FACULDADE DE MEDICINA DE RIBEIRO

PRETO

BIOQUIMICA GERAL RFM 0004

CINETICA ENZIMATICA

Prof. Dr. Vanderlei Rodrigues

Departamento de Bioqumica e Imunologia
-2014-

HISTRICO
Em 1913, Michaelis e Menten desenvolveram uma equao para examinar a
cintica das reaes enzimticas.
O modelo pressupe que o E liga-se ao S formando um complexo ES para em
seguida liberar o produto P
complexo enzima substrato complexo enzima produto

componentes

livres

Substrato(S) + Enzima (E)

(ES)

(EP)

E+P

A proporo de ES formado limita a velocidade da reao:

v= velocidade inicial da reao
v= kcat (ES)
kcat= constante de catalise
(ES)= concentrao do complexo ES

CINTICA ENZIMTICA
Velocidade reao (v)
Vmax.

Como explicar este comportamento

cintico

Vo

0
0

(S)

concentrao do substrato

EQUAAO DE MICHAELIS-MENTEN
k1

S + E
(Et) (S)

ES
k-1

k2 +

k2

k-2

(ES) =
k-1 +

(S)

k1

A reao acima, mostra que existe um equilbrio entre os

componentes da reao e que o complexo ES rapidamente
formado. A sua decomposio em E e P o processo
limitante da velocidade.
V0 = k2 (ES)

Velocidade inicial da reao

Vmax = k2 (Et)

Velocidade mxima

Velocidade Inicial (V0)

Equao de Michaelis-Menten
Velocidade Mxima (Vmax.)

V0 = k2 (ES)
(Et)=(ES)

Nesta situao temos

(ES) = (Et) (S)

k-1 + k2 + (S)
k1

Vmax. = k2 (Et)

V0 = k2 (Et) (S)
k-1 + k2

V 0 = Vmax. (S)
+ (S)

k-1 + k2

k1

+ (S)

k1
Km

(Constante de Michaelis-Menten)

V0 = Vmax. (S)
Km + (S)

EQUAO DE

CLCULO DO Km
Velocidade da reao (V)

Vmax.
Quando Km = (S) teremos
V0 = Vmax (S)
Km + (S)
V0 = Vmax (S)
(S) + (S)
V0 = Vmax (S)
2 (S)
V0 = Vmax
2

V0
Km
substrato (S)

Concentrao do

QUAL O SIGNIFICADO DO Km?

O Km, indica a afinidade do substrato perla enzima. Quanto maior o
valor do Km, maior afinidade da enzima pelo substrato.
Abaixo, temos a cintica de duas enzimas a glicoquinase e a
hexoquinase, onde ambas catalisam a mesma reao, a
fosforilao da glicose em glicose-6-fosfato

A glicoquinase com maior valor de Km para a glicose, fosforila a

TRANSFORMAO DA CURVA DE MICHAELIS-MENTEN EM

UMA RETA DE LINEWEAVER-BURK E DE EADIE-HOFSTEE
PARA O CLCULO DO Km E DA Vmax.

Aos grficos mostram a velocidade (V) versus

concentrao do substrato (S):
A. GRFICO DE MICHAELIS-MENTEN
B. GRFICO DE LINEWEAVER-BURK
C. GRFICO DE EADIE-HOFSTEE

INIBIO ENZIMTICA
INIBIO COMPETETIVA:
Neste tipo de inibio , o inibidor tem estrutura semelhante
ao do substrato
e com isto ele dificulta a entrada do substrato no sitio de
ligao com a enzima.

A INIBIO COMPETITIVA ALTERA O VALOR DO Km SEM

ALTERAR A VELOCIDADE MXIMA COMO MOSTRAM OS
GRFICOS ABAIXO:

EXEMPLOS DE INIBIO COMPETIVA NA PRTICA MDICA:

1. Tratamento da hipertenso
Angiotensinognio
Rim

Renina
Angiotensina I

Angiotensina II

Presso
Enzima Conversora de

Angiotensina (ECA)
Inibio pelo Captopril
(competitiva)
2. Envenenamento pelo Metanol
Metanol
(cegueira)

Aldedo Frmico

Altamente txico

lcool desidrogenase
Etanol
Metabolizado

Aldedo Actico

Acetato

INIBIO NO COMPETITIVA
Neste tipo de inibio, o inibidor liga se
na enzima em um stio diferente de
ligao do substrato

A inibio no competitiva altera a velocidade mxima

A inibio no competitiva no altera o valor do Km

EXEMPLO DE INIBIO NO-COMPETITIVA:

Um exemplo clssico o envenenamento por

inseticida tipo organofosforado onde o inseticida
liga irreversivelmente enzima
acetilcolineesterase.
Acetilcolina

Colina + Acetato

Acetilcolinesterase

Acetilcolina

Acetilcolinesterase-organofosforado (inibio no
competitiva)