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Q.B.P.
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M A R I O RO Q U E A L O N S O
J O R GE KA RL O O V A L L E
Caractersticas Generales
Las enzimas de restriccin, tambin conocidas como
endonucleasas, son enzimas que cortan los enlaces
fosfodister del material gentico a partir de una
secuencia que reconocen. Las mismas permiten
cortar ADN de hebra doble, donde reconocen
secuencias palindrmicas (secuencias que se leen
igual en ambas direcciones).
Caractersticas Generales
Nomenclatura
1.
Origen Bacteriano
Sitio de Reconocimiento
EcoRI
Escherichia coli
5'GAATTC 3'CTTAAG
5'---G AATTC---3
3'---CTTAA G---5'
BamHI
Bacillus
amyloliquefaciens
5'GGATCC 3'CCTAGG
5'---G GATCC---3'
3'---CCTAG G---5'
DpnI*
Diplococcus
pneumoniae
Mapa de restriccin
Un patrn de ADN generado mediante electroforesis que se
Vectores de clonacin
Son molculas transportadoras que transfieren y replican fragmentos de ADN que
llevan insertados mediante tcnicas de ADN recombinante.
Para que sirva de vector, una molcula debe ser capaz de replicarse junto con el
fragmento de ADN que transporta. Tambin tiene que tener secuencias de
reconocimiento que permitan la insercin del fragmento de ADN a clonar.
Para insertar un fragmento de ADN al vector, se utiliza una enzima de restriccin, y
se mezcla con fragmentos de ADN producidos con la misma enzima.
Los vectores que transportan un fragmento insertado se denominan vectores
recombinantes.
Tipos de Vectores
bacterifago.
Fragmentar DNA genmico para separacin de
electroforesis y Southern Blot.
Generacin de fragmentos para ser usados como
sondas marcadas en Southern y Northern
blotting.
Generacin de fragmentos para ser subclonados en
los vectores apropiados, creacin de DNA
recombinante
en la secuencia de DNA
Desarrollo de protenas recombinantes