TEMAS

Ncleo.
Nucleolo. Estructura y funcin.
Ciclo celular.

Ncleo
Organela limitada por la
envoltura nuclear.
Se encuentra en todas las
clulas eucariotas.
Aprox 10% vol celular.
Alberga casi todo el material
gentico de la clula.
Contiene:
cidos nuclicos (DNA y RNA)
protenas nucleares (histonas
y no histonas)

Centro de control.

Componentes estructurales

Ncleo
Funciones:
Lugar de duplicacin del
DNA.
Lugar de control
gentico de las
actividades celulares.
Lugar donde se inicia el
ensamblaje de los
ribosomas a partir de
RNA y protenas
especficas.

Apoptosis

Replicacin
y reparacin

Transcripcin
Empalme

Envoltura nuclear,
membrana externa se
continua con RE

Lamina nuclear es una malla de protena

filamentosa que reviste cara nuclear de
membrana interna

Complejo de poro
nuclear, penetra
envoltura nuclear en
puntos de fusin de m
interna y m externa

Composicin:

Organizacin del ncleo celular (mamfero)

Envoltura nuclear
Lmina nuclear
Matriz nuclear
Cromosomas
Cuerpos subnucleares:
Nucleolo

Composicin:

Organizacin del ncleo celular (mamfero)

Envoltura nuclear
Lmina nuclear
Matriz nuclear
Cromosomas
Cuerpos subnucleares:
Nucleolo
Cuerpos de Cajal (CB) y gemas
Dominios PIKA y PTF
Cuerpos PML
Manchas de empalme (splicing
speckles)
Manchas paralelas (paraspeckles)
o espacios intercromatina

Lanctt C et al. "Dynamic genome architecture in the nuclear space:regulation of gene expression in
three dimensions". Nature Reviews Genetics (2007) :8; 2. 104-115 .

Envoltura nuclear
Membrana externa nuclear
Membrana interna nuclear
Espacio intermembrana (1050nm)
Poros nucleares
-100nm dimetro total
-9nm dimetro del canal
-3 000 a 4 000 poros
-Complejo de poro nuclear (NPC)

Estructura del complejo de poro nuclear (NCP)

Complejo molecular de
simetra octogonal.
30 veces ms grande que
ribosoma.
Funcin: portero del
ncleo
media intercambio de
molculas entre
nucleoplasma y citoplasma.
-Iones y metabolitos
pequeos difunden a travs
del NCP.
-Molculas con masa
>40kDa requieren
transporte activo
(carioferinas).

Filamentos
citoplsmicos
Anillo
citoplsmico

Andamio

Canal central

Anillo nuclear

Canastilla
nuclear

Intercambio de molculas a travs del complejo de poro nuclear

10

Intercambio de molculas a travs del complejo de poro nuclear

Importacin de protenas:
protenas cargo contienen
secuencia especfica de aa
seal de localizacin nuclear
(NLS).
intervienen:
Ran (GDPGTP)
Factor de transporte nuclear 2
(NTF2)
Importina (se une a prot cargo)
Importina (interacta con
nucleoporinas-FG)

Exportacin de protenas,
tRNAs y subunidades
ribosomales:
contienen secuencia
especfica de aa seal de
exportacin nuclear (NES).
Contienen NLS si ha de
retornar al ncleo.
Intervienen:
Ran (GDPGTP)
Factor de transporte nuclear 2
(NTF2)
Exportina 1
Exportina-t (exporta tRNAs)

11

IMPORTACIN A TRAVES DEL PORO

NUCLEAR
4
3
5
9

8
6

12

EXPORTACIN A TRAVES DEL PORO

NUCLEAR
7

4
5

3
13

Estructura del complejo de poro nuclear (NCP)

Funciones:
Media el intercambio de molculas
entre el nucleoplasma y el
citoplasma.
Participa en la regulacin de la
arquitectura del genoma.
Participa en la regulacin de la
expresin gnica.

Raices M & D'Angelo M. Nuclear pore complex composition: a new regulator of tissue-specific and developmental functions.
Nature Reviews Molecular Cell Biology 13, 687-699 (November 2012)

14

Heterocromatina perifrica es
excluida desde el NCP
En mamferos, la nucleoporina
TPR se requiere para el
establecimiento de las zonas de
exclusin de heterocromatina
asociadas al poro nuclear
(+TPR).

15

NCP especializado en
transporte nuclear y
organizacin del genoma

16

Lamina nuclear
Malla protica delgada (2050nm).
Cubre cara nuclear de MIN.
Se relaciona con protenas
integrales especficas de MIN y
con cromatina.
Indispensable en
mantenimiento de integridad
estructural de envoltura nuclear.
Principales componentes:
-Lamina nuclear tipo A
-Lamina nuclear tipo B

17

Lamina nuclear: Laminopatas

Enfermedades humanas asociadas
con defectos en protenas de envoltura
nuclear.
-Distrofia muscular de Emery-Dreifuss
-Cardiomiopata dilatada
-Lipodistrofia parcial familiar
-Distrofia muscular cintura-extremidades
-Charcot-Marie-Tooth tipo 2
-Displasia mandibulo-acral
-Progeria

Mutacin ms comn en gen de

lamina tipo A (normalmente,mayora de
cells adultas la expresan).
18

Organizacin de la envoltura nuclear

Protenas de la membrana
interna nuclear:
-Polipptidos asociados a
lamina 1 y 2 (LAP1 y LAP2).
-LBR
-Sun1
-Sun2
Protenas reguladoras de
genes:
-HP1
-BAF
Protenas de la membrana
externa nuclear:
- Nesprin

ONM: membrana externa nuclear, INM: membrana interna nuclear , NCP: complejo de poro
nuclear, ER: retculo endoplasmico.

Stewart C et al. Blurring the boundary: the nuclear envelope extends its reach. Science (2007); 318:1408-1412.

19

Complejo LINC (unin de nucleoesqueleto con citoesqueleto)

Integra componentes
nucleares, incluyendo
dominios de cromatina,
con estructuras de la
superficie celular y
extracelulares (en clulas
de vertebrados).
Formado por:
Protena nesprina (m
externa nuclear).

Protenas SUN (m interna

nuclear).

Stewart C et al. Blurring the boundary: the nuclear envelope extends its reach. Science (2007); 318:1408-1412.

20

Nucleolo
rea dedicada a la
produccin de ribosomas.
Se forma alrededor de
repeticiones de DNA
ribosomal (rDNA), que
codifica RNA ribosomal.
NO est rodeado por
membrana.

21

Produccin de subunidades
ribosomales
1

1. Transcripcin de rRNA precursor

2. Empaquetamiento con protenas
ribosmicas citoplasmticas

3. Formacin de subunidades 40S y

60S

4. Salida de subunidades a travs

de poros nucleares

5. Ensamblaje ribosoma maduro

22

Cromatina, cromosoma
Cromatina: complejo fibroso formado por DNA y protenas.
(interfase)
Cromosoma: cromatina altamente condensada. (divisin
celular)

Cromatina condensada
cerca de envoltura
nuclear, se fija a lamina
nuclear

Cromatina difusa
23

Cromatina
Complejo fibroso formado
por DNA y protenas.

24

Territorio de los
cromosomas humanos
en el ncleo celular en
interfase

25

Cromatina
Eucromatina:
-DNA menos compacto
-porcin ms activa del genoma (genes frecuentemente
expresados).

Heterocromatina:
-DNA ms compacto.
-contiene DNA infrecuentemente transcrito.
-Tipos:
-Constitutiva: en estado condensado en toda clula y en todo
momento (DNA silencioso).

-Facultativa: cromatina especficamente inactivada durante ciertas

fases de la vida del organismo (cromosoma X inactivo).
26

Cromosoma eucaritico
Cromosoma eucaritico = molcula nica DNA ms protenas
asociadas.
DNA extendido de un cromosoma = 3-4cm.
Cada clula diploide tiene 46 cromosomas (2m de DNA
aprox.)
Cuerpo humano tiene 25 000 millones de kilmetros de DNA.

27

Fibra de cromatina ,
constiituida por DNA y
protenas

Cromosoma
humano

Cromosoma: cromatina
condensada, estructura
visible durante divisin
celular.

Centrmero, regin de
visible estrechamiento

28

Clasificacin de los
cromosomas por la
localizacin del
centrmero:
Metacntrico: centrmero
central.
Submetacntrico:
centrmero cerca del
centro.
Acrocntrico: centrmero
cerca al extremo.
Telocntrico: centrmero al
final de las cromtides.

29

 En cromosomas no metacntricos:
Brazo corto es denominado brazo p (petit).
Brazo largo es denominado brazo q

30

El centrmero ocupa posiciones

caractersticas en los cromosomas
homlogos

Cariotipo humano: 23 pares de cromosomas

(incluyendo cromosomas sexuales.

31

Estructura del cromosoma

Conjunto de DNA y protenas (cromatina = hebras teidas):
DNA (cargada negativamente).
Protenas histnicas y no histnicas.

32

Estructura del cromosoma

Histonas:
Slo en eucariotas
Ricas en aminocidos bsicos (lisina y arginina) cargadas
positivamente.
Se sintetizan en la fase S del ciclo celular.

33

Histonas:
Responsables del
plegamiento y
empaquetamiento del
DNA (nucleosoma).
Intervienen en
regulacin de genes.
Tipos:
H1 (30 millones de
molculas)
H2A (60 millones de
molculas)
H2B

H3

H4

34

35

 Nucleosoma:
146-150 pares de bases (bp) de DNA alrededor de
octmero de histonas.
Primer nivel de compactacin del genoma en
eucariotas.
DNA unido a nucleosoma es menos accesible a
factores reguladores que DNA libre de
nucleosoma. (Skipper M. Eucariotic genomes in complete control. Nat Rev Mol Cell Bio
2006 (7):709.

36

50 pares de bases

150 pares de bases

H2A

H2B

H3

H4 H4

H3

H2B

H2A

H1

Octmero de histona

H1
H1
H1

octmero
octmero
(80 pares
de base
por vuelta)

octmero
octmero
37

Ensamblaje de nucleosomas
H4
H3
H3
H4

Paso 1

H3 H4

H4 H3

DNA

Paso 2
X

H2A H2B

H2A H2B

H3 H4

H2A H2B

H3 H4 H4 H3

X
DNA

H4 H3

Paso 3

H2B H2A

DNA

38

Estructura del cromosoma

Protenas asociadas al DNA no histnicas:
N1
Nucleoplasmina
Protena x
Protenas de esqueleto o armazn protico

armazn
protico
no histnico
39

Armazn protico no histnico

40

Solenoide

2do nivel de empaquetamiento

1er nivel de empaquetamiento

41

42

Empaquetamiento

HISTONA H1 SE UNE A REGIONES

ESPECFICAS DEL NUCLEOSOMA

EMPAQUETAMIENTO DEL
NUCLEOSOMA ES MEDIADO
POR LA HISTONA H1

COLAS DE HISTONAS:
extremos NH2 y el extremo COOH (slo H2A)
intervienen en formacin de solenoide
43

Empaquetamiento del DNA en cromosoma mittico

Molcula de DNA se une a

histonas formando gran nmero
de nucleosomas.

Nucleosomas forman cuentas en

la cuerda de DNA.

Grupos de nucleosomas se
enrollan en vueltas cada vez ms
grandes hasta fibras de comatina
supercondensada y
superenrollada

Las vueltas se unen para formar

lazos.

Los lazos se enrollan mucho ms,

formando un cromosoma

44

CICLO CELULAR

45

Ciclo celular
Secuencia regular y repetitiva de
crecimiento y divisin celular.
Fases:
Interfase: proceso preparatorio

G1
S
G2
G0

Divisin celular:
Mitosis: divisin del ncleo.
Citocinesis: divisin del citoplasma.
46

47

Interfase

Durante la interfase:
Duplica su DNA.
Sintetiza histonas y otras protenas asoc a DNA.
Produce reserva adecuada de organelas para 2
clulas hijas.
Ensambla estructuras necesarias para divisin
celular.
48

Interfase
G1:
Actividad bioqumica
intensa.
Clula aumenta de
tamao.
Aumento de
protenas, lpidos y
organelas.
Centrosomas inician
separacin y
duplicacin

49

Interfase
G1:
Duracin variable, depende
del tipo de clula.
Algunas clulas ingresan a:

G0:
quiescente ?
Ausencia de seales para
mitosis
Represin activa de genes
necesarios para mitosis.
Re-ingreso depende de
seales internas y
externas.

50

Interfase
S:
Replicacin de DNA.
Sntesis de histonas
y otras protenas
asociadas a DNA.

51

Interfase
G2:
Preparativos finales
para divisin celular.
Inicia condensacin
de cromosomas
recin duplicados.
Duplicacin completa
de centrosomas.
Inicio de ensamblaje
de huso mittico

52

Ciclo celular de clula

eucariota

Divisin nuclear
(cariocinesis) ocurre en
mitosis.
Divisin de citoplasma
(citocinesis) ocurre al final de la
fase M.

Clulas que no se dividen

usualmente quedan
retenidas en fase G1

DNA es replicado durante la fase S

(entre fases G1 y G2)

53

54

Regulacin del ciclo celular

55

Regulacin del ciclo celular

Influyen en crecimiento y divisin celular:
Falta de nutrientes.
Cambios en T y pH.
Contacto con clulas vecinas (inhibicin dependiente de la
densidad).

Hormonas
Factores de crecimiento
Interaccin clula-clula
Interaccin clula matriz extracelular.

La clula decide si va a dividirse o no.

56

Regulacin del ciclo celular

Puntos de control del ciclo celular:

Punto de restriccin (punto R)

Punto de control en fase S
Punto de control en la fase G2
Punto de control en la fase M

57

Regulacin del ciclo celular

Puntos de control del ciclo celular
Punto de restriccin (punto R):
En fase G1 tarda
A veces antes de punto R, pasan de G1 a G0
Pasado el punto R la clula est obligada a seguir el
resto de las fases del ciclo y dividirse.

58

Regulacin del ciclo celular

Puntos de control del ciclo celular
Punto de control en la fase S:
Asegura que duplicacin slo ocurra una vez por
ciclo.
Evala dao de DNA y presencia de fragmentos de
Okasaki.

59

Regulacin del ciclo celular

Puntos de control del ciclo celular
Punto de control en la fase G2:
Clula evala si est lista para entrar en mitosis.

Mecanismo de seguridad, slo entra en mitosis si

ha duplicado correctamente su material gentico.
Evala dao de DNA.

60

Regulacin del ciclo celular

Puntos de control del ciclo celular
Punto de control en la fase M:
Durante metafase.

detecta fallas en unin de fibras del huso al

cinetocoro.

61

Regulacin del ciclo celular

Sistema de control de ciclo celular:
Ciclinas
Kinasas dependientes de ciclina (Cdk)
Complejo promotor de la anafase/ciclosoma
(APC/C)

62

63

Pone en marcha el mecanismo de la mitosis

Factor promotor de la fase M
ciclina
mittica

Control del
ciclo
celular

G2
Cdk

G1
S

ciclina D
P
La quinasa empieza a actuar
Pone en marcha el mecanismo de replicacin del DNA

64

Regulacin del ciclo celular

Kinasas dependientes de ciclina (Cdk):
Activan otras protenas por fosforilacin.
Se encuentran en niveles casi constantes
durante el ciclo celular.
En clulas eucariotas en todo el ciclo celular.
Tipos:
Cdk de G1 (Cdk4, Cdk6)
Cdk de Fase S (Cdk2)
Cdk de Fase M (Cdk1)
65

Regulacin del ciclo celular

Ciclinas:
Protenas activadoras que se unen a quinasas y
regulan su actividad.
Nivel vara a lo largo del ciclo celular.

Tipos:
Ciclinas de G1 (ciclina D)
Ciclinas de fase S (ciclinas E y A)

Ciclinas mitticas (ciclinas B y A).

66

Regulacin del ciclo celular

Ciclinas:
Ciclina mittica:
Se acumula gradualmente en fase G2.
Se une a quinasa formando el complejo Cdk-ciclina
(FPM).
Fosforila protenas especficas e induce cambios
estructurales que inducen mitosis:
Condensacin de cromosomas (fosforilacin H1).
Desensamblado de la envoltura nuclear.
Organizacin de los microtbulos en el huso mittico.

67

Regulacin del ciclo celular

Complejo promotor de anafase/ciclosoma
(APC/C):
En ncleo de clulas en interfase y en todo el
citoplasma durante divisin celular.

Degrada germinina (protena que protege DNA recin

sintetizado de re-replicacin).

Sin APC/C las clulas:

no podran separar sus cromtidas hermanas en anafase.
no podran salir de la mitosis y dividirse en dos clulas hijas.
No podran iniciar los pasos necesarios para la replicacin del
DNA en la fase S.
68

Ciclinas y kinasas
dependientes de
ciclinas (CDK)

69

Segregacin de cromosomas durante la mitosis

70

Ciclinas y kinasas dependientes de ciclina en el ciclo celular

Cdk1 inicia
mitosis

Seales mitognicas
estimulan sntesis
de ciclina D
Supresores tumorales
pueden bloquear
actividad de ciclina D

Ciclina D, ciclina
E, Cdk4 y Cdk2
fosforilan RB,
inactivndola

Cdk2 estimula
replicacin de DNA

Punto R debe ser pasado

para que contine el ciclo
celular
71

Regulacin del ciclo celular en neurona post mittica

Protenas que activan

ciclo celular.
Protenas que inhiben
ciclo celular.
72

73