CITOESQUELETO

citoesqueleto
Sistema integrado que gera, transmite e sente
eventos mecnicos em uma variedade de funes
celulares
A clula capaz de reagir integralmente a condies
intrnsecas
e
extrnsecas
pela
coordenao
dependente de foras diretas e distribudas pelo
citoesqueleto
Nos tecidos protenas transmembranares
(integrinas) e junes transmitem a informao de
clula a clula e de clula a matriz extracelular

 Importncia Evolutiva

Alimentao (Fagocitose e pinocitose)

Sustentao

Organizao intracelular

Forma

Transporte intracelular (organelas e vesculas)

Comunicao

Diviso celular (Fuso mittico e anel contrtil)

Adeso celular

Movimento (migrao, msculo, clio e flagelo)

 Filamentos de Actina (microfilamentos)

formado por 2 filamentos torcidos com 5-9 nm
que se agrupam em feixes localizados
principalmente no crtex celular prximo
membrana. Determina a forma e movimento da
clula.
Microtbulos estruturas longas e cilndricas
e um dimetro externo de 25 nm. So mais
rgidos que a actina e possuem uma
extremidade associada a um centrossoma
(centro
organizador
de
microtbuluos).
Determinam o posicionamento das organelas e
transporte interno.
Filamentos intermedirios so fibras com
um dimetro mdio de 10 nm formadas por
uma grande famlia de protenas heterogneas.
Esto espalhados por todo o citoplasma,
conferindo resistncia mecnica s clulas

 Actina e Tubulina so altamente conservadas

Tubulina de levedura e mamferos 75% de homologia

Mamferos 6 isoformas com localizao e funo distintas,

codificada por diferentes genes muito similares.

Actina

de levedura e de Drosophyla - 89% de homologia

Vrias

protenas diferentes so capazes de se ligar e interagir com os

filamentos de actina e microtbulos

Estrutura do filamento de actina

(A) Microscopia eletnica de filamentos

de actina contrastados negativamente.
Molecular Biology of the Cell. Alberts et al

Esquema dos monmeros e do filamento de actina

Molecular Biology of the Cell. Alberts et al

Molecular Biology of the Cell. Alberts et al

Figure 18-11. The three phases of G-actin polymerization in vitro. (a) During the initial nucleation phase, ATP G-actin monomers (pink) slowly form
stable complexes of actin (purple). These nuclei are more rapidly elongated in the second phase by addition of subunits to both ends of the filament. In the
third phase, the ends of actin filaments are in a steady state with monomeric ATP G-actin. After their incorporation into a filament, subunits slowly
hydrolyze ATP and become stable ADP F-actin (white). Note that the ATP-binding clefts (black triangles) of all the subunits are oriented in the same
direction in F-actin. (b) Time course of the in vitro polymerization reaction (pink curve) reveals the initial lag period. If some actin filament fragments are
added at the start of the reaction to act as nuclei, elongation proceeds immediately without any lag period (purple curve).

Nucleao dos filamentos de actina

- Normalmente na Membrana Plasmtica - Determina forma e movimento

- Projees celulares microvilosidades, filipdios e

lamelipdios

Distribuio dos filamentos de actina

Rede de actina abaixo da membrana plasmtica
de uma clula animal observada em microscopia
eletrnica pela tcnica de deep etch

Molecular Biology of the Cell. Alberts et al

 Como o mesmo filamento pode se organizar em diferentes arranjos?

Os filamentos de citoesqueleto nunca trabalham sozinhos

 Protenas acessrias Funes:

Permitem que um mesmo filamento participe
diferentes funes em diferentes regies da clula

de

Regulam a velocidade e a extenso da polimerizao

Produzem fora e movimento direcionado ao longo do
filamento hidrolisando ATP
Regulam a distribuio espacial e o comportamento
dinmico dos filamentos
Permitem uma estrutura altamente organizada, mas
flexvel
Permitem a interao com outras estruturas

Vdeos 16.6 / 16.4 /16.8 / 16.10

Protenas que se ligam actina

-Protenas empacotadoras
- Protenas formadoras de gel
- Protenas motoras mltiplos tipos de miosina

Regulam os filamentos de actina

-Comprimento
- Estabilidade
- Nmero
- Geometria da ligao

Contatos Focais

- Fibroblasto em cultura separado do substrato por

50 nm e nas regies de contato por 10 nm

Vdeo 25.2

Especializaes de Membrana

Microvilosidades:
prolongamentos
da
membrana
plasmtica que aumentam a superfcie de absoro das
clulas; contm glicoclice desenvolvido e filamentos de
actina, que do sustentao. Encontradas nas clulas
epiteliais do intestino delgado e rim.

Microvilosidades
Calcula-se cada clula epitelial possua em mdia 3.000 microvilosidades.
Como conseqncia, h um aumento aprecivel da superfcie da
membrana em contato com o alimento. Isso permite, por exemplo, uma
absoro muito mais eficiente do alimento ingerido.

Especializaes de Membrana

Estereoclios: prolongamentos da superfcie celular; no

possuem mobilidade; aumentam a superfcie de absoro
das clulas, facilitando o transporte de gua e molculas.
So encontradas em clulas epiteliais do epiddimo e
ductos do aparelho genital masculino, e em clulas do
ouvido interno.

Vdeo 11.2

 Microtbulos

Vdeo 16.1

Figure 16-27. The interphase array of microtubules in

a cultured fibroblast. The microtubules (green) are
stained with an antibody to tubulin; the cell nucleus
(blue) is stained with a fluorescent DNA-binding dye.
(Courtesy of Nancy L. Kedersha.)

 Centro Organizador dos Microtbulos

tubulina que forma complexo de anis que servem como molde

para os 13 protofilamentos

Centrossomo maioria das clulas animais

Localizao prxima ao ncleo

Matriz fibrosa de protenas

1 par de centrolos que organiza a matriz e se duplica na intrfase e

migra para depois formar o fuso

Vdeo 16.3

 Protenas acessrias

Statimina se liga ao dmero, diminuindo a disponibilidade para

polimerizao

MAPs (estabilidade, regulao, interao e distribuio)

TAU

XMAP215 ubqua fosforilao e mitose

Catastrofina

tubulina

MAPs- protenas associadas a microtbulos

Verde- distribuio
da MAP TAU nos
axnios
Laranja- MAP2 no
corpo
celular
e
dendritos

Protenas Motoras

Vdeo 16.7

OS MICROTBULOS FORMAM TRILHOS POR

ONDE VESCULAS E ORGANELAS PODEM
CIRCULAR

Figure 13-34. The endocytic pathway from the plasma

membrane to lysosomes. Transport from early to the late
endosome is mediated by large endosomal carrier vesicles,
which contain large amounts of invaginated membrane and
are therefore called multivesicular bodies. It is uncertain
whether they should be regarded as middle-aged
endosomes moving toward the cell interior as they mature
or as distinct transport compartments. The movement
occurs along microtubules and can be experimentally
blocked
with
microtubule-depolymerizing
drugs.
Eventually, the late endosome is thought to convert into a
lysosome. Transport vesicles recycle material between the
early endosome and the cell surface, while a different set of
transport vesicles recycle material between the late
endosome and the trans Golgi network.

Centrossomo
Microtbulos
R.E.
Golgi
Ncleo

B- clulas tratadas
com anticorpos que
reconhecem o RE e
microtbulos;
C- clulas tratadas
com anticorpos que
reconhecem Golgi e
microtbulos

Vdeos 16.5 / 16.2

Orientation of cellular microtubules

Vdeos 18.2 / 18.4 / 18.5

Drogas que inibem tubulina

Taxol se une aos microtbulos e impede a despolimerizao da tubulina
Colchicina, vinblastina e vincristina se ligam tubulina pela extremidade +,
evitando a agregao dos microtbulos

Figure 19-16. Structures of colchicine and taxol. These

and other drugs that interfere with normal assembly and
disassembly of microtubules have an antimitotic effect that
is particularly devastating to rapidly dividing cells, such as
cancer cells.

Figure 19-26. A general model for kinesin- and dynein-mediated transport in a typical cell. The array of
microtubules, with their (+) ends pointing toward the cell periphery, radiates from an MTOC in the Golgi
region. Kinesin-dependent anterograde transport conveys mitochondria (carried by KIF1B), lysosomes, and an
assortment of membrane vesicles to the endoplasmic reticulum (ER) or cell periphery. Cytosolic dynein
dependent retrograde transport conveys elements of the ER, late endosomes, and lysosomes to the cell center.
[Adapted from N. Hirokawa, 1998, Science 279:519.]

Especializaes da Membrana
Clios e Flagelos
Os clios e flagelos so flexveis prolongamentos da membrana celular, que
variam de comprimento, sendo responsveis pelo movimento de clulas como o
espermatozide e organismos unicelulares como o Paramecium.
Essas estruturas so construdas a partir de microtbulos, protenas motoras
(dinenas) e outras protenas acessrias.
As dinenas do axonema provocam o deslizamento entre os microtbulos atravs
da hidrlise de ATP, proporcionando os batimentos ciliares e flagelares.

Clios
e
flagelos
so
constitudos por estrutra
denominada
axonema,
constituda de nove duplas
de microtbulos dispostos
circularmente
e
dois
microtbulos
centrais.
Molculas de dinena ciliar
formam pontes entre os
pares de microtbulos.
9 PARES DE MICROTBULOS PERIFRICOS
(13 + 11 SUBUNIDADES)
+ 1 PAR CENTRAL (13+13 SUBUNIDADES)

O axonema fixado por corpos basais superfcie celular, que apresenta forma
semelhante ao centrolo e funciona como um ncleo de montagem de clios e
microtbulos flagelares.

CENTROLOS E CORPSCULO BASAL

9 TRIPLETS (TRIOS) DE MICROTBULOS
PERIFRICOS
(11+13 + 11 SUBUNIDADES)
SEM PAR CENTRAL

 Filamentos Intermedirios

Encontrado em alguns metazorios (vertebrados,

nematodos e moluscos)

Importncia para suportar estresse mecnico

No ocorre em todos os tipos celulares

Diferentes famlias expressa em diferentes tipos celulares

Localizao rede que envolve o ncleo indo at a periferia onde

interage com a membrana

mais proeminente nas clulas que esto

sujeitas a estresse mecnico

Presente em grande nmero no epitlio,

onde participam das junes celulares; ao
longo dos axnios das clulas nervosas e
em todos os tipos de clulas musculares

Clula epitelial em cultura marcada com anticorpo contra queratina

famlias diferentes expressas em diferentes tipos celulares

 Tipos de Filamentos Intermedirios

1) Queratina 20 tipos diferentes expresso nas clulas

epiteliais humanas (10 especficas para cabelo e unha)
-Diagnstico da origem de cncer epitelial escolha de
tratamento
- Mutao doenas humanas
Ex. Epidermlise bullosa simplex

2) Laminas Nucleares protenas filamentosas que formam uma

rede abaixo da membrana interna nuclear. Ancoragem de
cromossomos e poros nucleares

3) Neurofilamentos durante o crescimento do axnio novos

filamentos
so
adicionados.
O
nvel
de
expresso
de
neurofilamentos parece controlar diretamente o dimetro do axnio
(relacionado com a velocidade do sinal eltrico)

Doenas Neurodegenerativas- Ex.: esclerose amiotrfica lateral

(Lou Gehrigs) associada ao acmulo e formao anormal de
neurofilamentos no corpo do axnio (transporte neuronal e atrofia
muscular)

Electron micrographs of two types of intermediate filaments in cells of the nervous system. (A)
Freeze-etch image of neurofilaments in a nerve cell axon, showing the extensive cross-linking through
protein cross-bridges - an arrangement believed to provide great tensile strength in this long cell
process. The cross-links are formed by the long, nonhelical extensions at the carboxyl terminus of the
largest neurofilament protein. (B) Freeze-etch image of glial filaments in glial cells illustrating that
these filaments are smooth and have few cross-bridges. (C) Conventional electron micrograph of a
cross-section of an axon showing the regular side-to-side spacing of the neurofilaments, which greatly
outnumber the microtubules. (A and B, courtesy of Nobutaka Hirokawa; C, courtesy of John Hopkins.)

4) Vimentina
Desmina- expressa em msculo cardaco, liso e esqueltico

Classificao funcional das junes celulares

Junes compactas (somente em vertebrados)

Junes
bloqueadoras ou
oclusivas

Junes de
ancoramento

Junes
comunicantes

Junes septadas (somente em invertebrados)

Stio de ligao de
filamentos de actina

Junes aderentes

Stio de ligao de
filamentos intermedirios

Desmossomos

Adeses focais

Hemidesmossomos

Junes do tipo fenda

Plasmodesmata (somente em plantas)

Junes bloqueadoras ou oclusivas

atuam como uma barreira de permeabilidade seletiva, separando
os fluidos com composio qumica diferente em cada lado.
Junes compactas (em vertebrados) - formadas
principalmente por protenas transmembrana
chamadas claudinas e ocludinas que, juntamente
com protenas perifricas de membrana intracelular
(protenas ZO), ancoram fitas de actina do
citoesqueleto de clulas do epitlio do intestino
delgado dos mamferos.

No intestino
atuam como barreira contra a difuso de algumas protenas de
membrana e lipdeos entre os domnios apical e basolateral da
membrana plasmtica (transporte transcelular)
selam as clulas vizinhas para impedir a passagem de protenas
marcadoras de baixo peso molecular

Vdeos 19.1 / 16.9 / 19.2

Junes septadas (em invertebrados) - cinturo contnuo

ao redor de cada clula epitelial, onde as membranas
plasmticas que interagem so ligadas por protenas
organizadas paralelamente e com periodicidade regular.

Junes de ancoramento
formam estrutura que liga filamentos do citoesqueleto de uma clula ao de outra
clula vizinha
so muito abundantes em tecidos que sofrem estresse mecnico como o tecido
cardaco e a epiderme
so compostas principalmente por protenas de ancoramento intracelular e
protenas de adeso transmembrana, mas muitas junes possuem protenas
sinalizadoras intracelulares

Estas junes ocorrem de duas formas:

- Junes Aderentes e Desmossomos
- Adeses Focais e Hemidesmossomos

Junes aderentes
mantm as clulas unidas
so formados por protenas de adeso transmembrana da famlia das caderinas
conectam os filamentos de actina entre as clulas
no tecido epitelial, forma uma estrutura conhecida como cinturo de adeso, que se
localiza abaixo das junes oclusivas
Os feixes de actina, ligados s caderinas e protenas de ancoramento, formam uma
malha, que pode contrair por associao a protenas motoras.

Desmossomo

Os desmossomos formam uma ponte entre duas clulas vizinhas, por

onde se conectam os filamentos intermedirios, formando uma estrutura
de grande fora tensora
Sua estrutura composta por vrias protenas de ancoramento
intracelular (placoglobina e desmoplaquina) responsveis pela conexo
do citoesqueleto s protenas de adeso transmembrana (desmoglena e
desmocolina) que pertecem famlia das caderinas

Vdeo 19.3

Figure 16-17. Keratin filaments join cells together in

cell sheets. Immunofluorescence micrograph of the
network of keratin filaments in a sheet of epithelial cells
in culture. The filaments in each cell are indirectly
connected to those of its neighbors by desmosomes.
(Courtesy of Michael Klymkowsky.)

Figure 16-12. The intermediate filaments in the cytoplasm of a

tissue culture cell. Rat kangaroo epithelial cells (Ptk2 cells) in
interphase were labeled with antibodies to one class of
intermediate filaments (called keratin filaments) and examined by
fluorescence microscopy. (Courtesy of Mary Osborn.)

Adeses
Focais

Formadas por protenas da famlia das integrinas, que se

ligam aos filamentos de actina, proporcionando adeso
clula-matriz extracelular. Assim, por exemplo, clulas
musculares ligam-se aos seus tendes.

Hemidesmossomos
O hemidesmossomo semelhante metade de um desmossomo,
porm liga a membrana plasmtica de uma clula lamina basal
adjacente, por meio da interao de filamentos de queratina protena
transmembranar integrina.

Filamentos Intermedirios promovem interao clula-clula e

clula-matriz-extracelular

Figure 11.34. Attachment of intermediate filaments to desmosomes and hemidesmosomes (B) Schematic of a
desmosome. Intermediate filaments are anchored to sites of cell-cell adhesion by desmoplaskin. (C) Schematic of a
hemidesmosome. Intermediate filaments are anchored to an integrin by plectin. (A, Don Fawcett/Photo Researchers,
Inc.)

Figure 12.61. Junctions between cells and the extracellular matrix Integrins mediate two types of stable junctions in which the
cytoskeleton is linked to the extracellular matrix. In focal adhesions, bundles of actin filaments are anchored to the subunits of most
integrins via associations with a number of other proteins, including -actinin, talin, and vinculin . In hemidesmosomes, 64 integrin
links the basal lamina to intermediate filaments via plectin.

Vdeo 1.1

Junes Comunicantes
Conhecidas tambm por nexos, juno em hiato ou gap junction,
so partculas cilndricas que fazem com que as clulas entrem em
contato umas com as outras, para que funcionem de modo
coordenado e harmnico. Esses canais permitem o movimento de
molculas e ons, diretamente do citosol de uma clula para outra.

So formados por conexinas,

protenas
transmembranares,
que se unem formando o canal
chamado conexon que constitui
a juno tipo fenda.

As clulas vegetais possuem um tipo de juno chamada

plamodesmata ou plasmodesmos, que conectam diretamente o
citoplasma de uma clula a outras clulas adjacentes. Cada
plasmodesmata revestido com uma membrana plasmtica comum
s duas clulas ligadas e contm uma estrutura tubular, o
desmotbulo, que contnuo com o retculo endoplasmtico liso.