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HIV

Diagnostik und
Verlaufskontrolle
Referat

Klassifizierung
Familie der Retroviren
HIV-1 (Gruppe M,N,O; Subtypen A-K)
HIV-2 (Subtypen A-F)
in Europa/ USA: v. a. HIV-1 M:B

Herkunft
hnliche Viren bei Affen sehr
verbreitet (SIV)
Vor 70-80 Jahren bergang auf den
Menschen:
In Zentralafrika: HIV-1
In Westafrika: HIV-2
Durch Globalisierung weltweite
Ausbreitung v. a. des HIV-1

Allgemeines
bertragung durch Sexualkontakte,
Blut
Charakteristisch: lange
Inkubationszeit von 10-15 Jahren
Doppelinfektionen mit 2
verschiedenen Typen mglich
Im Verlauf evtl. Virusmutation
Anonymisierte Meldepflicht

Das Virus
Kapsid mit 2 linearen RNA-Genomen
Spike-tragende Auenhlle

Wirkungsweise
Hauptzielzelle: CD4-Lymphozyt
Auch: Makrophagen, Mikroglia
HIV-Oberflchenprotein gp120
interagiert mit Rezeptor und CoRezeptor, um in Zelle zu gelangen
RNA zur DNA revers transkribiert, ins
Zellgenom eingebaut
Vermehrung in Zelle Zerstrung
Absinken der CD4-Zellen <400/l
(Eliminierung durch CD8-Lymphozyten)

Testverfahren
Einverstndniserklrung des
Patienten ntig
Oberste Regel: Ausschluss von
Irrtmern im gesamten Arbeitsablauf
Bei reaktiver Probe:
IMMER 2. Blutprobe
abnehmen und erneut
kontrollieren

Test auf HIV-Antikrper


ELISA:
gentechnologisch hergestelltes Antigen aus
Virusstrukturkomponenten
Tests sollten alle HIV-1/-2-Subtypen
erfassen
3- 4 Wochen nach Infektion (lebenslang)
nachweisbare Antikrperbildung
positives Ergebnis wird mit alternativen
Methoden berprft (v. a. Western-Blot), da
evtl. Kreuzreaktion anderer Antikrper

Alternative Methoden
Western-Blot:
Elektrophorese der HIVStrukturproteine, dann wie ELISA mit
definierten Antigenen
Mindestzahl von Immunkomplexen
schliet unspezifische Kreuzreaktion
aus

Alternative Methoden
Radioimmunprzipitationsassay :
hnlich wie Western-Blot
Radioaktiv markierte HIVStrukturkomponenten werden mit
Antikrpern inkubiert
Przipitation, Dissoziation,
Elektrophorese, autoradiographische
Darstellung

Alternative Methoden
Indirekte Immunfluoreszenz:
charakteristische Fluoreszenzmuster
von an infizierte Zellen gebundenen
Antikrpern

Alternative Methoden
Liquorprobe:
Antigen-Antikrper-Reaktion im
Vergleich zum Plasma
Wenn reaktive Banden sichtbar:
intrathekale Antikrperproduktion
Folge einer zustzlichen ZNSInfektion mit HIV

Test auf HIV-Antigene


Separater Test auf alle
Strukturproteine des HIV
Positiv: wenn Reaktion mit gp120
oder gp41 und min. einem weiteren
Strukturprotein
Kontrolle mit 2. Blutprobe
Besttigt seropositiv: HIV-Trger
3-6 Wochen nach Infektion Antigene
im Serum nachweisbar

Test auf HIV-Antigene


Messung des p24-Antigens
(Hauptkomponente der inneren
Viruskapsel)
Bis zu 10 Tage frher positiv als
Antikrpertest
Nur im Einzelfall durchgefhrt
(Kosten-Nutzen-Analyse)

Virusisolierung
aus EDTA-Blut, Plasma, isolierten
Lymphozyten, mononukleren Zellen
Dauer: ca. 6 Wochen
Nicht fr Routinemessung
Bestimmung des Infektionstiters ber
freigesetztes p24-Antigen
Hinweis zur Prognose

Molekularbiologische Verfahren
Bestimmung der Virmie mittels HIVRNA im Plasma
Der quantitativen HIV-AntigenMessung berlegen
Auerordentlich hohe Sensitivitt und
Spezifitt
PCR hat sich durchgesetzt
Nachteil: relativ teuer

Molekularbiologische Verfahren
PCR:
Untere Nachweisgrenze: 200
Virusquivalente/ l
HIV-RNA bereits 1-2 Wochen nach
Infektion im Plasma nachweisbar
Prognostisch ungnstig: > 10000
Genomkopien

Molekularbiologische Verfahren
Genotypisierung:
cDNA-Sequenzierung des HIVStammes, wenn
Verdacht auf therapieresistente
Variation des Virus
Virmieanstieg unter Therapie
Therapiewechsel

Virmie (Viruslast)
Klassifizierung nach der HIV-RNAPlasmakonzentration:
Risiko einer Progression bei
>100000 Kopien/ml ist 12x so hoch
wie bei <10000/ml
Non-Progressor: <10000/ml, kein
Therapieeinstieg ntig
AIDS-Vollbild: >1000000/ml

Virmie (Viruslast)
Therapie-/Verlaufskontrolle: Absinken
der HIV-Replikation unter
Nachweisgrenze ist Therapieziel
Menge der HIV-RNA im Plasma
korreliert mit Krankheitsprogression &
berlebenszeit
Virmie ist entscheidender
Prognosefaktor

CD4-Zellzahl
Wichtig fr Prognose, der Virmie
jedoch deutlich unterlegen
Gibt Auskunft ber Ausma des
Immundefekts:
>400/l: AIDS-definierende
Erkrankungen selten
<200/l: sehr hohes Risiko

Verlaufskontrollen
Blutbild
HIV-Serologie (anti-p24-Antikrper,
p24-Antigen)
Lymphozytentypisierung (CD4/ CD8)
Quotient CD4-/ CD8-Zellzahl
2-Mikroglobulin
Evtl.Serumspiegel der antiretroviralen
Medikamente

Verlaufskontrollen
HIV-RNA-Bestimmung alle 3-4
Monate fr Prognose/
Therapiekontrolle
Wenn Therapieentschluss: auch
unmittelbar vor Beginn, nach 4
Wochen, alle 3 Monate
Therapieeffekt an Zunahme der CD4Zellen und Rckgang der Viruslast
feststellbar

Ungnstige Prognose
Erhhte Viruslast (>10000 Kopien/ml)
bei 1. Untersuchung
Anstieg der Viruslast, Persistenz bei
>10000 Kopien/ml
Abfall der CD4-Zellzahl
Anstieg des 2-Mikroglobulin
Progression des klinischen Stagings
Spter Therapiebeginn

Fragen
Welche Testverfahren werden beim
HIV-Screening angewendet?
DNA-Sequenzierung
Test auf HIV-Antikrper
Virusisolierung
Test auf HIV-Antigen
Urinsediment

Fragen
Alternativ durchfhrbare
Methoden der HIV-Diagnostik sind?
Radioimmunprzipitationsassay
Indirekte Immunfluoreszenz
Liquordiagnostik
Test auf occultes Blut im Stuhl
ELISA auf HIV-Antikrper

Fragen
Wichtige Marker zur Prognose der
HIV-Infektion sind?
CD4-Zellzahl
Thrombozytenzahl
Hmoglobin
Glucose im Urin
Virmie

Quellen
Thomas, Lothar: Labor und Diagnose, 7.
Auflage, TH-Books
Husstedt, I. W. (Hrsg.): HIV & AIDS,
Springer
Hirschel, Bernhard: AIDS- Diagnose,
Betreuung, Behandlung, 2. Auflage, Hans
Huber
Renz, Harald: Praktische Labordiagnostik,
de Gruyter
Herold, Gerd: Innere Medizin 2011

Vielen Dank fr eure


Aufmerksamkeit!