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ANALISIS E INTERPRETACIN DE LAS ALARMAS,

DISPERSOGRAMAS E HISTOGRAMAS
Analizador Hematolgico BC-5800

Lic. TM Javier Quiroz Castillo


Aplicaciones / Marketing

Familia de
Productos
Mindray

Oficinas
Shenzhen,
P.R.China
Ingresos:
547.5 Mill. USD
(2008)
Empleados:
5580
Posicionamiento
de Mercado:
Mayor compaa
China en
2

Familia de Analizadores
Hematolgicos

Imagen del BC5800

5 diferenciales, 29 parametros
Hasta 90 muestras por hora
Laser scatter + Chemical dye +
Flow cytometry technology
Canal independiente y mtodo optico
para la medicin de Basfilos
Powerful capability to flag abnormal cells
Optional autoloader, barcode scanner
Large TFT touch screen
Large storage capacity: up to 40,000 samples
Recommended or customizable decision rules
for re-exam abnormal samples
Support uni- or bi-directional LIS

Estudio de Clulas Sanguneas


Neutro

RBC

Eos

Mono
PLT
Baso
Lymph

Tecnologa 3 diff?

Secuencia normal de
Tamao
Despus de los
Lisantes

Tecnologa 5 diff?
Cinco grupos Leucocitarios

Lymphocyte
30%
Monocyte
8%

25 ~

Neutrophil
~70%

50

Basophil
1%

Eosinophil

0.5

Similitudes y diferencias

Gran ncleo que


ocupa casi toda la
clula

Ms citoplasma que el
linfocito

Grnulos
pequeos,
ncleo
multilobular
Grnulos
grandes y
oscuros; ncleo
lobulado

Grnulos
grandes
rojo/naranja;
ncleo prpura
bilobulado

Estructura simple y diferente Estructura compleja y


tamao
tamao medio

Diferenciacin de Leucocitos
5 Diff.
Existen 5 diferentes tipos de Leucocitos ( WBC)
Lymphocyte

Tamao pequeo,
gran ncleo con
relacin a
citoplasma, el
mayor
constituyente del
sistema inmune.

Monocyte

Grande, citoplasma
sin grnulos,
interviene en la
ingestin de
partculas extraas,
como bacterias o
parsitos.

Neutrophil

Grnulos en
citoplasma de color
rosado, marcador de
etapa aguda de la
inflamacin.

Eosinophil

Grnulos de color
naranja, gruesos ,
relacionados con
infecciones
parasitarias.

Basophil

Menos comn de
todos, grnulos de
color azul oscuro,
relacionados con
infecciones
micticas.

Granulocitos

LYM

MON

NEU

EOS

BAS

WBC: White Blood Cell


Tamao

Combinacin de Tamao y
Complejidad

A
B

Complejidad, grnularidad (vacuolas,


artefactos)

Cmo Diferenciar los Diferentes


Tipos de Leucocitos?
Utilizando sus diferentes caractersticas, TAMAO Y
COMPLEJIDAD CELULAR
Para eso utilizaremos cuatro tecnologas combinadas:
Citometra de Flujo
Dispersin de Laser
Tincin Citoqumica
Impedancia Elctrica

Aplicaciones / Marketing

Tecnologa
Avanzada

WBC 5-diff technology

Dispersin
de laser

Tincin
citoqumica

Citometra de flujo

WBC Tecnologa
Citometra de Flujo
Celulas inyectadas en una
cmara de flujo que esta
localizado en el paso ptico de
una fuente de luz, usualmente un
laser.
La cmara de flujo contiene un
lquido que fluye rapidamente : el
fluido envolvente que lleva la
muestra a alta velocidad por el
paso de luz.
Las clulas mantienen su
orientacin y posicin en el fluido
debido a que obedecen las
caracterstricas del flujo laminar y
atraviesan en fila de uno el paso
ptico.

WBC Tecnologa
La dispersin de Luz ocurre
cuando la partcula reflacta la
luz que incide sobre ella, esto
depende de las caractersticas
fsicas de la partcula.

Dispersin de Luz Laser

-Forward scatter (FS): Tamao


-Side scatter (SS): Complejidad

1 - 5
6 - 20

Dispersin de Laser de ngulo Mltiple


Dispersin de
ngulo mayor
(MAS)8~20
Granularidad
(Complex)

1 Muestra
2 Laser
3 Lentes

Dispersin de
ngulo Menor
(LAS)2~5
Volumen

Teora de Mie
En clulas diferentes de diferente tamao
(Monoc. y Linf.)
El ngulo bajo las diferencia por tamao
Laser
LAS

Teora de Mie
En clulas diferentes pero del mismo tamao (granulocitos)
ngulo mayor refleja la complejidad celular

Laser

MAS

WBC Tecnologa
Tincin Qumica
LEO I

LEO
II

EOS

Otros
WBC

RBC

Cmara de diferencial

WBC technology
Chemical dye
LBA
BASO

other
WBC

RBC
BASO Channel

BASO scattergram
WBC/Baso

WBC

BAS# can be calculated according to BAS%


WBC total result is counted in BASO channel

BAS%

5 part result
Finally
DIFF Bath

NEU%

LYM%

MON%

BASO Bath

EOS%

BAS%

*
NEU#

LYM#

MON#

EOS#

WBC

BAS#

DISPERSOGRAMA / SCATTERGRAMA

DEFINICI
N
Grfico estadstico que
representa
la
distribucin
de
dos
variables
en
una
muestra. Una variable se
representa grficamente
en el eje vertical; la otra
en el horizontal. Un
dispersograma
demuestra el grado o
tendencia
de
presentacin
de
las
variables en relacin
mutua.
Aplicaciones / Marketing

INTERPRETACIN DEL
DISPERSOGRAMA
Neu
Mon

Lymph

Ghost

FS : Frontal Scatter / Dispersin Frontal /


Informacin sobre el Tamao celular
SS : Side Scatter / Dispersin Lateral / Informacin
sobre Complejidad Celular
Aplicaciones / Marketing

Entendiendo el Dispersograma
Normal

Dispersograma de una muestra


NORMAL

Dispersograma de una muestra normal


Neu
Mono
Eos
Lymph
RBC
Ghost

Baso
4 Parts

Dispersograma BASO
1. The 4 parts except BASO should be close to the lower left
corner.
2. The profile of lower part should be smooth, not cut by a
straight line.

DIFF
Grande

Neutro es complejo y
grande
Mono es ms
grande que el Linfo

Estructura interna del


Linfo es mas simple
que la del EOS.
Pequeo

Estructura simple

Estructura compleja

BASO
Grande

Baso mantiene su
mismo tamao

Lymph
Neutro
Eos
Mono
Disminuyen
grandemente
Pequeo

Estructura simple

Estructura compleja

Dispersograma Anormal y Su
Significado

Muestras Anormales:
Banderas
Left Shift
LIC

Mon
ALY

Lym

ALY
NRbc
Ghost

Dispersograma de una muestra


ANORMAL

Leucopoenia

Lymphocytosis

Eosinophilia

Neutrophilia

Monocytosis

Dispersograma de una muestra


ANORMAL

ATL

Left shift

LIC

Lyse resistant

Dispersograma
Anormal
Mov Izq.

LIC

Dispersograma Anormal

ALY

Ganancia inadecuada

Ganancia
baja

Ganancia
alta

Celda de flujo sucia o con


cogulos

DEFINICIN

Seal por
medio de la
cual se
informa sobre
la presencia
real o
inminente de
una amenaza,
aviso de la
probabilidad

ALARMA

Aplicaciones / Marketing

SISTEMA DE ALARMAS
2.
Bander
as
1.
Lmite
Excedid
o
3.
Se Requiere
Confirmacin
Microscpica

Por qu se requiere
confirmacin
En estado patolgico las
clulas alteran sus
microscpica?
RUO

Atypical
Lymphocytes (#,%)

caractersticas celulares
normales
Tamao : clulas
activadas son mas
grandes
Complejidad : Clulas
activadas desarrollanAplicaciones / Marketing

Large Immature
Cell (#,%)

Como consecuencia de
esto las clulas no se
encontraran
en
las
zonas
donde
normalmente
se
ubicaban. Y es posible
que las poblaciones se
superpongan
no
permitiendo asi una
identificacin definitiva.
Las posibilidades son
variadas
3565
4060
4170

Superposicin de
poblaciones

35

65

no
concuerda
con el
resultado
del
analizador?
Recordar que en
raras ocasiones la
lectura
microscpica hecha
por dos operadores
diferentes coincide
completamente

Diferencia de mtodo,
recordar que el analizador
cuenta miles de clulas y el
observador 100.
Extensin de la muestra, de
la aguja, o del tubo?
Fragilidad de los eosinfilos
Tcnica de lectura (incluyo
los extremos?)
Alteraciones debido a la
preparacin del colorante.
Densidad de la muestra.
Velocidad del extendido.

HISTOGRAMAS, EL
PRINCIPIO DE
COULTER
Luego de producida la accin
del lisante las clulas son
medidas y contadas por el
mtodo de impedancia
(recordar que por el principio
de Coulter el nmero de
pulsos producidos por el paso
de una partcula con carga de
una solucin a otra conectas y
unidas mediante un
registrador de voltaje equivale
al nmero de partculas que se
desplazan de una solucin a
otra, y la duracin del pulso es
directamente proporcional al
volumen de la partcula.)

HISTOGRAMAS
En estadstica, es la
representacin grfica
de una variable, en
forma de barras,
donde la altura de
cada barra es
proporcional a la
frecuencia de los
valores representados.
En el eje vertical se
presentan las
frecuencias.
En el eje horizontal se
presentan los valores
de las variables

HISTOGRAMAS

El histograma es un grafico
construido mediante la
representacin de dos
variables:

a.- Volumen de la partcula,


en el eje X (Horizontal), en
femtolitros
b.- Nmero de partculas, eje
Y (Vertical)
El analizador presenta 3
histogramas
WBC, Baso
Glbulos Rojos
Plaquetas
El analizador separa los
pulsos en umbrales y
canales.

HISTOGRAMAS

Traduccin de los pulsos en un Histograma

HISTOGRAMAS

Curva de datos primarios

HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Observe que la distribucin de
la poblacin no es simtrica,
esto es normal debido a que
las plaquetas son restos
celulares de forma y tamao
variable, una plaqueta joven
es de mayor tamao que una
senescente, si bien el lmite
aceptado para una plaqueta
normal son 12 fl. Eso quiere
decir que el promedio de la
poblacin (el pico) debera
encontrarse siempre al lado
izquierdo de la flecha, como
se observa en el grfico.

PLT series
Histogram

PCT
MPV

PDW

PLT

10000

MPV

Un grfico que siga la lnea


roja debe interpretarse como
HISTOGRAMA
DE PLAQUETAS
posible
agregacin
plaquetaria (el origen intra o
extravascular de la misma no
puede determinarse) o con
un aumento en el nmero de
plaquetas
grandes,
fragmentos
celulares
(membranas
de
glbulos
rojos)
Un grfico que siga la lnea
verde
debe
interpretarse
como interferencia producida
por microcitosis marcada,
glbulos rojos de menos de
30 fl.(recordar que tanto
plaquetas
como
glbulos
rojos
se
miden
por
impedancia en una misma
cmara
y
de
manera

HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Una agregacin
plaquetaria lleva consigo
una disminucin en el
nmero de plaquetas (2 o
ms plaquetas agregadas
son contadas como una
de mayor tamao).
Por lo tanto cada vez que
se encuentre una
alteracin en la forma del
histograma de plaquetas,
debe investigarse
microscpicamente la
muestra en busca de
agregacin plaquetaria.

PLT series
P-LCC/P-LCR

S2 representa el nmero de plaquetas grandes, y S1+S2


representa el recuento total de plaquetas
P-LCC

PLT

P-LCR

P-LCC y P-LCR estan relacionados.


P-LCC Platelets-Large Cells Count
P-LCR Platelets-Large Cells Ratio

P-LCC

PLT

P-LCR

PLT: Platelet
Clinical application
PLT

P-LCR

Clinical Cases

Normal (100300*109/L)

Normal (1145%)

~
Increased platelet
destruction
Reactive thrombocytosis

~
~

Thalassanemia
Platelet dysplasia

HISTOGRAMA DE
GLOBULOS ROJOS
El Histograma de Glbulos Rojos se
aprecia como una distribucin
cercana a la normal.
Observe la distribucin casi
simtrica de la poblacin con el
pico de la poblacin cercana a los
87 fl. Observe adems que existen
hemates debajo de los 50 fl. Y
encima de los 100 fl.
El ancho de base de la campana
representa el nivel de variabilidad
de la poblacin,
(Anisocitosis/poiquilocitosis)
La posicin de la campana sobre el
eje horizontal representa la
tendencia Micro, Normo o
Macroctica de la poblacin.

Case Presentation

Normal people, the


RBC histogram shape
is in perfect Gaussian
distribution.

Dimorphologic RBC
histogram, indicating
anisocytosis. From a
rectal cancer patient

Microcytosis, the RBC


dominant peak moves
to left. From a 34-year
old outpatient.

Dimorphologic RBC
histogram. From a
recovery of Irondeficiency anemia
treatment patient.

4 channels for BC5800

5 reagents in 4 channel
LEO
II

LBA

LYM
MON
NEU
EOS
BAS
WBC

BASO
Channel

Diluen
t
Aperture

RBC
Channel

HGB
HGB

Impedan
Impedan
ce
ce

HGB
Channel

Colorime
Colorime
try
try

LH
LH Lyse

RBC
RBC
PLTPLT

Scattergram

DIFF
Channel

Laser
Laser Scatter
Scatter

Flow
Flow Cytometry
Cytometry

Sample
Rotatory
Valve

LEO
I

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