrn. CAP o Encapuchamiento. -El ARN Polimerasa II adems de generar la hebra de ARNm, es una enzima que tiene unida unos grupos de proteinas que participan en el encapuchamiento que se produce en el extremo 5` que es el primero que queda libre.
-La capucha es una Guanina Metilada.
-Cuando salga al citosol le ayuda a que no sea degradado. POLI-ADENILACION EN 3 Cuando se finaliza la sntesis del ARNm se une una larga cola de nucletidos que tienen como base nitrogenada a la Adenina El corte de la endonucleasa deja un 3-OH que es reconocido por una RNA-polimerasa que no utiliza molde, sino que slo acepta ATP como sustrato, por lo que se llama poliadenilato-polimerasa (PAP). TRADUCCIN -Eucariota- -Pre- ARNm ARNm Maduro -ARNm viaja al Citosol -El codn de inicio codifica para una metionina. Es decir que todas la proteinas inician con un AA metionina
Procariota -Co-transcripcional. -Polisoma -Shine- Dalgarmo -Formilmetionina. ARNt Es una secuencia de 70 a 80 nucletidos, funciona como un adaptador entre un codn entre un ARNm y el aminocido para el que codifica que estar ubicado en el extremo 3` Los ARN-t tienen una estructura en forma de hoja de trbol con varios sitios funcionales: -Extremo 3': lugar de unin al aminocido (contiene siempre la secuencia ACC). -Lazo dihidrouracilo (DHU): lugar de unin a la aminoacil ARN-t sintetasa o enzimas encargadas de unir un aminocido a su correspondiente ARN-t. -Lazo de T C: lugar de enlace al ribosoma. -Lazo del anticodn: lugar de reconocimiento de los codones del mensajero
El que realiza el reconocimiento del codn correspondiente del ARN-m es el anticodn del ARN-t y no el aminocido El reconocimiento entre los tripletes del mensajero y los anticodones de los ARN-t cargados con su correspondiente aminocido, as como el establecimiento de los enlaces peptdicos entre dos aminocidos sucesivos tiene lugar en los ribosomas. Los ribosomas son unas estructuras o partculas citoplsmicas formadas por ribonucleoprotenas (unin de ARN ribosmicos con protenas ribosomales). Los ribosomas en las clulas eucariticas se encuentran en la membrana del retculo endoplasmtico. La estructura general de los ribosomas procariticos y eucariticos consta de una subunidad pequea, una subunidad grande Contiene tambien dos sedes, la sede aminoacdica (Sede A) lugar de entrada de los ARN-t cargados con un aminocido (aminoacil-ARN-t) y la sede peptdica (Sede P) lugar en el que se encuentran los ARN-t cargados con un pptido (peptidil-ARN-t). Las constantes de sedimentacin de cada subunidad, los tipos de ARN ribosmico (ARN-r) y las protenas ribosomales que forman parte de ambas subunidades en los ribosomas eucariticos y procariticos se indican en la siguiente tabla: ACTIVACIN DE LOS AMINOCIDO Y FORMACIN DE LOS COMPLEJOS DE TRANSFERENCIA
La activacin de los aminocidos para formar los complejos de transferencia es el paso previo necesario para que pueda comenzar la traduccin, y consiste en la unin de cada aminocido a su ARN-t especfico mediante la intervencin de un enzima, la aminoacil- ARN-t sintetasa y el aporte de energa del ATP.
aa 1 + ARN-t 1 + ATP ARN-t 1 -aa 1 + AMP + Ppi
La unin del aminocido al ARN-t tiene lugar por el extremo 3' del ARN-t. Todos los ARN-t en su extremo 3' contienen la secuencia 3' ACC 5'. Las aminoacil-ARN-t-sintetasas tienen tres sedes distintas, una para el reconocimiento del aminocido, otra para el ARN-t y otra para el ATP. Debe existir al menos una aminoacil-ARN-t- sintetasa diferente por cada ARN-t distinto. El ARN-t se une a la aminoacil-ARN-t-sintetasa a travs del lazo dihirouracilo (DHU).
Una vez activados los aminocidos y formados los complejos de transferencia (ARN-t cargados con el aminocido correspondiente) ya puede comenzar la sntesis de la cadena polipeptdica y la incorporacin de los aminocidos. En este proceso se pueden distinguir tres fases diferentes: Iniciacin de la cadena polipeptdica. Elongacin de la cadena polipeptdica. Terminacin de la cadena polipeptdica
Iniciacin de la cadena polipeptida.
En la iniciacin de la cadena polipeptdica intervienen el primer ARN-t, o ARN-t iniciador de la traduccin que habitualmente es el ARN-t- Formilmetionina, las subunidades ribosomales, el ARN-m, enzimas, los factores de iniciacin IF1, IF2 e IF3 y una fuente de energa como GTP. Las subunidades ribosomales estn separadas cuando no estn ocupadas en la sntesis de polipptidos. Para poder iniciar la traduccin es necesario que ambas subunidades se ensamblen.
ELONGACIN DE LA CADENA POLIPEPTDICA
Una vez formado el complejo de iniciacin se puede comenzar la elongacin del polipptido. La elongacin o crecimiento de la cadena polipeptdica tiene lugar en esencia mediante la formacin de enlaces pptdicos entre los aminocidos sucesivos. Intervienen en este proceso, el peptidil-ARN-t, los aminoacil-ARN-t, ribosomas, ARN-m, enzimas, factores proteicos de elongacin EF-Tu, EF-Ts y EF-G y fuentes de energa como GTP. Se pueden distinguir cuatro fases esenciales en el proceso de elongacin. Estas tres fases del proceso de elongacin se repiten tantas veces como aminocidos posea el poliptido sintetizado menos uno (excepto el primero, metionina) TERMINACIN DE LA CADENA POLIPEPTDICA
La terminacin de la cadena polipeptdica en bacterias tiene lugar cuando los ribosomas en su avance a lo largo del ARN-m se encuentran con cualquiera de los siguientes tripletes de terminacin o codones de fin: UAA, UAG y UGA. Adems, durante la terminacin intervienen los factores proteicos de terminacin RF1, RF2 y RF3. No hay ningn ARN-t que reconozca a los tripletes de terminacin, son los factores de terminacin o liberacin los que se encargan de reconocer los codones de STOP.
Evett, I.W; Weir, B.S. Interpreting DNA evidence. Sinauer, MA, USA; 1998. Stone, A.C; Starrs, J.E. Stoneking M. Mitochondrial DNA analysis of the presumptive remains of Jesse James. En: J Forensic Sci 2001;46:173-6. Stone, A.C; Stoneking, M. Analysis of ancient DNA from a prehistoric Amerindian cemetery. En: J Forensic Sci 1999;44:153-9 Molecular Biotechnology: principles and applications of recombinant DNA. 2003. B.R. Glick y J.J. Pasternak. 3 Edicin. ASM Press. Ingenieria genetica vol.I. Preparacion, analisis, manipulacion y clonaje de DNA. 2002. J. Perera, A. Tormo Garrido, J.L. Garcia. Ed. Sntesis. Gene Cloning and Manipulation. 1995. C. Howe. Cambridge University Press. Recombinant DNA. 1992. J.D. Watson, M. Gilman, J. Witkowski, M. Zoller. 2 Ed. Freeman. http://www.biophys.uni-duesseldorf.de/bionet/research_tools.html Pedros Molecular tools D. Aljanati, E. Wolovelsky, C. Tambussi. Los cdigos de la vida. Biologa III. Buenos Aires, Ediciones Colihue, 2005. http://www.uct.ac.za/microbiology/manualin.html Manual de tcnicas de manipulacin de cidos nucleicos Genoma Humano: http://www.er.doe.gov/production/ober/hug_top.html