Degradacin enzimtica

de biomasa
lignocelulsica

Composicion y estructura de los materiales lignocelulosicos:

Celulosa
Polisacrido lineal de composicin
simple de unidades D-glucosa
unidos por enlaces (1-4)
glicosdicos.
Cadenas de celulosa unidas por
enlaces de hidrgeno forman
microfibrillas amorfas o cristalinas
las cuales enredan o incrustan con
lignina y hemicelulosa formando una
estructura heterognea compleja.

Hemicelulosa
Son polisacridos heterogneos compuestos por diferentes
unidades de azcares.
Son clasificadas de acuerdo a los principales residuos de
azucares presentes en el esqueleto del polmero estructural
( xilosa, arabinosa, galactosa, manosa, glucosa y cido
glucurnico)

Lignina
es un polimero aromatico que
confiere fuerza a la pared
celular de la planta,
es un compuesto ramificado
altamente insoluble de
unidades sustituidas por
unidades de fenilpropano las
cuales estn unidos por
enlaces carbono carbono

Degradacion de celulosa

Accion de la celulasa con celulosa

Degradacion de hemicelulosa
(arabino o glucurono Xylan)

Lignina y enzimas deslignificantes

Las cadenas
alifticas de C,
enlaces C - C,
substituyentes aril
metoxi, grupos
fenoxilo son
preferentemente
modificados

Clasificacion
Se clasifican en 2 grandes grupos:
- CAZy: enzimas degradadoras de celulosa y
hemicelulosa, hidrolasas principalmente
- FOLy: enzimas degradadoras de lingina,
oxidorreductoras y enzimas auxiliares (LDAs
y EST)
*Carbohydrate-Active Enzymes
* Fungal Oxidative Lignin

Arquitectura
Glicosidasas:
- Poseen varios mdulos catalticos: Carbohidratebinding module (CBMs),dockerins entre otros dominios
- Bacterias anaerobias degradadoras de lignocelulosa
tienen su maquinaria enzimtica en el celulosoma.
- la estequiometra y vecindad de las enzimas,
sinergismo, capacidad de reconocer caractersticas
topolgicas del sustrato permiten que la degradacin
tenga un alto rendimiento.

Enzimologa
Utilizan 2
residuos
aminoacdicos
(Asp y Glu) para
su catlisis.

Alfa-amilasa, glucosidasa pancretica

Mecanismo de hidrlisis

Propiedades especiales
-

Mltiples subsitios en el centro activo

Naturaleza heterognea
Sinergia entre enzimas
Indispensabilidad de un blanco molecular,
funciones mediadoras provedas por CBMs
o aminocidos redox activos.

Celulasas y degradacin de celulosa

Enzimas que intervienen en la

degradacin de la lignocelulosa
Clasificacin CAZy:
Su criterio se basa en la secuencia de
monmeros presentes y en la estructura
tridimensional.

Los grupos son tres:

Glucsido hidrolasas

GH

Polisacrido liazas

PL

Carbohidrato esterasas

CEs

Clasificacin FOLy:

Ordena especficamente enzimas

oxidorreductasas ya que son las ms activas
en la degradacin de lignocelulosa.
CBMs.

Enzimas que llevan a cabo la

degradacin de hemicelulosa y
hemicelulasas.
Funcionalmente las hemicelulosas incluyen hidrolasas, esterasas
y liasas.
La mayora a de es estas enzimas son activas a un pH de entre 4
a 8 y temperatura de entre 40 a 70 C.

Nmero de familias de
enzimas involucradas
GH

29

PL

CE

CBMs

37

Endomanasas (Ems)

B-Manosidasa

alfa-L-Arabinofuranosidasa

Endo-1,5-alfa-arabinanasa

alfa- Glucuronidasa

Acetil xilano esterasa

Feruloil esterasa

Glucoronoil esterasa

Xiloglucano hidrolasa

Xiloglucano endo-transglycosilasa

alfa-galactosidasa

Endo-galactanasa

Exo-B-glucanasa

Endo-B-glucanasa

Poligalacturonan hidrolasas/ liasas

Enzima
Endomanasa

Abreviacin
EMs

Cdigo EC
3.2.1.78

Familia

Caracteristicas

GH5,26,113
Contienen uno o
ms sitios
catalticos

B-Manosidasa

BMs

3.2.1.25

GH1,2,5

Enzima

Abreviacin Codigo EC

Familia

Caractersticas

Acetil Xilano Esterasa

AXE

3.1.1.72

CE1,2,3,4,5,6,7,12

Rompe enlaces acetil ester

Feruloil Esterasa

FAE

3.1.1.73

CE1

Hidroliza el enlace ester del

hidroxicinamoil

Glucuronil Esterasa

GE

3.1.1.-

CE15

Hidroliza enlaces metil ester propios

del Xilano

FAE y AXE utilizan un sitio cataltico formado por

Ser-His-Asp adems de Zn+2 u otros iones.

La superfamilia xiloglucano transferasa/hidroasa (XTH) es

producida por hongos y plantas.

Los mdulos catalticos que corresponde a las XTH

pertenecen a la familia GH5,12,16,44 y 74

Las XTHs son de gran inters para la conversin de biomasa ya que asisten a
la actividad de las celulasas al degradar el xiloglucano que protege a la
celulosa.

Las enzimas pectinolticas como las poligalacturona hidrolasas/ liasas son

utilizadas en la transformacin del azcar de la biomasa

Degradacin de lignina
Son oxidoreductasas, las ms importantes son peroxidasas, fenol oxidasas y
oxidorreductasas. Estas enzimas atacan no solo a la lignina sino tambin a la celulosa,
se clasifican en dos grupos:
1) Peroxidasas (familias FOLy y LO2), incluyen:
a) peroxidasa de lignina (LiP, EC 1.11.1.14),
b) Mn peroxidasa ( EC 1.11.1.13),
c) peroxidasa verstil (VP, EC 1.11.1.16)

d) peroxidasa genrica (EC 1.11.1.7).

La degradacin de lignina se
da cuando las enzimas
extraen electrones de esta.

2) Peroxidasas (familias FOLy LO1), incluyen:

a) catecol oxidasa (EC 1.10.3.1)
b) lacasa (lac, EC 1.10.3.2).
i) Las lacasas tienen cuatro tomos de Cu como catalizador; Tipo1 es el

responsable de oxidar y reducir el substrato y los tipo2-tipo3 son

responsables de recoger electrones del tipo1 y reducir de O2 a H2O.
Esta degradacin se considera indirecta.

Potenciadores biolgicos y sintticos en a degradacin enzimtica de la

lignocelulosa

En la actualidad: